UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOMAS DE ZAMORA MAESTRIA EN FLORICULTURA "Bases para un programa de mejoramiento genético en Alstroemeria" Tesis presentada por el Ing. Agr. Conrado A. Pakoca para optar por el título de Magister en Floricultura 2014 AGRADECIMIENTOS Al Instituto de Floricultura CIRN INTA A la Cooperativa Argentina de Floricultores Ltda ÍNDICE GENERAL Resumen 1 Abstract 3 1 Introducción 5 1.1 Floricultura en Argentina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 1.2 Historia del cultivo de Alstroemeria en Argentina . . . . . . . . . . . 6 1.3 Sistemática y distribución geográfica del género Alstroemeria . . . 11 1.4 Morfología y biología floral . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 1.5 Cariotipo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16 1.6 La hibridación interespecífica y el rescate de embriones como es- trategia del mejoramiento de Alstroemeria . . . . . . . . . . . . . . 19 2 Objetivos 25 2.1 Objetivo general . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 2.2 Hipótesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 2.3 Objetivos específicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 3 Materiales y Métodos 27 3.1 Material vegetal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 3.2 Evaluaciones preliminares . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 3.2.1 Estimación de la viabilidad del polen . . . . . . . . . . . . . 29 3.2.2 Evaluación del crecimiento del tubo polínico . . . . . . . . . 30 3.3 Cruzamientos dirigidos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 3.3.1 Crecimiento del ovario post polinización . . . . . . . . . . . 32 3.4 Rescate de óvulos in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33 3.4.1 Caracterización del crecimiento de los óvulos in vitro . . . . 34 3.4.2 Desarrollo de brotes, raíces y aclimatación . . . . . . . . . . 35 3.4.3 Coeficiente de eficiencia reproductiva . . . . . . . . . . . . . 35 3.5 Estimación del contenido relativo de ADN por citometría de flujo . . 36 3.6 Registro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 4 Resultados y Discusión 39 4.1 Evaluaciones Preliminares . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 4.1.1 Estimación de la viabilidad del polen . . . . . . . . . . . . . 39 4.1.2 Evaluación del crecimiento del tubo polínico . . . . . . . . . 40 i 4.2 Cruzamientos dirigidos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44 4.2.1 Crecimiento del ovario post polinización . . . . . . . . . . . 44 4.3 Rescate de óvulos in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45 4.3.1 Caracterización del crecimiento de los óvulos in vitro . . . . 45 4.3.2 Germinación in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49 4.3.3 Análisis conjunto del crecimiento de los ovarios post polini- zación, caracterización de los óvulos, germinación in vitro y producción de plántulas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52 4.3.4 Coeficiente de eficiencia reproductiva (CER) . . . . . . . . . 56 4.3.5 Desarrollo brotes, raíces y aclimatación . . . . . . . . . . . 59 4.4 Caracterización del contenido relativo de ADN mediante citometría de flujo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63 5 Conclusiones Generales 69 Bibliografía Consultada 71 ii INDICE DE TABLAS Tabla 1 Variedades y número de plantas introducidas en la primera importación de Alstroemeria para producción de flor de corte en la Argentina (1996) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 Tabla 2 Variedades de Alstroemeria clasificadas por su porcentaje de participaciónyempresasfitomejoradoraspresentesenelmer- cado a finales del año 2008. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 Tabla 3 Especies de Alstroemeria nativas de Argentina y su distribu- ción geográfica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 Tabla 4 Especies,variedadesylugarderecoleccióndelacolecciónde Alstroemeria del Instituto de Floricultura . . . . . . . . . . . . 28 Tabla 5 Porcentaje de viabilidad del polen de las entradas de Alstroe- meria psittacina y las variedades comerciales (%) por el mé- todo de Greissl (1989) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40 Tabla 6 Germinación del polen y crecimiento del tubo polínico en cru- zamientosentreAlstroemeriapsittacina,A.aureayvariedades comerciales. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42 Tabla 7 Volumen del ovario a 5 y 14 DPP (mm3) en cruzamientos en- tre especies y variedades de Alstroemeria: valores mínimos y máximos en cada grupo de cruzamientos . . . . . . . . . . . . 47 Tabla 8 Crecimiento de los óvulos (ECO) a diferentes edades al res- cate (DPP) en diferentes combinaciones (%) . . . . . . . . . . 48 Tabla 9 Germinación de óvulos (%) respecto al total de óvulos involu- crados en la polinización de todos los cruzamientos por com- binación. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51 Tabla 10 Combinaciones en las que se obtuvo germinación de embrio- nesenrescatesrealizadosadiferentestiempospostpolinización 53 Tabla 11 Volumen teórico del ovario al rescate (VTOR) en mm3 a 14 DPP en ‘Belvedere’ (cid:2) 20090602A4 y 'Belvedere' (cid:2) 20091009B1 y sus recíprocos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54 Tabla 12 Volumen teórico del ovario al rescate (VTOR) en mm3 de ‘Vir- ginia’ (cid:2) 20091009B1 y ‘Virginia’ (cid:2) 20100729C1 en rescates a 5 y 14 DPP en cruzamientos cuyos óvulos rescatados no germinaron . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56 iii Tabla 13 Cruzamientos totales (Nº), cruzamientos que produjeron óvu- los que germinaron (Nº) y cruzamientos de los cuales se ob- tuvoplantas(Nº)paracadaelestadodecrecimientodelóvulo (ECO) observado a los 30 días de cultivo in vitro . . . . . . . 56 Tabla 14 Coeficientedeeficienciareproductiva(CER)para’Belvedere’, ‘Virginia’, 10#233 (A. aurea) y 10#263 (A. psittacina) en dife- rentes combinaciones. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58 Tabla 15 Número de cruzamientos, número de óvulos rescatados, nú- merodeembrionesgerminados,númerodeplantasobtenidas y porcentaje de plantas obtenidas respecto al número de óvu- losrescatadosyaldeóvulosgerminadosenrescatesa5y14 DPP . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61 Tabla 17 Diferencia entre especies, variedades e híbridos respecto al trigo ‘Chinese Spring’ en el contenido relativo de ADN evalua- do por DAPI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64 iv
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