aplicaciones analíticas de métodos basados en luminiscencia molecular en combinación con ...

556 Pages·2007·7.83 MB·Spanish

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA
FACULTAD DE CIENCIAS
UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA
TESIS DOCTORAL
APLICACIONES ANALÍTICAS DE MÉTODOS BASADOS EN
LUMINISCENCIA MOLECULAR EN COMBINACIÓN CON
METODOLOGÍAS DINÁMICAS
Ana María Jiménez Girón
Badajoz, 2007
Edita: Universidad de Extremadura
Servicio de Publicaciones

Caldereros 2. Planta 3ª
Cáceres 10071
Correo e.: [email protected]
http://www.unex.es/publicaciones
APLICACIONES ANALÍTICAS DE MÉTODOS BASADOS EN
LUMINISCENCIA MOLECULAR EN COMBINACIÓN CON
METODOLOGÍAS DINÁMICAS
por
Ana María Jiménez Girón
VISADO en Badajoz a 10 de Abril de 2007
Fdo.- Dr. Arsenio Muñoz de la Peña Castrillo
Catedrático del Departamento de Química Analítica
de la Facultad de Ciencias de la Universidad de Extremadura
Fdo.- Dra. Dña. Isabel Durán Martín-Merás
Profesora Titular del Departamento de
de la Facultad de Ciencias de la Universidad de Extremadura
Memoria de Investigación presentada para optar al Grado de Doctor, dentro del Programa
de Doctorado “Ciencias Químicas”, Bienio 2003-2005, y realizada en el Departamento de
Química Analítica de la Universidad de Extremadura.
Fdo.: Ana María Jiménez Girón

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA
Campus Universitario
Avda. de Elvas, s/n
06071-BADAJOZ
Teléfono 924 289 300/924 289 375
FAX [phone]
E-mail: [email protected]
ARSENIO MUÑOZ DE LA PEÑA CASTRILLO, Catedrático y Director del
Departamento de Química Analítica de la Facultad de Ciencias de la Universidad de
Extremadura
I N F O R M A:
Que el trabajo que se presenta en esta TESIS DOCTORAL, con el título de
"APLICACIONES ANALÍTICAS DE MÉTODOS BASADOS
EN LUMINISCENCIA MOLECULAR EN COMBINACIÓN
CON METODOLOGÍAS DINÁMICAS", ha sido realizado bajo la
dirección del Dr. D. Arsenio Muñoz de la Peña Castrillo y la Dra. Dña. Isabel
Durán Martín-Merás, en el Departamento de Química Analítica de la Facultad de
Ciencias de la Universidad de Extremadura y reúne todos los requisitos para poder
optar al Grado de Doctor en Ciencias Químicas.
Badajoz, 10 de Abril de 2007

Me gustaría expresar mi agradecimiento a todas las personas que, de un modo u
otro, me han ayudado para que la realización de esta tesis fuese posible o, al menos, más
llevadera.

En primer lugar, quiero dar las gracias a mis directores de tesis, el Dr. Arsenio
Muñoz de la Peña y la Dra. Isabel Durán Martín-Merás, por guiarme tan adecuadamente
estos cuatro años, siendo para mí, no sólo excelentes maestros, sino magníficas
personas.

A todos los profesores del Dpto. de Química Analítica, gracias por vuestro
cariño y enseñanzas estos años. Me gustaría hacer una mención especial a la Dra.
Anunciación Espinosa Mansilla, por su gran disponibilidad siempre que he necesitado
su ayuda y al Dr. Francisco Salinas, que me abrió las puertas del departamento.

A Manolo Caro, por solucionarme todos los problemas informáticos y
burocráticos con tanta eficacia y alegría.

A todos mis compañeros de laboratorio, a los que me acogieron y ayudaron
cuando comencé (Flori, David, Diego B., Antonio, Belén, Mª José, Manolo, Santos y
Loles) y a los que han ido llegando (Diego A., Alicia, José Manuel, Prado y Nancy)
formando parte de esta “familia” con la que he compartido tantas horas, risas y charlas.

Al Dr. J. A. Murillo, a la Dra. A. Alañón y demás miembros del Dpto. de
Química Analítica y Tecnología de los Alimentos de la Universidad de Castilla la
Mancha.

Al Dr. A. Olivieri, por haberme enseñado tantísimo en sólo tres meses y por
haberme tratado como a una hija durante mi estancia en Rosario. También quisiera dar
las gracias a la Dra. G. Escandar, Dra. P. Damiani y resto de miembros del Dpto. de
Química Analítica de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de la
Universidad Nacional de Rosario. Y no puedo olvidarme de Ale, el mejor compañero de
laboratorio y amigo.

Al Dr. H. Goicochea por aclararme cualquier duda siempre en tan poco tiempo.
A mis amigos Jesús y Ana, con los que he compartido la carrera y casi toda la
tesis. Gracias por vuestra comprensión, vuestra ayuda y por haberme hecho más alegre
cada día en la universidad. Muchas gracias también a Noelia por ser más que una
compañera de piso, por entenderme tan bien y prestarme sus oídos tantas y tantas
noches.

A mis amigas y mis hermanos, Luis e Isabel, por interesarse y preocuparse de
cada paso que he ido dando, implicándose en esta tesis desde el principio.

A Lluís, por su constante alegría, su paciencia y su incansable esfuerzo para
mostrarme siempre el lado bueno, por hacerme reír a pesar de mis agobios y sobre todo,
muchas gracias por ayudarme a desconectar cuando me parecía imposible no pensar en
otra cosa que no fuera la tesis.

Finalmente, quiero dar las gracias a mis padres, porque siempre me han apoyado
y me han dado su confianza, por sus consejos, por su ayuda y por ser para mí el mayor
ejemplo.

A todos, sinceramente, muchas gracias.
OBJETO DE LA TESIS DOCTORAL

El objeto de esta Memoria de Investigación es el establecimiento de nuevos métodos de
determinación analítica, utilizando como técnica de detección la luminiscencia
molecular (fluorescencia y quimioluminiscencia), en combinación con metodologías
dinámicas. Para ello, en todos los casos, se utilizará el tiempo como parámetro analítico,
con objeto de aprovechar el comportamiento cinético, para proporcionar información
relevante adicional de la especie de interés. Los compuestos a estudiar incluyen el
pesticida organofosforado quinalfos, antibióticos de la familia de las fluoroquinolonas,
norfloxacino, ofloxacino y ciprofloxacino, ácido fólico y metotrexato, ácido fólico y dos
de sus metabolitos, ácido 5-metil tetrahidrofólico y ácido tetrahidrofólico y, finalmente,
procaína y su metabolito ácido p-amino benzoico. Se pretende explorar, por primera
vez, la utilización de quimioluminiscencia resuelta en el tiempo, en combinación con un
método de calibración multivariante de primer orden. Se abordará el desarrollo de
varios métodos de calibración multivariante de segundo orden, utilizando como señales
analíticas matrices de datos de segundo orden, obtenidas registrando espectros de
emisión de fluorescencia en función del tiempo. Finalmente, esta Memoria tiene como
objeto la utilización de datos de tercer orden, obtenidos mediante el seguimiento
cinético de matrices de excitación-emisión (EEMs). Con ello, se pretende abrir nuevas
vías de utilización de datos de tercer orden, prácticamente inexplorados hasta ahora,
proponiendo un nuevo algoritmo genuinamente multidimensional, N-PLS/RTL, que
aporte la flexibilidad inherente a los métodos basados en mínimos cuadrados parciales,
así como la ventaja de segundo orden a datos de cuatro vías.