Validación de la Técnica Analítica para Cuantificación de Carboximetilcisteína solución oral 50 mg

185 Pages·2016·7.55 MB·Spanish

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA, MANAGUA
RECINTO UNIVERSITARIO RUBÉN DARÍO
FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍA
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

MONOGRAFÍA DE GRADUACIÓN PARA OPTAR AL TÍTULO DE
LICENCIADO EN QUÍMICA FARMACÉUTICA

TÍTULO: VALIDACIÓN DE LA TÉCNICA ANALÍTICA PARA
CUANTIFICACIÓN DE CARBOXIMETILCISTEÍNA SOLUCIÓN ORAL
50 mg/mL POR CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA
RESOLUCIÓN (CLAR), LABORATORIOS SOLKA S.A; ENERO -
MARZO 2016.

Autores: Bra. Katherine Danelia Castillo Morales

Bra. Yeribeth Elisa Rodríguez Martínez

Tutora: PhD. Carla Martínez Algaba

Managua, Noviembre 2016
DEDICATORIA

Dedicamos este trabajo:

A Dios, quién supo guiarnos por el buen camino, darnos las fuerzas para
seguir adelante y no desmayar en los problemas que se presentaban,
enseñándonos a encarar las adversidades sin perder nunca la dignidad ni
desfallecer en el intento.

A nuestros padres, quienes nos brindaron su apoyo en todo momento por
sus consejos, sus valores, por la motivación constante que nos han permitido ser
personas de bien, pero más que nada, por su amor.

A nuestra tutora, PhD. Carla Martínez Algaba, por su gran apoyo durante
este trabajo monográfico, por habernos transmitidos los conocimientos obtenidos
durante nuestros estudios profesionales.

A nuestros familiares, que siempre nos ofrecieron su apoyo de forma directa
o indirectamente. Por ello dedicamos este trabajo monográfico con todo el amor y
cariño que se merecen.
AGRADECIMIENTO

En primer lugar, a Dios por brindarnos la oportunidad de vivir, por permitirnos
disfrutar cada momento de nuestras vidas y guiarnos por el camino que él ha
trazado para nosotras.

A nuestros padres, por ser el apoyo más grande durante nuestra educación
universitaria, ya que sin ellos no hubiese sido posible lograr nuestras metas. Por
ser nuestro ejemplo a seguir, por enseñarnos a seguir aprendiendo sin importar
las circunstancias y el tiempo.

Agradecemos especialmente a nuestra tutora PhD. Carla Martínez Algaba
por el tiempo y dedicación brindado durante la elaboración del presente trabajo
monográfico.

A Laboratorios SOLKA S.A. principalmente al Lic. Sergio Ruíz, Gerente de
Operaciones y al Ing. José María Ortiz Sequeira, responsable del Área de
Estabilidad, por el apoyo y colaboración brindada en la realización de esta
monografía.

RESUMEN
Carboximetilcisteína con nombre químico (2R)-2-amino-3-[(carboximetil)
sulfanil] ácido propanóico, es un medicamento mucolítico y mucoregulador con
efecto fluidificante, indicado como coadyuvante en el tratamiento de desórdenes
agudos y crónicos del tracto respiratorio alto y bajo, en la prevención de cuadros
agudos asociados a bronquitis obstructiva crónica.

El presente trabajo se llevó acabo en Laboratorios SOLKA S.A, con el
objetivo de validar la técnica analítica por cromatografía líquida de alta resolución
(CLAR) para la cuantificación de carboximetilcisteína, partiendo de trabajos
anteriores ya que no existe una metodología de análisis para producto terminado
de carboximetilcisteína en las Farmacopeas de referencia, ajustando las
condiciones cromatográficas de trabajo.

Se utiliza un Cromatógrafo de líquidos marca YLClarity, modelo 9100 con
Número de serie 9110, con inyector manual, con detector de arreglo de diodos a
longitud de onda fija de 210 nm, trabajando en el rango de concentraciones 80% a
120%, utilizando como fase móvil Dihidrógeno fósfato monobásico de sodio 0.02M
y metanol (95:5).

Para la validación de la técnica se evalúan los parámetros estadísticos de
desempeño, aptitud del sistema, linealidad, precisión, exactitud, robustez,
especificidad, para cumplir con los requisitos del Reglamento Técnico
Centroamericano Armonizado (RTCA 11.03.39:06), “Productos farmacéuticos.
Validación de Métodos Analíticos para la evaluación de la Calidad de los
Medicamentos”.

La técnica analítica demuestra ser lineal, precisa y exacta, obteniéndose
resultados para r2= 0.9999, con un coeficiente de variación < 2% y con porcentajes
de recuperación de 99.94%, por lo tanto, puede emplearse como método de rutina
en el control de calidad del medicamento.
ÍNDICE
CAPÍTULO I. ASPECTOS GENERALES
1.1 INTRODUCCIÓN ........................................................................................... 1
1.2. OBJETIVOS .................................................................................................. 3
1.2.1. Objetivo general ................................................................................... 3
1.2.2. Objetivos específicos ........................................................................... 3
1.3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .......................................................... 4
1.4. JUSTIFICACIÓN ........................................................................................... 5
1.5. ANTECEDENTES ......................................................................................... 6
CAPÍTULO II. MARCO TEÓRICO
2.1. Validación de métodos analíticos ...................................................... 10
2.1.1. Adecuación del sistema .............................................................. 12
2.1.2. Linealidad e intervalo .................................................................. 13
2.1.3. Exactitud ..................................................................................... 15
2.1.4. Precisión ..................................................................................... 15
2.1.5. Especificidad ............................................................................... 17
2.1.6. Límite de detección (lod) ............................................................. 18
2.1.7. Límite de cuantificación (loq) ....................................................... 19
2.1.8. Robustez ..................................................................................... 19
2.1.9. Documentación de validación ..................................................... 20
2.2. Carboximetilcisteína .......................................................................... 21
2.2.1.Propiedades físico químicas de carboximetilcisteína………………..21
2.2.2. Propiedades farmacológicas…………………………………………..22
2.2.3. Farmacocinética y farmacodinamia de carboximetilcisteína………23
2.3. Cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) .............................. 23
2.3.1 Definiciones cromatográficas ...................................................... 25
2.4 Laboratorios SOLKA S.A ................................................................... 28
CAPÍTULO III. HIPÓTESIS
3 Hipótesis ...................................................................................................... 30
CAPÍTULO IV. DISEÑO METODOLÓGICO
4.1 Descripción del ámbito de estudio ..................................................... 32
4.2 Tipo de estudio .................................................................................. 32
4.3 Población y muestra .......................................................................... 33
4.3.1 Población .................................................................................... 33
4.3.2 Muestra ....................................................................................... 33
4.3.2.1. Criterios de inclusión…………………………………………………….…33
4.3.2.2. Criterios de exclusión…………………………………………...…..33
4.4 Variables y operacionalización .......................................................... 33
4.4.1 Variables independientes ............................................................ 33
4.4.2 Variables dependientes ............................................................... 33
4.4.3 Operacionalización de las variables ............................................ 34
4.5 Material y método .............................................................................. 37
4.5.1 Materiales para recolectar información ....................................... 37
4.5.2 Materiales para procesar la información ..................................... 37
4.5.3 Método de análisis ...................................................................... 37
4.5.3.1 Método analítico por cromatografía liquida de alta resolución
(CLAR)…………… ...................................................................................... 38
4.5.3.1.1 Condiciones cromatográficas ................................................... 38
4.6 Preparación de soluciones ................................................................ 39
4.6.1 Soluciones reactivos ................................................................... 39
4.6.2 Fase móvil ................................................................................... 39
4.6.3 Preparación del estándar de carboximetilcisteína 499.5 µg/ml
(100%)…………… .................................................................................... 40
4.6.5 Preparación del placebo ............................................................. 43
4.6.5.1.Solución placebo cargado 80%.................................................44
4.6.5.2.Solución placebo cargado 100%...............................................44
4.6.5.3. Solución placebo cargado 120%.............................................44
4.6.6 Parámetros de validación de la técnica analítica para la
cuantificación de principio activo carboximetilcisteína .............................. 45
4.7 Parámetros para la validación del método para la cuantificación de
carboximetilcisteína S.O 50 mg/ml ............................................................. 49
4.7.1 Parámetros estadísticos para linealidad del método ................... 49
4.7.2 Parámetros estadísticos para precisión del método .................... 50
4.7.3 Parámetros estadísticos para exactitud del método .................... 51
4.7.4 Parámetros estadísticos para robustez del método .................... 52
4.8 Reactivos, equipos y materiales ........................................................ 53
CAPÍTULO V.ORGANIZACIÓN Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
5.1 Análisis de los resultados ............................................................................ 56
5.1.1 Técnica cromatográfica de líquidos de alta resolución (clar) con
bomba binaria ........................................................................................... 56
5.1.2 Adecuación de sistema ............................................................... 56
5.1.3 Linealidad del sistema ................................................................. 58
5.1.4 Ecuación de la recta de la linealidad del sistema ........................ 60
5.1.5 Test de linealidad del sistema: test de student para la pendiente
(b) en CLAR .............................................................................................. 64
5.1.6 Test de proporcionalidad del sistema: test de student para el
intercepto (a) en CLAR ............................................................................. 66
5.1.7 Test de cochran para el sistema ................................................. 67
5.1.8 Análisis de varianza del sistema en CLAR .................................. 71
5.1.9 Precisión del sistema en CLAR ................................................... 74
5.1.10 Exactitud del sistema en CLAR ................................................... 77
5.1.11 Linealidad del método (carboximetilcisteína) .............................. 82
5.1.12 Test de linealidad del método: test de student para la pendiente
(b) en CLAR .............................................................................................. 87
5.1.13 Test de proporcionalidad del método: test de student para el
intercepto (a) en CLAR ............................................................................. 89
5.1.14 Test de g de cochran del método ................................................ 91
5.1.15 Coeficiente de variación de los factores de respuesta para el
método.. .................................................................................................... 93
5.1.16 Análisis de varianza del método en CLAR .................................. 94
5.1.17 Repetibilidad del método en CLAR ............................................. 97
5.1.18 Precisión intermedia del método en CLAR................................ 100
5.1.19 Exactitud del método de carboximetilcisteína ........................... 107
5.1.20 Robustez del método ................................................................ 111
6 CONCLUSIONES ...................................................................................... 115
7 RECOMENDACIONES ............................................................................. 116
BIBLIOGRAFIA .................................................................................................. 117
ANEXOS
ÍNDICE DE TABLAS
Número Especificaciones Página
Parámetros de desempeño de los procedimientos
Tabla 2.1.1 11
analíticos físico-químicos y potencia microbiológica
Parámetros estadísticos de calidad de los métodos
Tabla 2.2. 12
analíticos
Criterios de aceptación recomendables para
Tabla 2.1.5.1. 18
especificidad
Tabla 2.2.1.1. Propiedades físico químicas carboximetilcisteína 11
Farmacología de carboximetilcisteína 50 mg/mL
Tabla 2.2.2.1. 22
solución oral
Tabla 2.3.1.1. Terminología y ecuaciones cromatográficas 25
Tabla 4.5.3.1.1.1. Condiciones del equipo CLAR 38
Parámetros estadísticos para adecuación del
Tabla 4.6.6.1.1. 45
sistema
Tabla 4.6.6.2.1. Parámetros estadísticos para linealidad del sistema 46
Tabla 4.6.6.3.1. Parámetro estadístico para repetibilidad del sistema 47
Criterio de aceptación para evaluación de
Tabla 4.6.6.4.1. 48
especificidad del sistema
Parámetros estadísticos para evaluar la exactitud
Tabla 4.6.6.5.1. 49
del sistema
Tabla 4.7.1.1. Parámetros estadísticos para linealidad del método 50
Parámetro estadístico para evaluar la repetibilidad
Tabla 4.7.2.1. 51
del método
Parámetros estadísticos para evaluar precisión
Tabla 4.7.2.2. 51
intermedia del método
Parámetros estadísticos para evaluar la exactitud
Tabla 4.7.3.1. 51
del método
Tabla 4.7.4.1. Condiciones de trabajo para la evaluación 52