Universidade de Lisboa Faculdade de Medicina de Lisboa Caracterização do ADN Mitocondrial ...

171 Pages·2009·9.62 MB·Portuguese

Universidade de Lisboa
Faculdade de Medicina de Lisboa

Caracterização do ADN Mitocondrial no Estudo Caso-Controlo da
Infertilidade Masculina

Sara Catarina Reis Gomes da Conceição

Mestrado em Medicina Legal e Ciências Forenses
2008
A impressão desta Dissertação foi aprovada pela
Comissão Coordenadora do Conselho Científico da
Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa em
reunião de 27 de Janeiro de 2009.
Universidade de Lisboa
Faculdade de Medicina de Lisboa
Caracterização do ADN Mitocondrial no Estudo Caso-Controlo da
Infertilidade Masculina

Sara Catarina Reis Gomes da Conceição

Mestrado em Medicina Legal e Ciências Forenses

Dissertação orientada pelo Professor Doutor António Brehm
Co-orientadora Professora Doutora Helena Geada

Todas as afirmações efectuadas no presente documento
são da exclusiva responsabilidade do seu autor, não
cabendo qualquer responsabilidade à Faculdade de
Medicina de Lisboa pelos conteúdos nele apresentados.

Agradecimentos

Em primeiro lugar gostaria de agradecer ao meu orientador, o Professor Doutor António
Brehm, pela oportunidade de efectuar este trabalho de investigação com o grupo do
Laboratório de Genética Humana da Universidade da Madeira. Agradeço a todos os membros
do laboratório pelo suporte e amizade disponibilizada no decorrer desta dissertação. Um
especial agradecimento à Drª Ana Teresa Fernandes e Drª Rita Gonçalves pelo apoio
incondicional que me dedicaram e à Doutora Alexandra Rosa por me ter iniciado e orientado na
área em que se realizou o estudo.
Em segundo lugar, gostaria de expressar a minha gratidão à Professora Doutora Helena
Geada, co-orientadora, pelo auxílio incansável que devotou na execução da presente
dissertação.
Resumo

A escassez de evidências, que suportem uma origem genética para a infertilidade
humana, tem fomentado o interesse nos mais variados estudos e abordagens na tentativa de
esclarecer a etiologia desta patologia.
Sendo desconhecido qualquer estudo sobre a infertilidade masculina envolvendo o ácido
desoxirribonucleico mitocondrial (ADNmt) e o cromossoma Y (Cr Y), surge, neste âmbito, a
realização da presente investigação, a qual teve como objectivos: i) investigar a existência de
uma associação entre os haplogrupos mitocondriais e a patologia, ii) relacionar os dados da
análise do ADNmt com a informação provinda do estudo do cromossoma Y nas mesmas
amostras e iii) indagar uma possível influência, benéfica ou prejudicial, da combinação dos
haplogrupos do ADNmt com os do cromossoma Y, na fixação do fenótipo da infertilidade
masculina.
Deste estudo fizeram parte duas populações do sexo masculino provenientes do Norte
de Portugal: uma constituída por 90 indivíduos férteis, considerada a amostra controlo e uma
segunda de 122 indivíduos inférteis retratando a amostra caso. As amostras foram analisadas
no Laboratório de Genética Humana da Universidade da Madeira (LGH), onde se definiram os
seus haplótipos e respectivos haplogrupos através da sequenciação da primeira região
hipervariável do ADNmt (HVS-I) e ulterior identificação de mutações na região codificante da
molécula.
Os resultados revelaram a ausência de uma associação entre os haplogrupos
mitocondriais e a patologia em estudo. No entanto, ficou perceptível uma hipotética influência
positiva da combinação do haplogrupo CRS mitocondrial com o haplogrupo R do cromossoma
Y na fertilidade masculina. Dos resultados surgiu, também, uma correlação positiva entre a
ocorrência de delecções e a frequência do haplogrupo R do cromossoma Y associado a
qualquer um dos haplogrupos mitocondriais.
Na população de indivíduos férteis evidenciou-se uma predominância do padrão sem
delecção concomitantemente com uma maior frequência de indivíduos pertencentes ao
haplogrupo R. De igual forma, distinguiu-se um padrão coincidente na população de indivíduos
inférteis, reforçado pela diminuição peculiar na ocorrência de delecções em dois subgrupos
particulares do ADNmit, J/T e U/K, combinada com um aumento na frequência de indivíduos R.
Da análise dos resultados obtidos conclui-se que, embora o fundo genético mitocondrial
não seja o principal agente na fixação da patologia poderá, no entanto, influenciá-la quando em
conjunto com outros factores, quer genéticos, quer ambientais.

Palavras-chave: infertilidade masculina, ADN mitocondrial, cromossoma Y, haplogrupos.
Summary

The scarceness of evidences supporting the role of genetics in male infertility has
fomented the interest in wide-ranging studies and approaches in the attempt to clarify the
aetiology of this pathology.
So far as we know, no other study addresses male infertility by correlating mitochondrial
deoxyribonucleic acid (mtDNA) and the Y chromosome (Y-Cr), hence, the accomplishment of
the present investigation which had four objectives: i) to explore the existence of an association
between the mitochondrial haplogroups and the pathology, II) to relate the analysis data of the
mtDNA with the information from the study of the Y chromosome of same samples and iii) to