UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA. FACULTAD DE AGRONOMÍA. IDENTIFICACIÓN, DENSIDAD Y FLUCTUACIÓN DE NEMÁTODOS ASOCIADOS A CULTIVARES DE Vitis vinifera L. PISQUERAS Tesis presentada por la bachiller Alexandra Aline Pacheco Andrade Para optar el título profesional de Ingeniero Agrónomo Arequipa – Perú 2018 JURADO CALIFICADOR ________________________ Ing. M. Sc. Alberto Anculle Arenas PRESIDENTE ________________________ ___________________________ Ing. Rene Quispe Castro Ing. Jose Luís Bustamante Muñoz MIEMBRO SECRETARIO _______________________ Ing. Rene Quispe Castro ASESOR Dedicado A mis abuelos Matías Andrade y Esther Quispitupac QEPD. Por inspirarme a seguir esta carrera y reconectarme con mis raíces A mis padres y mi hermana por su constante apoyo y motivación A Andrés Chura por ser un compañero único y motivarme a avanzar siempre. Agradecimientos A: Andrés Chura por ayudarme en la búsqueda de información y en la realización de los muestreos. Elisabeth Miranda por ayudarme en los muestreos y en el laboratorio de fitonematología. Ing. Rene Quispe por su asesoramiento y guía durante todo trabajo. A la Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa por la subvención brindada para la realización del proyecto e investigación con contrato de subvención N° 189-2016-UNSA. RESUMEN Las vides para la producción de pisco en el Perú y en Arequipa, son de mucha importancia y son frecuentemente afectadas por nematodos. Se realizó la identificación, densidad y fluctuación poblacional de nemátodos en los cultivares de ‗Moscatel‘, ‗Torontel‘, ‗Italia‘, ‗Quebranta‘, ‗Negra Criolla‘ y ‗Negra Mollar‘ en las etapas de yema de invierno (A), hojas desplegadas (E), floración (I) y maduración (N), desde el mes de setiembre de 2016 a setiembre de 2017. En la Irrigación San Isidro, Arequipa, Perú. Se tomó muestras de suelo, a la profundidad de 30 cm, siguiendo la forma de zigzag en el campo y repitiendo el muestreo por etapa de crecimiento en un campo ubicado en la Irrigación de San Isidro en la provincia de Arequipa. Para el procesamiento del suelo y recuperación de los nemátodos del suelo se utilizó las técnicas de la bandeja de bearman modificada y centrifugación en azúcar de 100 cm3 de suelo. Se analizó los datos con los estadísticos chi-cuadrado y se calculó la desviación estándar. Como resultado se identificó diez géneros de nemátodos fitoparásitos: Meloidogyne, Xiphynema, Pratylenchus, Tylenchorhynchus, Aphelenchus, Helicotylenchus, Rotylenchus, Scutellonema e integrantes de dos familias Criconematidae y Trichodoridae Entre los no fitoparásitos se identificó 2 familias: Rhabditidae y Dorylaimidae. Se halló en todos los cultivares en estudio, el nematodo del género Meloidogyne, fue el más abundante y considerándolo el más importante por su alta capacidad de causar daño económico. Fue seguido del género Xiphinema. Los nemátodos de la familia Criconematidae con poblaciones importantes. Nemátodos de la familia Trichodoridae se halló en los cv. ‗Torontel‘, ‗Quebranta‘ y ‗Negra Mollar‘. En cuanto al nemátodo del género Pratylenchus se halló en todos los cultivares de vid evaluados excepto en el cv. ‗Italia‘. El género Tylenchorhynchus se halló en los cv. ‗Torontel‘, Moscatel e Italia. El género Helicotylenchus y Aphelenchus se halló en el cv. ‗Moscatel‘. El generó Rotylenchulus se halló en los cv. ‗Italia‘ y ‗Negra Criolla‘. Del género Scutellonema se halló en los cv. ‗Quebranta‘ y ‗Negra Mollar‘. La fluctuación de los cv. ‗Torontel‘, ‗Quebranta‘ y ‗Negra Mollar‘, fue de poblaciones bajas de nemátodos desde la etapa de yema de invierno a maduración, excepto de Meloidogyne que creció entre 400 a 600 nemátodos por 100 mL de suelo. Los tres cultivares muestran aparentemente susceptibilidad a Meloidogyne. La fluctuación en el cv. ‗Moscatel‘ no mostro una tendencia clara, con bajas poblaciones en todas la etapas fenológicas mostrándose como tolerante a los nemátodos. La fluctuación en el cv. ‗Italia‘ en cuanto a los Criconematidae mostro una tendencia positiva llegando a 200 y 250 nemátodos por 100 mL de suelo y Meloidogine subió su población entre 100 y 200 nemátodos por 100 mL de suelo, se muestra poco susceptible. La fluctuación del cv. ‗Negra Criolla‘, muestra una alta población inicial de Criconematidaes (230 nemátodos por 100 mL de suelo), seguido de Meloidogyne (100 nemátodos por 100 mL de suelo) en la etapa fenológica de yema de invierno y hojas desplegadas. ÍNDICE CAPÍTULO I INTRODUCCIÓN ..................................................................................... 1 CAPÍTULO II REVISIÓN DE BIBLIOGRAFÍA ............................................................. 3 2.1. GENERALIDADES DE LA VID Y SU CULTIVO: ......................................... 3 2.1.1. Clasificación botánica .................................................................................. 3 2.1.2. Organografía: ............................................................................................... 4 2.1.3. Manejo de cultivo: ....................................................................................... 5 2.1.4. Fenología del cultivo de vid......................................................................... 5 2.1.5. Ciclo reproductivo ....................................................................................... 6 2.1.6. Ciclo vegetativo ........................................................................................... 6 2.1.7. Variedad o cultivar....................................................................................... 8 2.1.8. Variedades pisqueras ................................................................................... 9 2.1.9. Uso de los frutos de la vid y su producción ............................................... 12 2.1.10. Nutrición y fertilización ............................................................................. 12 2.1.11. Plagas y enfermedades ............................................................................... 13 2.2. GENERALIDADES DE LOS NEMÁTODOS ................................................ 14 2.2.1. Tipos de nemátodos ................................................................................... 14 2.2.2. Nemátodos parásitos de plantas ................................................................. 15 2.2.3. Ciclo de vida .............................................................................................. 15 2.2.4. Interacción con bacterias, hongos y virus .................................................. 15 2.2.5. Sintomatología ........................................................................................... 15 2.2.6. Supervivencia de los nemátodos fitoparásitos ........................................... 16 2.3. NEMÁTODOS FITOPARÁSITOS EN LA VID ............................................. 17 2.3.1. Nemátodo del nudo de la raíz, Meloidogyne spp. ...................................... 18 2.3.2. Nemátodo Daga, Xiphinema spp. .............................................................. 21 2.3.3. Nemátodos del anillo, Criconematidae ..................................................... 22 2.3.4. Otros nemátodos encontrados en Vid ........................................................ 23 2.4. ECOLOGÍA DE LOS NEMÁTODOS: ............................................................ 25 2.4.1. Hábitos alimenticios de los nemátodos:..................................................... 26 2.4.2. Rol de los Nemátodos en el Manejo de Ecosistemas Agrícolas ................ 27 2.4.3. Estructura y Procesos Poblacionales.......................................................... 27 2.4.4. Fluctuación estacional de las poblaciones de Nemátodos ......................... 29 2.4.5. Factores que regulan la densidad poblacional ........................................... 30 CAPÍTULO III MATERIALES Y MÉTODOS .............................................................. 32 3.1. UBICACIÓN ..................................................................................................... 32 3.2. MATERIALES: ................................................................................................ 32 3.2.1. Material vegetal: Cultivares de vides pisqueras ........................................ 32 3.2.2. Material de campo ..................................................................................... 32 3.2.3. Material de laboratorio............................................................................... 33 3.2.4. Material para el método de la bandeja de Bearman ................................... 33 3.2.5. Materiales para la extracción de nemátodos por medio de centrifugación en azúcar………………………………………………………………….…………..33 3.3. MÉTODOS: ...................................................................................................... 34 3.3.1. Metodología de campo: ............................................................................. 34 3.3.2. Metodología de laboratorio:....................................................................... 36 3.3.3. Identificación y Contaje Nemátodos: ........................................................ 39 3.4. RECOLECCIÓN DE DATOS DE LOS CULTIVARES EN ESTUDIO: ........ 40 3.4.1. Momentos de muestreo .............................................................................. 40 3.4.2. Características estudiadas. ......................................................................... 40 3.5. CROQUIS DEL CAMPO ................................................................................. 41 3.6. ANALISIS DE SUELO .................................................................................... 42 3.7. METODOLOGÍA PARA EL ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS DATOS. 42 CAPÍTULO IV RESULTADOS Y DISCUSIÓN ........................................................... 43 4.1. NEMÁTODOS ASOCIADOS A SEIS CULTIVARES DE VID .................... 43 4.2. NEMÁTODOS ENCONTRADOS EN LOS CULTIVARES DE VID Y SU FLUCTUACIÓN EN EL TIEMPO: ............................................................................ 44 4.2.1. Poblaciones de nemátodos asociados a los cultivares de vid ..................... 44 4.2.2. Nemátodos del género Meloidogyne en cuatro etapas fenológicas ........... 45 4.2.3. Número de nemátodos del género Xiphinema en cuatro etapas fenológicas. …………………..........…………………………………………………………..49 4.2.4. Numeró de nemátodos de la familia Criconematidae ............................... 51 4.2.5. Nemátodos de no fitoparásitos:.................................................................. 53 4.3. POBLACIONES DE NEMÁTODOS POR CULTIVAR ................................. 56 4.3.1. Cultivar ‗Torontel‘: .................................................................................... 56 4.3.2. Cultivar ‗Moscatel‘: ................................................................................... 58 4.3.3. Cultivar ‗Italia‘: ......................................................................................... 60 4.3.4. Cultivar ‗Quebranta‘: ................................................................................. 61 4.3.5. Cultivar ‗Negra Criolla‘ ............................................................................. 63 4.3.6. Cultivar ‗Negra Mollar‘: ............................................................................ 65 CAPÍTULO V CONCLUSIONES ................................................................................. 67 CAPÍTULO VI RECOMENDACIONES ...................................................................... 68 CAPÍTULO VII BIBLIOGRAFÍA ................................................................................. 69 ANEXOS ......................................................................................................................... 74 INDICE DE FIGURAS Figura 1: Representación del sistema radicular de una vid obtenida a partir de estaca con cuatro raíces principales. .................................................................................................... 5 Figura 2: Inflorescencia Chardonnay al comienzo de la floración (izquierda) y en plena floración (derecha), con un inserto que muestra un primer plano de un grupo de flores. . 6 Figura 3: Etapas de crecimiento de la vid según Baillod y Baggiolini (1993) ................. 7 Figura 4: Diagrama del ciclo de vida del nemátodo del nudo de la raíz, Meloidogyne. 20 Figura 5: Nemátodo de anillo que muestra anulaciones ................................................. 23 Figura 6: Región de la cabeza y la faringe de cuatro nemátodos encontrados en entornos como el suelo y el agua .................................................................................................... 26 Figura 7: Marcado de las plantas .................................................................................... 35 Figura 8: Muestras embolsadas y etiquetadas muestreo ................................................ 35 Figura 9: Homogenización de las muestras. ................................................................... 36 Figura 10: Bandeja de Bearman modificado. ................................................................. 37 Figura 11: Criconematodo obtenido por el método de la centrífuga. ............................. 38 Figura 12: Centrífuga del Laboratorio de Fitonematología y muestra en Siracusa. ....... 39 Figura 13: Croquis del área de muestreo. ....................................................................... 41 Figura 14: Proporción de los nemátodos fitoparásitos y no fitoparásitos del cultivo de vid en San Isidro. ............................................................................................................. 44 Figura 15: Proporción de los nemátodos fitoparásitos del cultivo de vid en San Isidro. 45 Figura 16: Poblaciones de Meloidogyne en 4 etapas fenológicas del cultivo en un año.47 Figura 17: Fluctuación de las poblaciones de Meloidogyne …………………………..47 Figura 18: Planta con crecimiento deprimido. ................................................................ 48 Figura 19: Poblaciones de Xiphinema en 4 etapas fenológicas del cultivo en un año (en escala de 100). .................................................................................................................. 50 Figura 20: Fluctuación de las poblaciones de Xiphinema (N° de nemátodos.100cm3de suelo en el tiempo). .......................................................................................................... 50 Figura 21: Poblaciones de criconematodos en 4 Etapas Fenológicas del cultivo. .......... 52 Figura 22: Fluctuación de las Poblaciones de Criconematodos (N° de nemátodos.100cm3de suelo contra el tiempo transcurrido). ........................................... 53 Figura 23: Poblaciones de Nemátodos en 100 cm3 de suelo por Etapa Fenológica en el cv. ‗Torontel‘. .................................................................................................................. 57 Figura 24: Poblaciones de nemátodos en 100 cm3 de suelo por Etapa Fenológica en ‗Moscatel‘. ....................................................................................................................... 59 Figura 25: Poblaciones de nemátodos en 100 cm3 de suelo por Etapa Fenológica en ‗Italia‘. .............................................................................................................................. 61 Figura 26: Poblaciones de nemátodos en 100 cm3 de suelo por Etapa Fenológica en el cv. ‗Quebranta‘. ............................................................................................................... 62 Figura 27: Poblaciones de nemátodospor 100 mL de suelo en el cv. ‗Negra Criolla‘. . 64 Figura 28: Poblaciones de nemátodospor 100 mL de suelo en el cv. ‗Negra Mollar‘. .. 66 Figura 29: Primer muestreo – 10 set. 2016- etapa de yema de invierno. ........................ 89 Figura 30: Procesamiento de muestras del primer muestreo (1). ................................... 89 Figura 31: Procesamiento de muestras del primer muestreo (2). ................................... 90 Figura 32: Segundo muestreo – 21 nov. 2016 – etapa de brotamiento. .......................... 90 Figura 33: Procesamiento de muestras del segundo muestreo. ...................................... 91 Figura 34: Tercer muestreo – 2 abr. 2017- etapa de floración (1). ................................. 91 Figura 35: Tercer muestreo – 2 abr. 2017- etapa de floración (2). ................................. 92 Figura 36: Cuarto muestreo – 2 Jul. 2017- etapa de maduración. .................................. 92
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