universidad complutense de madrid mecanismos de la acción neuroprotectora de los ...

190 Pages·2010·6.7 MB·Spanish

by  Ana Maria

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I

MECANISMOS DE LA ACCIÓN
NEUROPROTECTORA DE LOS CANNABINOIDES
EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER.

MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR
PRESENTADA POR

Ana María Martín Moreno

Bajo la dirección de las doctora

María L. de Ceballos la Farga

Madrid, 2011

ISBN: 978-84-694-1426-2 © Ana María Martín Moreno, 2010
UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I

MECANISMOS DE LA ACCIÓN NEUROPROTECTORA
DE LOS CANNABINOIDES EN LA ENFERMEDAD DE
ALZHEIMER

Tesis Doctoral

Ana María Martín Moreno
Madrid, 2010

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I

MECANISMOS DE LA ACCIÓN NEUROPROTECTORA
DE LOS CANNABINOIDES EN LA ENFERMEDAD DE
ALZHEIMER

Memoria presentada por
Ana María Martín Moreno
Para optar por el grado de Doctora

VºBº de la Directora:

Dra. María L. de Ceballos la Farga

A todos los que me han enseñado algo

Agradecimientos

Le agradezco a la Dra. María L. de Ceballos, la dirección de mi tesis doctoral,
todos los consejos recibidos en estos años (científicos y personales), y el estar siempre
cerca (a dos metros de distancia), para cualquier duda o problema.
Gracias por todo el apoyo recibido de Pilar López Larrubia, Sebastián Cerdán y
el servicio del SIERMAC, en general, para la realización de las resonancias magnéticas y
su análisis. A Luis García, Mercedes Delgado y Miguel A. Pozo, del centro PET por el
estupendo trabajo realizado con nuestros animales.
A Jose Luis Trejo por enseñarme tanto sobre comportamiento y a manejar
ciertos programas de informáticos.
A I. Torres-Aleman por los primeros animales de nuestra colonia de
transgénicos. Y a sus técnicos (Lola, Isa) por enseñarme a perfundir, entre otras cosas.
A Mª Ángeles Arévalo por todas las clases de biología molecular, por ayudarme
siempre que lo necesité. Y a Concha Torres por toda la ayuda con los cultivos.
A Jazz y el servicio de macromoléculas por toda vuestra ayuda.
A Laude y el personal de animalario por facilitarme el trabajo, por todos los
animales.
También quiero agradecer a Nadia Innamorato y a Antonio Cuadrado el análisis
de expresión de citoquinas. Y a la Dra. Eva Carro su ayuda en los estudios de transporte
a través de plexos coroides. Ha sido un placer trabajar con vosotros.
A Tibor Harkany por acogerme durante tres meses en su laboratorio de Escocia,
a Jan Mulder por ayudarme durante mi estancia, y a Peppe Tortorielo por las PCRs, y
toda la pasta.

Cuando se llega a este punto, ya has leído un poco: papers, tesis,… y la
verdad es que todas te parecen iguales, incluso los agradecimientos son iguales,
puede que cambien los nombres, pero la esencia es siempre la misma.
Yo, estoy perdida, ya ha acabado aquello que guió mi vida durante los
últimos 6 años, 6 años hace ya… el primer día que entré a trabajar en el laboratorio
era un 10 de septiembre del año 2004, y poco mas puedo decir de aquel día, salvo
que olvidé todo lo que me dijeron. Allí estaban tres personas con las que pasaría la
mayor parte del tiempo: María, Taty y Belén. Nombres llenos de buenos recuerdos,
María, la jefa, mi primera jefa. Taty, el faro de sabiduría del laboratorio, gracias por
darme tu punto de vista sobre la vida y por enseñarme a apreciarlo. Belén, mi amiga
por encima de todo, gracias por los buenos consejos (eran muy buenos, aunque no
te hiciera caso en todos). Y este era mi laboratorio (porque lo siento mío, como
todos los becarios). Cuando era la única becaria me sentía sola, pero pronto me di
cuenta de que las paredes del Instituto Cajal son muy finas, y me sentí parte de
todo. Parte del laboratorio vecino, Bea, Edu, Diego, Wolfi, Vilma, Manolo Jr. gracias
por hablar tan alto, por reíros tanto. Parte del laboratorio de Paty y Ale (o Laura y
Carmen, como me gusta llamarlas), gracias por las charlas sobre los peores
experimentos (la qPCR 2.0, la in situ 2.0,…), sobre los problemas y las soluciones,
por los peces y los caracoles.
Recuerdo cuando Julia y MA. Arévalo estaban al fondo del pasillo, gracias por
los divertidos congresos Julia.
Cada vez se iba haciendo más grande ese laboratorio virtual en el que me
movía, y encontré nuevas caras, Jorge, Lau, Fer, Blanchi, nuevas adquisiciones,
como María, becarios de Laura (Lopez Mascaraque) y Juan (de Carlos), siempre
Agradecimientos

riendo, siempre ocupados, siempre con una sonrisa, tanto jefes como becarios y
Nieves (la encantadora de roedores). Después llegó una amiga, Miriam y con ella
todo su laboratorio (Miri miri, Leyre, Frida, Paula, Ana, Eli) que me dieron compañía
y cariño durante un tiempo, muchas gracias a todas y a su jefa, Carmen, gracias por
preocuparte, por ser encantadora.
Durante un tiempo tuve a David y Susi para hacerme compañía en las cuatro
paredes de mi laboratorio, gracias a ambos por haber estado allí, por enseñarme a
quitar importancia a las circunstancias en que conoces a la gente. Y sobre todo
gracias a Bego porque sin ella nada habría sido lo mismo y a Taty (de nuevo), gracias
a las dos por vuestra gran ayuda en los últimos meses.
Gracias por el trabajo en equipo a Maria y Bego, que han conseguido que
terminara a tiempo y a Edu por animarme a cambiar la maquetación.
Cuanto tiempo ha pasado… iba llegando el final, y con ello las cosas se me
complicaron, porque es complicado ver el final de una época tan importante y
entonces llegaron Asun y Lorenzo, un remanso de paz y compañía, gracias a los dos.
Lo que me recuerda a otras tres personas que me ayudaron a abrirme a este centro,
Elsa, Josune y Carmen (confocal), muy al principio de esta aventura, gracias.
Y durante todo este tiempo siempre tuve a mi lado a mis, primero
compañeros de facultad y ahora amigos, Rubén, Fátima, Tamara, Isa, Josué, Pedro,
Miriam, Ricardo y por supuesto Marta, compañera inestimable y pareja de baile.
Seguramente no lo habría hecho sin vosotros, sencillamente, ni siquiera se me
habría ocurrido.
Gracias Antonio, por meterme en este lio tan genial, porque si pudiera te
daría la mitad del título.
A mi familia, que hacen que me sienta en casa en cualquier sitio con su sola
presencia (mis padres, Maite y Bernardo; mis hermanos, Diego y Bernardo), que
aguantan mis disertaciones científicas estoicamente, y me dan los empujones que
hagan falta. A mi abuelo Benigno, por tirar para
adelante, siempre. Una mención especial a mi
hermano Bernardo y a Antonio por la ayuda
técnica, que han hecho que la escritura haya sido
sencilla y amena. Un agradecimiento extra a mi
hermano Diego por convencerme durante el
primer y duro año de carrera para que no la
dejara.

Y gracias a todas aquellas personas del
Cajal con las que me he cruzado en estos seis
años, gracias por saludar y tener una sonrisa para
cualquiera, porque ese cualquiera pude haber sido
yo, y porque pude necesitarla.

David Petersen © Mouse Guard

Ah! Y que no se me olviden mis preciosos ratones, gracias bichos.
Abreviaturas

2-AG 2- Araquidonoilglicerol
AC Adenilato ciclasa
AChE Acetilcolinesterasa
ADC Coeficiente de difusión aparente del agua
AEA Anandamida o Araquidonoil etanolamida
AICD Amyloid intracelular domain
AMT Anandamide membrane transporter
APH-1 Anterior pharynx-defective-1
ApoE Apolipoproteína E
APP Proteína precursora del amiloide
APPswe Mutación sueca del APP
Aβ β-Amiloide
BACE β site APP cleaving enzyme
BDNF Factor neurotrófico derivado de cerebro
BHE Barrera hemato encefálica
CB Receptor cannabinoide
1/2 1 ó 2
CBD Cannabidiol
Cho Colina
COX Ciclo oxigenasa
Crea Creatina
DAG Diacil glicerol
DAGL Diacilglicerol lipasa
DCL Deterioro cognitivo leve
EGF Factor de crecimiento derivado de endotelio
FAAH Amido hidrolasa de ácidos grasos
FDA Food and Drug Administration
FDG Fluoro-deoxiglucosa
fMLP Formil-Metionina leucina fenilalanina
GABA Acido γ-aminobutírico
GSK Glucogeno sintasa quinarasa
IDE Insuline-like derived enzyme
IFNγ Interferón γ
IL-6 Interleuquina 6
LCR Liquido cefalorraquídeo