The time-dose-mortality model of a Paecilomyces fumosoroseus isolate on the diamondback moth, Plutella xylostella

2007·0.22 MB·

by  Li-Hua, Lu

昆 虫 学 报 !"#$%&#’(’)’*+"$,+&+"$，!"#$%&&’，(（& )）：()’*(’+ ,--.&/(/0)%1)
"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
玫烟色拟青霉对小菜蛾致病力的
时间 剂量 死亡率模型模拟
! !
吕利华2，何余容%，!，武亚敬%，冯 夏2，陈焕瑜2
（2I 广东省农业科学院植物保护研究所，广州 (2&)/&；%I 华南农业大学昆虫学系，广州 (2&)/%）
摘要：小菜蛾 -).#/))$01)’2#/))$是我国南方十字花科蔬菜上的重要害虫，已对田间常用的化学杀虫剂产生了严重的
抗性。为寻找有效的小菜蛾生物防治措施，本实验研究了一株分离自家白蚁的玫烟色拟青霉 -$/"+)’(1"/2
3.(’2’4’2/.（2 -JBK0LMJM&2）对小菜蛾%N/龄幼虫的致病力。实验采用浸液法，供试浓度为2O2&+、2O2&/、2O2&(、2
O2&) 和2O2&’ 个孢子P5Q。结果表明：随玫烟色拟青霉孢子浓度的升高，小菜蛾的感病死亡率增加，在浓度为2O
2&’P5Q时，小菜蛾%、+和/龄幼虫的累计死亡率分别为1)R、S(R和S&R。玫烟色拟青霉对小菜蛾各龄幼虫的致
病力与供试龄期有关，其感病的敏感顺序为%龄、+龄和/龄。用时间0剂量0死亡率模型（C75$0<AE$05A>C687CF 5A<$8，
TUV）对各龄幼虫的致病力数据进行模拟，所建模型均顺利通过WAE5$>0Q$5$E9AX拟合异质性检验，表明模型拟合良
好，并由模型估计出了该菌株对小菜蛾各龄幼虫的致死剂量与致死时间。%龄幼虫接种后第’天、+龄幼虫接种后
第(天、/龄幼虫接种后第/天的QJ 估计值分别为2I2’O2&/、2I//O2&/ 和(I%2O2&/P5Q，QJ 估计值分别为2I1S
(& 1&
O2&)、+IS%O2&’ 和2I%1O2&SP5Q。玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的致死时间与浓度相关，供试各龄幼虫的QT 值随
(&
着孢子悬浮液浓度的增加而递减，在2O2&( N2O2&’P5Q的范围内，%龄幼虫的QT 值从+I2)天降低到2I’%天，+龄
(&
幼虫的QT 从+I%2天降低到2IS+天，/龄幼虫的QT 从+I)1天降低到%I&/天。即%龄幼虫致死所需的时间最短，
(& (&
其次为+龄幼虫，/龄幼虫致死所需的时间最长。结果显示了该株玫烟色拟青霉在小菜蛾的生物防治中具较强的
应用潜力。
关键词：玫烟色拟青霉；小菜蛾；致病力；时间0剂量0死亡率模型；生物防治
中图分类号：Y1)(I1 文献标识码：B 文章编号：&/(/0)%1（) %&&’）&)0&()’0&’
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基金项目：广东省自然科学基金项目（&+%&%2）；广东省科技计划项目（%&&+%&(&2，%&&)3%&+&2&+’）
作者简介：吕利华，男，21)/年生，河北人，博士，研究员，主要从事入侵生物和害虫生物防治研究，405678：898":;<==>7?@A5
!通讯作者B"C9A>DA>@A>>$E=A#<$#@$，405678：F>9$:E@6"?$<"?@#
收稿日期G$@$7H$<：%&&)0220&%；接受日期B@@$=C$<：%&&)02%0&(
7ED 昆虫学报 <.,-=4,%$%+%>/.-?/4/.- 78卷
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小菜蛾 !+#,(++- )*+%&,(++-（5!）是十字花科蔬菜 >CCC；6&)*.)# &)" H&)"#)F#%J，>CCC）。美国南方近年
上的一种重要害虫，在南亚、东南亚及中国南部地区 由于粉虱暴发成灾，玫烟色拟青霉作为其主要病原
发生尤为严重，每年给全世界农业带来的经济损失 微生物而倍受关注（Q%&(J+* (, -+!，0888）。荷兰已
达>8 亿美元（3&:#G&% &)" K+#:*.)，>CC1）。广谱性杀 开发出玫烟色拟青霉的制剂，专用于包括粉虱在内
虫剂的大量长期使用不仅杀伤了天敌，而且使小菜 的刺吸式口器害虫的防治（P&%(& &)" Q%&(J+*，088>）。
蛾对几乎所有在田间使用的化学杀虫剂都产生了严 在国内，研究工作主要集中在玫烟色拟青霉菌株的
重的抗性（K+#:*.) &)" Q;4&)，>CC0），小菜蛾还是对 分离鉴定、代谢产物活性研究、致病性测定等方面，
R*制剂产生抗性的第 >种害虫（3&F&’+)(G，>CC2），近 研究的防治对象主要为烟粉虱、蚜虫和菜青虫（黄勃
年来还对阿维菌素类小菜蛾特效生物制剂产生了不 等，0888；柴一秋等，0888；黄振和任顺祥，0882；张
同程度的抗性（冯夏等，088>）。抗性的产生，化学防 仙红和嵇能焕，088E）。在利用玫烟色拟青霉防治小
治的失败以及对安全和环境等的影响，使得寻找有 菜蛾方面，L:*%#等（>CCC，088>&）比较了 D 株玫烟色
效的生物防治措施成为当今和未来小菜蛾综合治理 拟青霉对小菜蛾的致病力，探讨了致病力与孢子大
的发展方向（3&:#G&%，>CCE）。 小、萌发速度以及孢子对害虫表皮附着能力的关系，
作为小菜蛾综合治理的一个重要的组成部分，昆 并研究了影响菌株对小菜蛾致病力的因子。
虫病原真菌的研究和利用已有数年历史，其中一些菌 V.B&:&G%(’+)&)等（0888）研究了小菜蛾对玫烟色拟青
株在生产上显示出了良好的应用潜力（6+#%%; (, -+!， 霉的敏感性。而我国有关利用玫烟色拟青霉防治小
0880）。能够感染小菜蛾的病原真菌包括根虫瘟霉 菜蛾方面的研究未见报道。
0%%12,2%’- ’-3/.-4&（O#:: &)" Q(:"()J，>CC1）、绿僵菌 在室内筛选对小菜蛾具高致病力菌株的过程
5(,-’2/6/#$ -4/&%1+/-(（S&，0888）、球 孢 白 僵 菌 中，发 现 一 株 原 始 分 离 自 家 白 蚁 ;%1,%,(’$(&
7(-#8(’/- 9-&&/-4-（H&)"#)F#%J (, -+!，>CCD&）、玫烟色 "%’$%&-4#&的玫烟色拟青霉 K6LMNOP6P8> 对小菜蛾
拟青霉 !-(./+%$*.(& "#$%&%’%&(#（& L:*%# (, -+!，>CCC）、 0龄幼虫具有较强的致病力和较快的致死速度（另
镰刀菌 :#&-’/#$ ’B!（H&)"#)F#%J &)" T&4.’，>CC<） 文发表）。本实验利用该株玫烟色拟青霉对小菜蛾
等。其中，球孢白僵菌在实验室、温室和田间应用都 各龄幼虫进行生物测定，并用时间N剂量N死亡率模
显示了对小菜蛾较高的致病力（H&)"#)F#%J &)" 型（3WS模型）对其时间效应和剂量效应进行分析，
T&4.’，>CC<；K+#:*.) (, -+!，>CCD；H&)"#)F#%J (, -+!， 以期明确该菌株对小菜蛾侵染的最佳龄期和浓度，
>CCDF）；而喷施玫烟色拟青霉孢子能显著降低田间甘 进一步评价玫烟色拟青霉防治小菜蛾的潜力，为玫
蓝上小菜蛾的种群密度（UF%&+(4 &)" 5.=，>CC1）。 烟色拟青霉的田间应用提供理论指导。
玫烟色拟青霉地理分布广泛，寄主范围广，特别
是对蚜虫、粉虱等具刺吸式口器的昆虫有很好的防 ) 材料和方法
治效果（陈巍巍和冯明光，>CCC）。上世纪C8年代以
来国外有关其生物学、遗传变异、代谢产物和应用方 )*) 供试虫源与寄主植物
面的研究报道较多（K4(*’ (, -+!，>CCE；5&$#; (, -+!， 0882年 >8月于华南农业大学试验农场的十字
$期 吕利华等：玫烟色拟青霉对小菜蛾致病力的时间8剂量8死亡率模型模拟 )$A
花科蔬菜地采集小菜蛾老熟幼虫，在实验室内用菜 湿培养，根据虫体是否长出菌丝确定其死因。每天
心苗饲养至化蛹，待其羽化产卵后建立的小菜蛾实 更换新鲜菜心叶片。每处理 +% 头幼虫，重复 ) 次，
验室品系作为供试虫源。供试植物品种为广东省农 共-%%头幼虫。以 %;%!0的吐温8<% 的无菌水处理
科院蔬菜所生产的美青油菜一号菜心 !"#$$%&# 的-%%头幼虫作为对照。
’#"#&(%)*)$%$。 !"% 模型模拟分析
小菜蛾的饲养：室内采用蛭石菜心苗法饲养小 时间8剂 量8死 亡 率 模 型（B=#C8DE@C8#EFBGH=BI
菜蛾。在搪瓷盘中铺一层约! "#的高温灭菌蛭石， #EDCH，J3K）同时考虑了时间效应和剂量效应，能够
用$%&’%(热水打破菜心种子的休眠，浸泡) *后， 体现出生物测定数据的完整性和客观性（LEM=CF@N=
将菜心种子均匀撒于蛭石表面，用培养皿盖轻轻拍 *+ #,O，-AA$；冯明光，-AA<），使生物测定数据的分
实，将苗盘放在（+),-）(下，待种子萌发后放于室 析有了更坚实的生物学基础，不仅可以估计传统方
外自然光照条件下培养，待菜心苗长到 . "# 左右 法所产生的信息（如 1J ），还可产生传统方法无法
)%
时，将菜苗放入有小菜蛾蛹和新羽化成虫的产卵笼 产生的信息，即剂量效应随时间变化和时间效应随
（-%% "# / )% "# / .% "#）内。养虫笼顶放有-%0 剂量变化的趋势信息。
蜂蜜糖水棉球，供成虫补充营养。根据成虫产卵情 J3K模型的表述如下：
况更换菜心苗，一般 -+ 或 +. * 更换一次。将更换 ’%- P - Q CR［S Q CR（S!- T!HEU-（% .%））］ （-）
的带虫卵的菜心苗移至室内养虫架饲养，当菜心苗 式中 ’ 表示在时间+（- P-，+，…，-）即接种后第 -
%- -
快被幼虫吃光时，将幼虫转接到新鲜菜心苗上。老
日由剂量.（% P-，+，…，%）引起的试虫累计死亡概
%
熟幼虫化蛹后，收集蛹作为继代繁殖的虫源。饲养
率，待估参数 是与剂量效应有关的斜率， 为对应
! !-
条件为（+) , -）(，相对湿度 $)0 & ’)0，光周期
于 +（从实验开始至第 - 次观察的时间总长）的时间
-
-.12-%3。
效应参数。由于累计死亡概率是时间连续的变量，
!"# 供试菌株和孢子悬浮液的配制
不满足模型模拟的独立性假设。因此，考虑剂量 .
玫烟色拟青霉最初分离自家白蚁，菌株编号为 %
使试虫在时间区间［+ ，+ ］内可能发生的条件死亡
456789:5:%-，在华南农业大学昆虫生态室以 936 -Q- -
概率：
斜面保存于.(的冰箱中。
实验时以接菌后的 936平板在 +)(恒温光照 /%- P - Q CR［S Q CR（S"- T!HEU-（% .%））］ （+）
（-+12-+3）培养箱中培养’天，待菌丝长满培养皿后 式+ 中!与式 - 同义，"- 为描述区间［+-Q-，+-］内的
时间效应参数。条件死亡概率的计算依赖于完全相
加入+% #1 %;%!0吐温8<%无菌水，用接种针轻刮真
互独立的时间区间，它是区间结束时的实际死亡数
菌的菌丝及孢子，将菌液倒入烧杯中，用磁力搅拌器
与区间起始时的存活数之比。由于满足时间变量的
搅拌!% #=>。待孢子完全分散后，用双层医用纱布
过滤菌液，获得孢子悬浮液，弃去杂质和培养基残 独立性假设，式 + 可以进行模型拟合，获得参数"-
物。用血球计数器计数母液的孢子浓度，用 %;%!0 后可以估计参数!- 并由此估计出式-的所有参数。
吐温8<%的无菌水配成 ) 个供试浓度：- / -%!、- / 式+的拟合通过二项式变量［在时间区间［+ ，+ ］
-Q- -
-%.、-/-%)、-/-%$ 和-/-%’ 个孢子?#1。 内死亡比例（/ ）和存活比例（-Q / ）］的最大似然函
%- %-
!"$ 生物测定方法 数逼近而达成。
采用浸液法。选取龄期比较整齐的+、!、.龄初 整个模拟及运算过程在 394 数据处理系统计
幼虫，分别浸于以上)个供试浓度的孢子悬浮液中， 算机软件上完成。
处理-% @后取出，放在干净的滤纸上将多余水分吸
# 结果与分析
干。然后将处理后的每 -%头幼虫放入一直径 A "#
的消毒培养皿内。培养皿底放有一张吸少量蒸馏水 #"! 不同浓度玫烟色拟青霉处理后小菜蛾幼虫的
的滤纸保湿，在培养皿内放 - 片干净的菜心叶片供 逐日死亡情况
食，用保鲜纸将培养皿封好，在薄膜上扎孔通气，置 不同浓度玫烟色拟青霉处理后小菜蛾各龄幼虫
于+)(恒温、光照-+12-+3和相对湿度<%0以上的 逐日累计死亡率见图 -。在接种后的第 + 天，所有
培养箱中培养。每日检查并记录小菜蛾的死亡数， 处理的幼虫均开始发病死亡，且 +龄和 !龄幼虫在
并将死亡的幼虫挑到皿底放有湿滤纸的培养皿中保 接种后第+ 天、. 龄幼虫在接种后第 ! 天就达到了
,$# 昆虫学报 1%!#02!()(’(3&%#/&2&%# ,#卷
死亡高峰。随接种浓度的增加，各处理幼虫的死亡
率也随之增加，在最高浓度!"!#$，小菜蛾 %、&和 ’
龄幼虫的最高死亡率分别为()*、+,*、+#*。感病
死亡的幼虫表现典型的虫生真菌致死症状，虫尸保
湿培养后第% 天开始从体表长出菌丝，随后产生大
量的孢子。尽管对照也有少量（通常低于 !#*）的
幼虫死亡，但无一表现出真菌致死症状。
!"! 玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的#$%模型模拟
由于%、&和’龄幼虫分别在接种$、,和’天后
累计死亡率不再增长，因此分别取%龄幼虫前$天、
&龄幼虫前,天及’龄幼虫前’天的累计死亡率数
据，经与对照的自然死亡率进行校正后，进行时间-
剂量-死亡率模型模拟分析和参数估计。./0模拟
的结果见表!。各处理剂量与时间效应参数的 ! 测
验值均达到极显著水平（" 1 #2###!），即标准误差
相对于参数估计值极小，说明供试菌株的剂量效应
与时间效应极显著。%、&和 ’龄幼虫剂量效应的斜
率 分别为#2,&+)、#2&,’$和#2&,’#，说明%龄幼虫
!
对浓度的增加最为敏感，其次为 &龄幼虫。时间效
图! 接种玫烟色拟青霉后小菜蛾幼虫逐日累计死亡率
应参数在%龄和&龄幼虫接种后第%天（"）、’龄幼
% 3456 ! .789:4;<:==>?>;:@4A8?BC@:;4@<BD@78
虫接种后第& 天（"）达到最大，与实验观察中的死 94:?BE9F:=G?B@7;:CA:8:D@8C@C8:@?8E@H4@7
&
"#$%&’()*%$+,-)(+(.(+$-+
亡高峰期相吻合。
I：%龄%E94EJ@:C；K：&龄&C94EJ@:C；L：’龄’@74EJ@:C6
表& 玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的#$%模型模拟与参数估计
#’()*& +’,’-*.*,/*/.0-’.*1(230..045.6*.0-*718/*7-8,.’)0.2（#$%）-81*).8’//’21’.’83
!"#$%&’()$#*+,(’*’-’*#,* ’5’04/..6*10’-841(’9:-8.6)’,;’*831033*,*4.04/.’,/
条件死亡概率模型（式%） 累计死亡概率模型（式!）
LBE94@4BE:;?BC@:;4@<?B98; L>?>;:@4A8?BC@:;4@<?B98;
参数! 估计值 标准误 !检验 参数! 估计值
M:C:?8@8C! N:;>8 /0 ! @8J@ M:C:?8@8C! N:;>8 N:（C#） =B（A!，#）
%龄%E94EJ@:C
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"’ O&2(’,# #2&!!+ !%2)++# #’ O%2#&)’ #2#)+& O#2#!%#
!：参数符号下标表示接种后相应时间区间（天）。.78J>FJ=C4P@JC8PC8J8E@@78E>?F8CBD9:<JBC@78 &@79:<:D@8C@C8:@?8E@6
/期 吕利华等：玫烟色拟青霉对小菜蛾致病力的时间’剂量’死亡率模型模拟 314
所建模型均通过 !"#$%&’(%$%#)"*拟合异质性 表+。随着真菌孢子悬浮液浓度的增加，供试各龄
检验（+龄幼虫：!,-./0，"# ,1，+ ,4-.21；5龄 幼虫的 (8 值递减，在低于 4<42-=$(的浓度处理
!2.23 32
幼虫：!,0.42，"# ,6，+ ,43.34；-龄幼虫：!, 中，各龄幼虫的最终死亡率均低于 32>，因此计算
!2.23
45.21，"# ,1，+ ,4-.21；! 7 + ），表明所建各 不出 (8 值；在 4<423 Q4<421=$(的范围内，+ 龄
!2.23 !2.23 32
处理模型均不存在异质性，即它们能够无偏描述不 幼虫的 (8 值从5.4/天降低到4.1+天，5龄幼虫的
32
同浓度处理下玫烟色拟青霉与小菜蛾各龄幼虫间的 (8 从5.+4 天降低到 4.65 天，- 龄幼虫的 (8 从
32 32
互作关系。 5./0天降低到+.2-天。(8 只有+龄幼虫在高浓度
02
!"# 玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫致死的剂量效应 （4<421=$(）时才能达到，为5.14天。由此可见+龄
图+ 是根据 89:模型估计的玫烟色拟青霉接 幼虫致死所需的时间最短，其次为5龄幼虫，-龄幼
种小菜蛾幼虫后不同时间的剂量效应值及其标准 虫致死所需的时间最长。
误。可以看出，随接种天数的增加，侵染所需的孢子
表! 玫烟色拟青霉对小菜蛾各龄幼虫的%& 和%&
’( )(
悬浮液浓度降低，相应的(;32和 (;02也随之降低。+ &*+,- ! &.-/*,0-123%&’( *45%&)( 326 !"#$%&’()$#*+,(’*’-’*#,*
龄幼虫接种后第 1 天、5 龄幼虫接种后第 3 天、- 龄 *7*84199.-58*:245+*;<:29.,*6/*-235833-6-498419*61
幼虫接种后第-天的 (; 估计值分别为4.41<42-、 不同处理浓度（孢子=$(）下的致死时间（F）
32 幼虫龄期 (%D)CJD@$%（FCR#）CDF@EE%&%HD
4.--<42- 和3.+4<42-=$(，(; 估计值分别为 4.06 (C&ICJ@H#DC&(832=(802 M"HM%HD&CD@"H（M"H@F@C=$(）
02
<42/、5.6+<421 和 4.+0<426=$(，由于 5 龄和 - 龄 423 42/ 421
幼虫实际最高累计死亡率未达到 02>，因此模型估 +龄 (832 5.4/ +.40 4.1+
+HF@H#DC& (802 S S 5.14
计的 (;02较大。 5龄 (832 5.+4 +.5- 4.65
5&F@H#DC& (802 S S S
-龄 (832 5./0 +.3- +.2-
-D)@H#DC& (802 S S S
# 讨论
本实验结果表明，玫烟色拟青霉菌株 T;OU’
V?;?24对小菜蛾幼虫有很强的致病力，这从其对小
菜蛾的致死中浓度和致死中时两方面均可表现出
来。由 89:模型估计的剂量和时间效应参数，接种
玫烟色拟青霉后小菜蛾+、5和-龄幼虫的 (; 分别
32
为4.41<42-、4.--<42- 和3.+4<42-=$(，在处理浓
度为4 < 421=$( 时，+、5 和 - 龄幼虫的 (8 分别为
32
4.1+天、4.65天和+.2-天。在已报道的对小菜蛾毒
力最强的病原真菌中，粉拟青霉 $B #%/(0*-.- 对小菜
蛾+龄幼虫的 (; 为4.44<423=$(，浓度4.1<4242=
32
$(时+龄幼虫的 (8 为 +.54 天（W"GCJCN&@#)HCH &1
32
%)B，+22+）；球孢白僵菌 ;T’4 在实验室和温室条件
下，处理浓度为4<426=$(时，对小菜蛾+龄幼虫的
图+ 玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的致死剂量对数值 (832分别为 4./5 天和 5./4 天（X""H &1 %)B，4000）；
?@AB + ("AC&@D)$#"ED)%D@$%’F%G%HF%HD(; 绿僵菌对小菜蛾 + 龄幼虫的 (; 为 +.25<42-=$(，
32 32
CHF(; ICJK%#E"& $%&’()*+,’&-#.+*-*/*-&.-
02 处理浓度为4<426=$(时+龄幼虫的 (8 为-.01天
32
CAC@H#DD)%F@C$"HFLCMN$"D)JC&IC%
O：+龄+HF@H#DC&；P：5龄5&F@H#DC&； （:C，+222）。因此本实验所用的玫烟色拟青霉菌
;：-龄-D)@H#DC&B 株，是目前为止所报道的对小菜蛾幼虫具最低的致
!"$ 玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫致死的时间效应 死浓度和最快的致死速度的昆虫病原真菌，表现出
玫烟色拟青霉对小菜蛾各龄幼虫的致死中时见 该菌株在小菜蛾生物防治中具较强的应用潜力。
B>( 昆虫学报 9$2";/2’(’&’5%$"B%/%$" B)卷
!"#$% 等（&’’’，())&*）报道，玫烟色拟青霉对小 !"#$% D!，8,9:%9*%$; DE，())&*F 4,-#H$M G9I"J%9-G9; #L% G9I%-#GNG#. HI
菜蛾的致病力与菌株的孢子大小、萌发速度、对小菜 GMH",#%M HI !"#$%&’()$#* +,(’*’-’*#,* ,;,G9M# :G,@H9:*,-P @H#L，
!&,2#&&"6)&’*2#&&"F .’,-/"&’+0/1#-2#3-"2#!"24’&’5)，><：5&O57F
蛾幼虫体壁的附着能力、对体壁的穿透能力以及在
!"#$%D!，8,9:%9*%$;DE，0,9#H9%4!，&’’’C 3,#LH;%9G-G#.HI !"#$%&’()$#*
血腔中的增殖速度呈正相关关系。本实验中的玫烟
+,(’*’-’*#,* GMH",#%M #H :G,@H9:*,-P @H#L， !&,2#&&" 6)&’*2#&&"：
色拟青霉菌株最初分离自家白蚁，却对小菜蛾如此 -H$$%",#GH9 QG#L MKH$% MGR%，;%$@G9,#GH9 MK%%:，,9: ,##,-L@%9# #H
强的致病力和致死速度，其致病机理究竟是否与以 -J#G-"%F .’,-/"&’+0/1#-2#3-"2#!"24’&’5)，>（5 5）：55(O55<F
上报道的几方面有关，有待进一步深入研究。在实 0,9#H9%4!，8,9:%9*%$;DE，&’’’C S%9%#G-#$,9MIH$@,#GH9,9:@J#,;%9%MGM
HI#L% %9#H@HK,#LH;%9G- IJ9;JM !"#$%&’()$#* +,(’*’-’*#,*F .’,-/"& ’+
验中还发现，小菜蛾幼虫在接种玫烟色拟青霉后的
0/1#-2#3-"2#!"24’&’5)，>（6 5）：(<&O(<<F
第(天就开始死亡，此时死亡的虫体身体较软，虫体
0L,GTU，VL,9; +W，VL,9; X，0L%9 V!，0L%9 +4，()))C 3$%"G@G9,$.
内并未充满菌丝，用解剖针挑破体壁后有大量体液
M#J:. H9 *GH"H;G-," ,-#GNG#G%M HI @%#,*H"G#%M I$H@ %9#H@H;%9HJM IJ9;GF
流出，这与其他病原真菌如白僵菌致病死亡时虫体 .’,-/"&’+7"/8%/595-%$,&2,-"&:/%1#-*%2)，(（5 5）：5>O6)C［柴一秋，
充满菌丝、虫体由于菌丝的大量增殖呈现僵硬的现 张乐人，张晖，陈祝安，陈利锋，()))C 几种虫生真菌代谢产物
生物活性的初步研究F 南京农业大学学报，(（5 5）：5>O6)］
象不同。+,-%. 等（&’’’）认为玫烟色拟青霉所分泌
0L%9YY，4%9;ZS，&’’’C 0J$$%9#M#,#JMG9*,MG-,9:,KK"G%:$%M%,$-LH9
的代谢产物青霉素是其能迅速杀死寄主烟粉虱的主
#L% %9#H@HK,#LH;%9G- IJ9;JM， !"#$%&’()$#* +,(’*’-’*#,*F 7"2,-"&
要原因。因此，本株玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫如
;/#(%#*’+0/*#$2，(&（5）：&6)O&66C［陈巍巍，冯明光，&’’’C 玫
此快的致死速度是否由于毒素引起，值得进一步研 烟色拟青霉的研究与应用现状F 昆虫天敌，(（& 5）：&6)O&66］
究。 0L%$$.!D，Z%$-,:G%$ S，Z%GP"%Y，0,M#%"H2[$,9-HZ，/-L$H%$ /，())(C
AL%$H"%HI%9#H@HK,#LH;%9MG9E[Z*GH"H;G-,"-H9#$H"F \9：]G$P !!，
本实验结果表明，不同龄期的小菜蛾幼虫对玫
[H$:,#E%:MF \@K$HNG9;[GH-H9#$H" HI !&,2#&&" 6)&’*2#&&"：3$H-%%:G9;M
烟色拟青霉菌株 /0!123404)&的敏感性存在差异，
HI #L% \9#%$9,#GH9," /.@KHMGJ@F 0\W!E，ZH9#K%""G%$，4$,9-%F B&O
其敏感高低顺序为(龄、5龄和 6龄，这可能与小菜
>)F
蛾不同龄期的体壁结构差异有关。研究表明虫生真 4,$G,Z，Y$,G;L#/3，())&C [GH"H;G-,"-H9#$H"HI <#(%*%"2"3"$%QG#LIJ9;GF
菌主要通过接触从体壁侵入，低龄幼虫的体壁较薄， =-’>!-’2#$2%’/，()：>7>O>><F
4%9;ZS，&’’<C /J*M#G#J#G9; #G@%2:HM%2@H$#,"G#. @H:%" IH$ K$H*G# ,9,".MGM
真菌孢子更易穿透侵染，而高龄幼虫和成虫体壁蜡
#%-L9G^J%F ;/2’(’&’5%$"& ?/’@&#A5#，5B：(55 O (5>C［冯明光，
质层增厚，表皮硬化加强，血细胞数量增多，防卫机
&’’<C 时间2剂量2死亡率模型取代机率分析技术F 昆虫知识，
制发育健全而增强了抗病性，真菌孢子难以穿透侵
5B：(55O(5>］
染（蒲蛰龙和李增智，&’’7）。然而，据 8,9:%9*%$;等 4%9;_，0L%9XT，+J+X，ZHT，+JT0，_G%UX，VL,9;__，())&C !
（&’’<,）报道，小菜蛾5龄和 6龄幼虫比 (龄幼虫对 M#J:.H9#L%$%MGM#,9-%HI:G,@H9:*,-P@H#L#H,*,@%-#G9G9SJ,9;:H9;
球孢白僵菌的感染更敏感，因为(龄幼虫历期较短， 3$HNG9-%F .’,-/"&’+B’,24=4%/"95-%$,&2,-"&:/%1#-*%2)，(（( (）：5BO
5<C［冯夏，陈焕瑜，吕利华，莫严，卢悦昌，谢齐贺，张小雄，
粘附于身体表面的孢子能很快随脱皮脱落。本实验
())&C 广东小菜蛾对阿维菌素的抗性研究F 华南农业大学学报，
中(龄幼虫对玫烟色拟青霉的敏感性高于 5龄和 6 (（( (）：5BO5<］
龄幼虫，可能与该株玫烟色拟青霉孢子快速的入侵 SHK,",P$GML9,9 0，!9JMJ., E，‘,$,.,9,99 ]，()))C /JM-%K#G*G"G#. HI
能力有关，从实验结果可知该株玫烟色拟青霉在浓 !&,2#&&" 6)&’*2#&&" #H #L% %9#H@HK,#LH;%9G- IJ9;JM !"#$%&’()$#*
度&=&)> 个孢子?@+对(龄小菜蛾的 +A 仅为&C>( +"-%/’*,*F 0/A%"/.’,-/"&’+95-%$,&2,-"&B$%#/$#，>（) B）：56&O 565F
B) SHK,",P$GML9,90，‘,$,.,9,9]，!9JMJ.,E，())(C E%#%$@G9,#GH9HI+E
B)
天，由此推测孢子入侵所需的时间更短。由于本实
,9:+A HI !"#$%&’()$#* +"-%/’*,*（XH"@MPGH":）[$HQ9 ,9: /@G#L H9
B)
验所选用的为龄期比较整齐的各龄初幼虫，各龄幼
",$N,"G9M#,$MHI !&,2#&&"6)&’*2#&&" +F ;/2’(’/，(（> 5）：(6’O(B6F
虫的历期均在( 天以上，即玫烟色拟青霉在幼虫蜕 XJ,9;[，TJ 0_，0L%9 _+，4,9 ZV，+G VV，()))C 0",MMGIG-,#GH9 ,9:
皮之前就已成功侵入虫体内，因此幼虫的脱皮尚未 G:%9#GIG-,#GH9 HI MK%-G%M ,9: M#$,G9M G9 !"#$%&’()$#* *. JMG9; W!3EF
能对其敏感性造成影响。 C)$’*)*2#("，(（& &）：55O5<C［黄勃，于春秀，陈晓琳，樊美珍，
李增智，()))C 利用W!3E技术对拟青霉属菌株进行分类鉴定F
参 考 文 献（!"#"$"%&"’） 菌物系统，(（& &）：55O5<］
XJ,9;V，W%9/_，())6C [GH"H;.HI !"#$%&’()$#*+,(’*"-’*#,* GMH",#%M,9:
!"#$%D!，8,9:%9*%$;DE，())&,F 3%9%#$,#GH9HI-J#G-"%,9:K$H"GI%$,#GH9G9 #L%G$K,#LH;%9G-G#.,;,G9M# <#(%*%"2"3"$%F =4%/#*#.’,-/"&’+<%’&’5%$"&
L%@H".@KL*. !"#$%&’()$#*+,(’*’-’*#,*GMH",#%M#L,#:GII%$G9NG$J"%9-% =’/2-’&，(（) 6）：(6<O(B&C［黄振，任顺祥，())6C 玫烟色拟青霉
,;,G9M#"%KG:HK#%$,9 ",$N,%F .’,-/"& ’+ 0/1#-2#3-"2#!"24’&’5)，><：<& 分离株的生物学特性及其对烟粉虱的致病力F 中国生物防治，
O<7C (（) 6）：(6<O(B&］
X期 吕利华等：玫烟色拟青霉对小菜蛾致病力的时间9剂量9死亡率模型模拟 RQ0
!"#$%&’()，*+,-，.//01 2+3453&$6+7’$889:#+;<=3&+5$5;7&46;477&=$=>+7 34’:4#$3<#4$5;8+6$##$;&$3&+5&534#$=3&+58+53%48<#L&L$6 +7]<&48=453
&8+6$348 +7 3%4 453+’+:$3%+?45&= 7<5?& !"#$%"&’# (#))’#*# $5; =+5&;&$+73%4453+’+:$3%+?45&=%>:%+’>=434 +#",’-./0,")1$/.).&.)"$)
+#",’-./0,") 1$/.).&.)"$) $?$&583 +-$2"--# 30-.)2"--#@ 4*2"&*#2’.*#- （-&^4）)#+,5$5;V’&3%@ 60,.=#2;.-.7’#，.0R（0）：.X0C.QP@
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6$#L&=&;$6 +7 =+5&;&$ $5; "6$83+8:+#48 +7 +#",’-./0,") 1$/.).&.)"$) Z$64F$#SV，.//X1 )&+6+?&=$6 =+53#+6 +7 ;&$’+5;"$=F ’+3% &5 Z$&,$5C $
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合肥：安徽科学技术出版社@ /RC//］ (++5JV，V<5? HN，2$#F NV，*44 VH，*44 OK，.///1 2+3453&$6 +7 3%4
V%463+5DG，I$5;45"4#? OM，T$’+8 G，-&684> -Z，.//B1 Y77&=$=> $5; 453+’+:$3%+?45&=7<5?<8，!"#$%"&’#(#))’#*#83#$&5JV9.$8$"&+6+?&=$6
:4#8&8345=4 +7 !"#$%"&’# (#))’#*# $5; +3%4# 7<5?& 7+# =+53#+6 +7 =+53#+6$?453+7 +-$2"--#30-.)2"--#（*4:@，(:+5+’4<3&;$4）@ 5.$&*#-.1
;&$’+5;"$=F ’+3% +5 =$""$?4 844;6&5?8@ 5.$&*#- .1 ?*2./.-.7’,#- B==-’"9?*2./.-.70，.A0：[A0C[AR@
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V%463+5DG，->’$5OD，.//A1 !584=3&=&;4#48&83$5=4+7;&$’+5;"$=F’+3% 1$/.).&.)"$)@ 5.$&*#-.18;#*3’B7&’,$-2$&#- F*’%"&)’20，AX（.）：A[C
&5S+#3% D’4#&=$@ !5：Z$64F$# SV 4;@ G$5$?4’453 +7 M&$’+5;"$=F AX1［张仙红，嵇能焕，APPX1玫烟色拟青霉菌株的毒力测定@ 山
G+3%$5;K3%4#J#<=&74#24838：2#+=44;&5?8+73%4V4=+5;!534#5$3&+5$6 西农业大学学报，A（X .）：A[CAX］
-+#F8%+:@ Z$&,$5：D8&$5 I4?43$"64 T484$#=% $5; M4L46+:’453
J4534#@ [[QC[R[@ （责任编辑：黄玲巧）
V’&38 S，W$#?<48 O，T+<?&4# G，H+<\4 T，!3&4# )，.//X1 Y774=38 +7