Susceptibility Testing of Mycobacteria, Nocardiae Nocardiae, and Other Aerobic , and Other ...

87 Pages·2011·0.32 MB·English

SSuusscceeppttiibbiilliittyy TTeessttiinngg ooff MMyyccoobbaacctteerriiaa,,
NNooccaarrddiiaaee,, aanndd OOtthheerr AAeerroobbiicc
AAccttiinnoommyyyycceetteess
CCLLSSII MM2244--AA22,, MMaarrcchh 22001111
(largely taken from a presentation
prepared by Gail L. Woods, MD
and Barbara Brown-Elliott, MS,
MT(ASCP)SM)
Edward Desmond, CDPH
June 2011
1
MMMM22224444----AAAA2222 AAAAuuuutttthhhhoooorrrrssss
• Gaby E. Pfyffer
• Gail L. Woods
• John C. Ridderhof
• Barbara Brown-Elliott
• Salman H. Siddiqi
• Patti Conville
• Richard J. Wallace
• Edward P. Desmond
•• NNaannccyy GG. WWaarrrreenn
• GGerallddiine SS. HHallll
• Frank G. Witebsky
• Grace Lin
Special thanks to Tracy Dooley, CLSI Senior Standards
Administrator and Staff Liason for Microbiology
2
AAtt tthhee ccoonncclluussiioonn ooff tthhiiss
ttaallkk,, yyoouu wwiillll bbee aabbllee ttoo……....
•• DDiissccuussss tthhee iinnddiiccaattiioonnss ffoorr ssuusscceeppttiibbiilliittyy
testing of MTBC, NTM, & aerobic
aaccttiinnoommyycceetteess
• Discuss the methods for susceptibility
tteessttiinngg ooff MMTTBBCC, NNTTMM, && aaeerroobbiicc
actinomycetes
•• AAccccuurraatteellyy iinntteerrpprreett aanndd rreeppoorrtt rreessuullttss
• Establish and implement a QC program
3
PPrrooggggrraamm OOuuttlliinnee
• Myycobacterium tuberculosis compplex
• Nontuberculous mycobacteria
•• NNooccaarrddiiaa && ootthheerr aaeerroobbiicc
actinomycetes
4
SSuusscceeppppttiibbiilliittyyyy TTeessttiinngggg ffoorr MMTTBBCC
•• SSttaannddaarrdd bbaasseedd oonn pprrooppoorrttiioonn mmeetthhooddss
– Agar (INH, RMP, EMB) or radiometric (PZA)
• Resistance:
– “decrease in susceptibility of sufficient degree to be
reasonably certain that the strain concerned is different
from a sample of wild strains of human type that have
nneevveerr ccoommee iinnttoo ccoonnttaacctt wwiitthh tthhee ddrruugg..”
– >1% of an inoculum of bacterial cells in the presence of
a “critical concentration” of anti-TB drug
5
CCrriittiiccaall CCoonncceennttrration
•• AAddoopptteedd bbyy iinntteerrnnaattiioonnaall ccoonnvveennttiioonn
• Lowest concentration of anti-TB drugs that inhibit 95%
of “wild strains” of MTBC that have never been
exposed to the drugs, but not inhibiting strains
iissoollaatteedd ffrroomm ppaattiieennttss ffaaiilliinngg ttoo rreessppoonndd ttoo tthheerraappyy
• Test susceptibility of MTBC to the critical
concentration of drug specific for the test method you
are using
6
SSuusscceeppttiibbiilliittyy TTeessttiinngg ooff MMTTBBCC
UUUUnnnniiiiqqqquueeee AAAAssssppppeeeeccccttttssss
•• TTeessttiinngg iiss ppeerrffoorrmmeedd aatt 11 ((oorr 22)) ccoonncceennttrraattiioonnss
• “Critical” concentrations established years ago, &
values mayy differ deppendingg on test medium
• No uniform consensus regarding clinical
relevance of testing other concentrations
• Agar proportion uses %age calculation to
determine R or S
•• RRaaddiioommeettrriicc mmeetthhoodd ffoorr PPZZAA tteessttiinngg uusseess ddrruugg-
specific calculation procedure to determine R or S
7
AAggaarr PPrrooppoorrttiioonn MMeetthhoodd
LLLLiiiimmmmiiiittttaaaattttiiiioooonnnn
•• NNoott rraappiidd
• Broth method with shorter incubation time is
rreeccoommmmeennddeedd ssttaannddaarrdd ooff pprraaccttiiccee iinn
industrialized countries
•• CCDDCC ggooaall:: rreeppoorrtt rreessuullttss ooff pprriimmaarryy ddrruuggss
within 15-30 days of receipt of specimen
– 77-1144 ddaayyss aafftteerr iissoollaattiioonn ooff MMTTBBCC ((iiddeeaall))
8
AAggaarr PPrrooppoorrttiioonn MMeetthhoodd
CCuurrrreenntt UUsseess
•• CCoonnffiirrmm ccoommmmeerrcciiaall bbrrootthh ssyysstteemm rreessuulltt, iiff nneecceessssaarryy
• Test drugs &/or concentrations of drugs not available
in commercial systems
•• SSttaannddaarrdd aaggaaiinnsstt wwhhiicchh nneeww mmeetthhooddss aarree eevvaalluuaatteedd &&
for characterizing in vitro susceptibility of “new” anti-
TB drugs
9
MMTTBBCC SSuusscceeppttiibbiilliittyy TTeessttiinngg
RRRReeeeccccoooommmmmmmmeeeennnnddddeeeedddd DDDDrrrruuggggssss
•• PPRREEVVIIOOUUSS::
• 2 concentrations of INH (critical & higher);
• Migght consider INH,, RMP,, EMB onlyy
• NEW: Initially test all primary drugs at critical
concentration
– INH, RMP, EMB, PZA
– PZA resistance more common, not predictable,
always requires modification of treatment
10