Ryukyu endemic Mycalesis butterflies, speciated vicariantly due to isolation of the islands since 1.55 Ma

2015·3.3 MB·

TThheLee piLdeoppteiidoloopgitcaelrSooclieotygical Society ooff JJaapapnan
uet wa Lepidopter aScience 66 (1) 8:-14, May 2015
Ryukyu endemic Adycalesbiustterfli essp,eciated vicariantly due to isolati oofn the island ssince
1.55Ma

Soich iOsozAwAi)* ,Mayumf TAKAHAsHI2) and John WAKABAyAsHI3}
i) Department of Earth Sciences ,Graduate Schoo lof Scienc el,bhoku Uniyersi tSeyn,dai ,980-8578 Japan
2) Lepidopterologic Saolciety of Japan I,bkyo ,192-O063 Japan
3) Department of Eart hand Environmenta 1Sciences ,Californi Satat eUniversit yF,resn oC,A 93740 ,USA
Abstract XNb analyzed the mitochondrial COi gene and drew phylogeneti tcrees of M),ealesi bsushbrown butterflies
in eastern Asia. In the Ryukyu island bsl,ycalesi msacijicosa amamiana is distribut eond the Amami-Okinawa islands,
and M)Jcates miacsijicosa maaijicosa is distribut eodn the Yheyama islands I.n the phylogene ttirece, these Ryukyu
endemic M. madyicosa species constitute a sister group wjth Mycalesi gsotama distribu tien dJapan, Tsushima,
southern Korea, southern China T,hiwan, and Viet Nam. Ihis would reflect the isolat ioof nthe Ryukyu islan dats 1.55
Ma, although speciation of M);calesi msacijicosa into two subspecies through the Kerama strait, and speciation of
Afycales giostama nanda in Taiwan from the other M. gotama subspecies was probably delayed by 1 m,y. The
Tsushima populatie nof M. gotama julgi ins ionlay slightly differentia tferdom the main Japan populatiQ ni,ndicating
tha tthe Tsushima strai twould act as oniy a mild barrie rfor nkycalesis.
Key wordsBEAST; China, Japan M,EGA, ML phylogeneti tcree, raxmlGUI, Tbiwan.
Introduction The Kerama strait is a wide and deep strait also formed
ARRmta)eyri.cuon lekuCanygno tudhbn gies segialoidsal nenaonrd tgiiwrs ee hinn rsateutecigghl tisn1 s e.vr an5epoeif5 wsdMll tyyathi e g(s peaoOrpptoaesirnpi oainoohtnzvesgandeaevsde sw e fpottasrf aaiho llogt.mwe ,hna ote2tg h0 Ooee1 tkoCr2highs;a nriFt aanitwpeghahs.eie1c b(bT(aryahOFe rre si eirT ogxfiIpoz,t eeAekciavtr)a neewc .nrdgeAoat na s ataf neldmoai,p ,n r oc tYr2othabn0hensne1ese ao2qeAuu g; msreuFenalncimaeigt i, ,is-tvtIoOer Alktaoy)ihni tl.a nssy t atIoa rwtfr tomeaw nat goyhalle y s-ei Oofnhskld alyeisvimaunniecngca hdaw c sa tsba sepnatpdedrrec coi raietusieshg s,eaehrs
rttehciaenadrischdlvoiglelnaasmegha nttidt crgncdheu edcfeOitr oirv oi e riienvss,dmnerip oaceunscacnttiridh iaiete orasorGlyf n.osnapt tnl iar oInanosdufp psc i seigvnaeecegsegicsr,oa ooits ttlflssiihi a oo,nemaf ntagdt tyo,ici h rooa coenni ntfa tbdR thi lewynt io uphsu aueerkc ls odcoyinod ussntut sl oise ciatuqteusgunhtgecl de ene ltasssc mphteisnregp d e heaR sttcs tuyh,oemhlf auanaehjt k to ttaertsyh,dovhui-ees ThFtiYeaoxnsaisappduvgoee lse.cy o TthaIgeaaiymAdlimsa)o aw, i toiafaeaonsnxn n Fdidh tl,isrhaa t eTegvenas ldn,peidI ea nsbcrBsiats,eeid,wisnedevpacicnee etn lcsti g yttosbir1en,vaa a.neil(l5tesys5F r e ,aMta idh(olat gnrteF Ie .hd(ietiAo nh O e)guiIJn s.gs. dAaT geho)ppmhe.iazr eocInea l n,se Cowxe aehgpadtsneiidp ctaienct lltceaa s,iiydhh,-loe ansliK2,l oos0 twr1t,atrreh2eoeeae;r,y,
shown
BfeambagnnLeriredc,coginee msamrde2it u agcrf0tsate l1lhei,bo2 eo ewe ) sncamf i,pccaaHrseohi ucnnooe itlsxwmeiaipe snenetssedvcunhl, tectfeeaha rdrnAl, ods hae mmi baaa fca esnh asenytpb aw ecceticoeo einusmieetnmrl nsni o d.eansniteinewsn do dt coWin tl oe sidtabpwesei ty cdlaeid e eexalassodlii nly snp ctdyn eg oe s ts(cereca pnOn ssalerceispi aoatnfsrrseosadltiattdzyi ret oerla,in ae nanb bwadsnteuynatdted Ipiao(ssbunfhtF bdayst1iiethl.n iege5toId u.5 BgttaMa)ihbe aoo, ernn v,aecene la diistr aena tbio,tdrlcuec eoeerw neep ( sheiwe eydovnceuopa.drllnoadeug ttt nPiic .ht oaoaoe,nfnlfpis uabtir rd hwsacroeo ta aupeptitl eor dts.e fueh cilve oSb voirf uree eeice wtucvfah tesyta ,rsllf hai.ayf, u s i rrseata2ucdtth0m .eae e11 I td0c.fia a)t5cn n ,tn h5 gbuoa iMaadn blsaesdiees
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Speciati oofn Ryukyu endemic Mycalesis 9
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B eennddeemic species in ntycalesissubspecies
Japan M. gotarr] fau/ginia
China-Korea M. gotama gotema
Amami-Okinawa M, meopcosa amaniiana
Yaeyarna M mecijicosa tnaaiicosa
Taiwan M, gotama nanda
outgroupspecies
"

1.5Ma 1.0Ma O.5Ma OMe
Fig. 1. A: Incl emxap of Ryukyu island sand distributio nmaapl of M),cale spseciiess and subspecies. The island swere formed due to
isolati fornom the Asian continent and subsidence, due to rifting and opening of the Okinawa trough starting at 1.55 Ma and
continuing to the presen tB,: Expected tree topology of Ryukyu endemic insec tspecies in Amami-Okinawa-and Yaeyama, but
containing other endemic species in Japan, China-Korea, and Taiwan. Correspondi nMgycalesis subspecies are shown, Fifth
furcatio ant 1 .55 Ma is a consequence of contemporaneous formati oofn sea strait sbarriers.
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10 S.OSOZAWA
et al.
describe gdeologic maodlel, and showed strong evidence Orsotriaen maedus medus (Fabrici u17s7,5) is the
for such vicariant speciation of four Ryukyu insect outgroup specles,
species. However, that tree basical lfyurcate fsOu rways.
In that model, the Tsushima and Thiwan straits did not Materials and methods
act as barrier fsor these species, whereas the Chinese Specimen
central plai nmight have been a barrier. M)?cates i nslu,mobecrsa,lit iscpoeelsclie,ecsti ngan dd astueb s,paencdie scol lencatmoerss aroef
In this pape rwe analyze the mitochondrial COJ sequence registered in GenBankfDDBJ, Samples are mostly
of butterf lspyecimens of endemic Mycalesis species collected by the senior author, The accession numbers
distribut eidn the Ryukyu island s,as well as those in with specimen numbers, species and subspecies names,
Thiwan ,Japan ,Korea ,China ,and Viet Nam, It is valid to and simplified locali tnyames are shown in Fig s2 and 3.
avnaarllyaztelon ss.pecies to species, becaus etree topologies have Whole body samples with wings were stored in ethanol
collection bottl east normal temperature. However, in
Mycalesis gotama Moore, 1858 (Lepidoptera,order to avoid degradatio onf DNA, we stored leg swith
Nymphalidae, Satyrinae )a,nalyzed in this paper ,is an some muscle in ethanol 1.5 mL tube, and the tube and
east Asian bushbrown butterf ispyecies. It does not occur resting bQdie swere stored in a freeze art -30'C,
imiosnr pnlhoaorltnohdgei mscwaelr ,eCh ionnac,e aen cdoclo ongtsiihcdaeel repdopu l aanaat lisyuso binissp,sne ctihe es .aRnydu k yBbuyy MA(an2ma0ml1ay3ltaii bac Dmn)aNel.tAGhoe densxotrm aaicrtcei oDndNe AwsacsrM idibone nidiepn r uOessipnogKz iaGtwebany EalnSudit geOmTbaMa-
eRgMaxnoy)pdtu,ea rkcMmiya)maeul,n,ec t saMaT lilolmaseyaok(srit ijgieiso hc, otcasra1saomh9s s ai(5iB Mn81u got9iolr s7 eetd8, rh iec,)1 osv18neic86 l58dus8,dpe ee edidcniind neetsmth iote c hitraewn ts oitJM no ayfsRpp yceeaacunasi ktelayesnr;eudn,sisApJLHlraCCdipO0oma1r2en4i 1r9cB9hs0 a,8ar r aceGnoT dG odAT neApC AaoAtfCrAh TteCL TlA iwCNyAfeAubMepGc C,aIGlgMnGeeAiToAtGSA iAp GoaCifttCn f iBA@f( vaATMherAiTcAtsGoAstGd,u, pjf ebn:fygCl A Toffa wkA awnriwam . .aCajlOnsdbI,oli,orgl).
MMFAiFYs1eyrosnqa8rcuitjeei6aheaoiy 8rsls, soa eeTetokmvc,feasooaa r nkira, h1sl1iasfi i89sshem st5l 7ap arscas81as,5 iu jn9phboi scn cd1eipooo (e s1srnf(ca tti s1 FefahisMi9e,oniyn A 8scr JgfammI1 a.ualfaA p t)enuMiaMm)s jhyyrnii(ice csct S aaoardnhalse ldn eaee ddmeetsf aris iaTat OvisiBiskjiksulua i dmictssh gadeol)nhatso dye.iisaattjrmhhcwia ,aeicama (1o,itasa t81swamM 6aeol9>.m8a spi f7gsaBncot ip9onnudtaeaats) ctsnll aidal,tgeeanmheissdaenrii,sa (BtbifuqshadluFaiaseiinort geneclc i-tska mons pi]CdedbafyO reiye o Ieamfrrit inae ndnngLiabygi lg is oiu,fntcs,r hehe oe dd1(atai hts9hp bnel9f ,itruyC4ot tt O)ir atpI .sna eAiil,ysrmm cfheaoifcol/stsrl otwtpir l wr ge(doeaowrsinnlovoo.lng uui ugia g npernhpbntigs roomo h, uea lTgilt sthh."hgtoeheee hon g blr tI are tydgtn geoavotffsreau feeng)npeqitrecue,sadtt en g,ienr)eaa vce,n tefeg6tdiii o4iioosn8ffnnhya,l
gotama gotama Moore, 1858 in southern Korea (not variations among species:'
collected and the data is from GenBankfDDBJ) and The above universal primer samplify a 648 bp COI
southern China ,A(ycalesi gsotama nanda Fruhstorfer, sequence: it sresolution is therefore sufficient and
1908 in [[hiwan ,and M)pcale sgiostama charaka Moore, convenient for the purpose of barcoding animals
1874 in northern Indochin a(simp dliestribu tmaipon is in includin ginsect sin order to investiga tienterspecies
Takahashi ,1979) T,hese subspecies are also analyzed in variations. The purpose of the presen tpaper is to obtain
this papet We call these bushbrown butterli tehse an accountable phylogeneti ctree with suitable base
Adycales igsotama group. substitutions and to compare the topologie sin each
We also analyzed another bushbrown butterf Mi)y,c,alesis Miasla(nF dpiogpIu.Bl)a.tio nto the island si'solati oenvents at 1.55
francis c(aSto l1l7,80) ,although this species is not
distribut iend the Ryukyu island sI,t sanalyzed subspecies Go[[b qGreen Maste rMix, Promega ,but changed to G2
are; M)Jcalesi fsinncis pceradiccas Hewitson 1,862 in type ,was used fbr PCR. Temperatur eof incubatio wnas
Japan (no dtistribut iend Tsushima, but in Okino-shima) at 94"C fbr 60 seconds (twic efor G2), denaturati oant
and southern Korea (no tamplified and the data is from 940C for 40 seconds, annealing at 450C for 40 seconds,
GenBankfDDBJ), A4)pcalesisfranc iustciaa Fruhstorfer, extension at 720C for 60 seconds, cycled 5 times, in
1908 in China, Mycalesis francis fcoarmosana addition, denaturati oant 94"C for 40 seconds, annealing
Fruhstorfer ,1908 in Taiwan, The other analyzed at 51OC for 40 seconds, extension at 720C for 60 seconds,
bushbrown butterf isypecies are; Mycalesis zonata cycled 35 times ,and fina lextension at 720C for 5
Matsumura, 1909 and its grouped species, and minutes, followin gEppendorf PCR Program for COI
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Speciati oofn Ryukyu endemic A(ycalesis 11
offered by the Consortiu mfbr the Barcod eof Life P,CR Discussion
pCrIoedaunc- tUwa psSy sptuermi, fPire odumsiengga . WSiezqauredn cSiVn gG weasl a nddo nPe CbRy Vicarian stpeciation of M),cales igsotama group
Operon Biotechnolo ganyd Macrogen Japan ,and more The tree topology made by MEGA5, raxmlGUI, and
than 600 bp COI sequence was readable for each sample. BEAST is concordant, and therefbre reliable.
As noted in Osozawa et at. (2013 )ou,r evolutionary In the Ryukyus M),calesi sM,. ma(ijicosa amamiana in
analyses were cenducted using MEGA5 (MolecularAmai-Okinawa island sand M, ma`ijicosa macijicosa in
Evolutiona Greynetic sAnalysi s5; Tamura et at., 2011), YAeyama island sconstitute two major clades II Iand IV
Base substitutions were checked to be not saturated by a (Fig 2s and 3) ,Contemporaneously M,. gotama divided
functio ninclude din MEGA5. The Maximum likelihood into clade II of Taiwan and the other cladeI of Japan,
(ML) tree was linearize dto visualize the tree time Tsushima, Korea, China ,and Viet Nam (Fig 2s and 3),
ibnecernepmeansts sWe,ed. Scoinmfuirlmta tnheao tutshe bmrolaecnuclahrin cgltoicmke tiesnt hthaes We do not put 1.55 Ma at the nodes above, but at the
phyl ogenetic tree can be calibrated at 1. 55 Ma nMo.d eg obteatmwae e(n Fthie g 3t,Awo), mTahjoer e xcpllaadneats ioofn M ,i ms atayhiac toosnaly atnhde
ctaohsrseru emspeptvoionoldnuistn,igon It t o rsaththoeue l tdiims eOb sseto rfoi azicntas laowytlat arcatacilt cioouvfnle(a t t2hef0dee 1aits3 ul)wrai ,tenohfdo su att,nhde bYviaocrnarraiigaeun trno ifs p estcthireaa tiitOoskn i( naFta wi1ag. 5 .I5 tAMr)ao u,wg eahrne da ntdehf afett cththei ev TeKoek rataro amcaa uaasnnded
presen tpaper ,as well as et at, Taiwa nstraits (Fi gI,A) did not act as an effective barrier
Tbpology check was done by drawing phylogene ttircee fOr ILfycale sait sthis time.
(RandomizAexedlerateMdaximum
uLtshiiekn gter lreiaexh m,FloGiUo IgGdTUrIe; e v v1S1,,3i4,l 2v.e swta srano dus eMdi.c halak ,2011 ) .[[b draw Tciohsnelsia shntasd (bs ioFfti ad gtIao,Afr) k M. fI.o n rmceaotsnittjr siawcs,hotis,ca hth ei ahrn eat bhpeir teR saoyfetu nMk ty.o nug o ftioasrmleaas nitdensd
The topology was also checked by BEAST vl.8.0 Taiwan, Vietnam, China, and Japan is known to be in
(Bayesi aEnvolutionary Analysis Sampling Trees; open rice field osn the side of hill s(Takfih a1s9h7i9),,
Drummond et al., 2012) ,BEAUti vl.8.0, BEAST v1.8,O, The habit adtifferen bceetwee nM. macijicosa and M,
Trace rv1,6, TreeAnnotato rv1,8.0, and finall FyigTree gotama is shown in tree topology (clad eI sand II vs
v1.4,2 were run, Substituti roante for COI calculated by clades II Iand VI; Figs 2 and 3).
MEGA5 was entered in BEAUti. M>,cales igsotama charaka in Vie tNam and especially M.
ResultsDescription gotama gotama in southern Korea is differenti fartoemd
the remaining M, gotama subspecies (Fig 2s and 3) .M,
gotama gotama in China is not differenti aftroemd M.
P3amrcagnnaonh.o addnddyTtece lo hairBoem dt,bg baa sMlnyey, wt Lin JiBrnteXaEh et4xbtAa mi4 erStltrc5etGrThi9eUwe eIzm8ee a e4se tedixfd,ern sc be sesFoiephr iuMtisob tgi)ws hyson .,esh n2rhocMAnow aEwno n lGnaoKeAnf od s5F oro ani ienaB sgr ab ,e..F F ri 3aisias nBhggnsdo. h. .cw o32nTbhw ABrneo.,e tf oeTw na oMhnet nd.Feoe pi nF eMtgglFiLhoo isgge2tg y. at ,2ta3rmrn AeiAdea,ese gtJatbfex hhoaaumpeetprrie ncaarcCTotmniarOseaeetdIu srisjg C e,ohpfuse onieiooln(qmfpusggaFte uer fnihiqclsua entgura sprieics2athn in aaitJi t at oana cmlcidrabplnyao eyaua (s, lndtnt e3Fs, thi)(h hiem (ae iF dg lvFpIToia.erBsrie ge)us2 eg s.s2sx asi enahnasndonindttdtem d l as 3 3atyp coa))aocbb ,s ot,lpFi raeuodain nrl adeva m detiotrwhncyiieg toa fhlfntwoe a oiuattttrkrnhhhtmtegeeahsrt,
For the M),cales itsree (Fi g2s and 3) ,M. gotama and M. Topology of M),calesisfinnci sancda zonata group
fmTgamscoamahotsatoacorhimiuwrejtijliaiserscancsgohao pMsm;s ioaai.tanm hd nfaMeann, ,taii tmn Kt.amadagAhrotaomneei;,r jtasceSideai caui im-os,c f TssuaOaahCbfan kc; sghdeicipaoio rwe nrYMtcneaaria.aanenew esm,st )azpyaai,oo n a ,na ndiadMcmatn els,a tdeinaVl acd dn iaege ittgenoshor tdtel coI saNlaau iIa)marnapdsI e,amdneaa. (d)sllc s, h)M TIoda c,r rc,il(faelamskOadMaeat detu; e,trin gjoi Idipo bJIcViotouaI lnsa tp((oatm iagMhMiayone,sn., fMecJham(too )aahnrT dppvatpiiaarhcae,fao ,anknsl f sltoiaa1ceigemnni9rhidisgc l9ef aaiaf s2nl crSsosl il)wt c oyai1wrhnCdtuia9tehiOmtnh8 I h,7c oM( K ),iasFso , e s Ariihaqgdiupecsaog inenpaa 2btnafTs aa ciaffalaertnmnsebaedad arrinst , ee witM3mnsla l.Mi) dt tinl i y,.fwkaLfis ree.arnrda lfroisnatlrvmo sonraMi at tMn.nceihJ . c gefnias rig rcpnpmass oeaotnauoc ctcdtmjp inaaii aea ece[anmsocn sdsIoa aitneb(, , nsii ebtFcaCiwlusucthaatt u a ieknbtr aMrsneriuvun.seantada
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NNI工I工-EEllecetcrotnirconic　 Library SSeerrvivceice
TThhee　 LLeepipdiopdteorpoltoegircaollogical　 SSoociceityety 　ooff　 JJaapapnan
14 S．OSOZAWA 　et　al．
Taiwan，　M ．　francisプicOarmoαsna　is　deepl　ydifferentiate　d　Jn．t　Geol．　Rev．54：1369−1388．
into　two　population（sFigs　2　and 　3），　although 　these　two Osozawa ，　S．，　Z．　H．　Su，　Y　Oba，　T．　Yagi，　Y　Watanabe　and　J，
are　externally 　indistinguishab、　lTehe　Yilan　basin　is　a 　　Wakabayashi，2013．　Vicarian　tspeciation　due　to　l55　Ma
westem 　extension 　of　the　Okinawa　trough（Fig．　l　A），　and 　　isolati　oonf　the　Ryukyu　islan，d　Jsapan，　based　on　geologic鼠a
may 　have　acted　as　a　barrie　tro　differenti　aMt．　efrancisc　a　and　GenBank　data．　Ent．　Sci．16：267−277．
formosa．na Papadopoulo，A．，1．　Anastasio　uand　A．　R 〜bg正er，2010．　Revisiting
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Mycalesis　zonata　and 　it　sgroup　build　a　major 　distinct 　　Trench　Calibrat，i　Moonl，　Bio，l　Evol．27：1659−1672．
ci（lFtaidsgees　　　l2hf　farasno　dsmi　　3mti）hl．ea　rot　hseerqu　eMnc）e，csal　esbiest　wsepeecni　eTsai，　wbaunt　　Man，　dz　oCnhatiana 　TSai　kltveienhdsat　sr，f　hoDo，　ir　．M　RaAn．dx，M　1IL．9　M7i8．　c．　OhIrangtt．　aeDk−ri，sv2ue0brs1ps1．　e，Ecrivafxoimtlc．G　U1hI2y：b33r；5iag−d　r3aos3pfh7i．“caMIyca　fireosnit・s
Evolutionar　ryate 　　　　g“ospteaeimeas　M”o，or1「ye”α厂（iL∫e，　pliedpoipdt．　eSro；acS．atノyαrノブiadna　）e2an9d：　r1ev7i5sj一o二n9　0of，　t（lhen
　　Japalles　weith　English　abstract ）
According　to　Fig．3A，　base　substitution 　rates 　of　COI TakEhashi，　M ．，　i　979、　Butterfli，　eosbservation 　from　the　Fuji−kawa
gene　are　estimated 　to　be　156 ％1m，y，　for　Mycalesi．s 　　vaHey 　to　Japanese　islands，　PP．243．　Tukiji　Shokan
Tcohmepislee　dva　lbueys　O　saorez　acwoamp　aetr　aablle，（20　1t3o）　，t　ahnodse　l　．e7s7tim％ate1dm．y　．　awnads 　Ta　k5Phuabsh［ils，h　Min　．gC，o1．9，　L8tLd　，，ITn〔t｝keyr−os，u　Jbsappecalnfi．c〔In　J　acrpoassniengse）　between
assumed 　by　Papadopou　leto　al．（2010）． 　　M ．vcalesis 　gotama　fbelgi　Fnriuhastorfe　rand 　M 　madjieosa
　　amamiana 　Fujiok．　aTrans．　lepi．　dSoc．丿ゆαη32：94−100．（ln
Acknowledgments 　　Japanes　weith　Englis　ahbstract）
Tak6hashi，　M ．，1987．　Final　insta　rlarva　of　M ｝，calesis 　fran，cscia
Y．Oba　gave　analytical　infbrmatio　nand　read　an　earlier 　　formosa　nFaruhstorfe（rLepidoptera，　Satyrina）ein　Taiwan
version 　of　the　manuscripts ．　K．　Sekine　offered　a　tutorial 　　（Formosa）．　Trans．　tepi．d∫oc．　Japan　38：247國249．（In
on　calibration 　in　BEAST ．　We　thank 　H．　Fukuda，　H ． 　　Japane　sweith　English　abstract）
Yamada，　K．　Nakaya，　J．　Tsubouchi，　T．　Ito，　Y　Hori　for Tamura，　K，，　D ，　Pctcrso，n　N．　Peterso，n　G．　Steche，r　M ．　Nei　and　S，
making 　available 　Japaneseル！ycαlesi　ssamples ，　and 　A． 　　Kumar ，2011．MEGA5 ：Molecular　evolutionary 　genetics
Mishima　for　making 　available　China　Mycalesi　ssamples ． 　　analysis 　using 　maximum 　likelihoo，　devolutionary 　distanc，e
WTeic　hthfaonkr　B．−MJahn ，　C．−H．　Tsai，　N．　V．　VUong，　and　V．　V． 　　　　a2n7d3　1m−a2xi7r3nu9m． 　parsimon　ymethods ．　Mot ．　Biol．　Evot．28：
　 　supporting 　sample 　collection 　and 　obtaining
permissio　nto　collect．
摘　要
References 琉球固有種としての崎・calesis 属のチ ョ ウ，それらのL55Ma
Drumrnond，　A．　J．，M ，A ．　Suchar，　dD，　Xie　and　A，　Rambaut，2012． 島嶼化による異所的種分化 （遅沢壮一・高橋真弓・John
　　Bayesian　phylogonetic　swith　BEAUti　and 　the　BEAST 　L7． WAKAB 苗ASHI）
　　Mol．　Biol、　Evol．29：1969−1973． 琉球の島嶼化は沖縄トラフとそれに付随する海峡群の形成
FQImer，0．，　M ．　Black，　W ．　HQeh，　R．　Lutz　and　R．　Vrigenhoe，k によるが，対馬海峡と台湾海峡も含めて，1．55Ma に開始し
　　1994．DNA 　primer　sfor　amplification　of　mitochondrial ていると考えられる．琉球を含むMycalesisttについての線
　　Fu　　kucidynatQv，cehHrr［Qe．mb，erEat．eHsa　，mcルa　foox，ilT．da．ルsK1eとuz兀z　uBsyuiabou，nl，i　AtB，iTo　aIt　kefacrhh，oa3ms：　h2di9，i4Mv−e2，rT9sa9e　．kmaehtaazsoahni，B． 形い化てしはた，M1L，55樹Ma形の図同で時は5，　分M岐ycがal期es待i　sgでotきamるα．のこグれルーらのプにミつト

　　Tanaka，　H．　Tanaka，　M ．　Wakabayashi　and 　Y．　Watanabe， コ ン ドリアCO顧 域 の 配列 を得て，　MEGA5 以外 に も，
　　1992．The　lif　ehistor　ioefs　butterf　iiin　eJsapa，n　voL　IV，　pp． raxmlGUI とBEAST による樹形図を作成した．対馬海峡は
　　373．Hoikusha　Publishin　gCQ．　Lt〔L，　Osaka，〔In　Japanese 障壁として不十分で，結果は4分岐であっ たが，異所的種
　　with 　Engli　sahbstract ） 分化を支持するものである．またそのCOiにつ い ての塩基
Osozawa，　S．　and 　Y　Oba，2013a．　lnsec　tDNA 　analytic 　manual 　for 置換速度も正確に求まっ た，上記グループ以外の他の
　　amateur ，　par　tl．lns．　DIVA　Res．　Newslett　e1r8：35−40．（ln Mycatesiのs種につ い ても樹形図を作成し，系統を調べ た．
Japanese
　　 ）
O　so　zaamwataeu，　rS、　a，　npda　rYt　　2O．b∬ans，2．　0D1N3Ab、　　lRnesse．c〈　tD1eNwAsle　atntaelry　t1ic8：　m1an0u−a1l6．　f（Ionr （Received　March　l　3，2014．　Accepted　January　21，2015）
Japanese
　　 ）
Osozawa，　S．，R．　Shinj，　oR．　A  ig，　Y．　Watanabe，　T．　Horiguchi　and
　　J，Wakabayashi，2012．　Palaeogeographi　creconsmlction 　of
　　the　l　55　Ma　synchronous 　isolat　ioofn　the　Ryukyu　Islan，ds
　　Japan，　and 　Taiwan　and　inflo　wof　the　Kuroshio　warm 　current ．
一
NNI工I工-EEllecetcrotnirconic　 LLiibrbarryary　 Service