Revista Argentina de Microbiología (2013) 45 - Supl. 1 SUPLEMENTO 1 1 Revista Argentina de Microbiología (2013) 45 - Supl. 1 Publicación de la Asociación Argentina de Microbiología Aparece en Biological Abstracts, Chemical Abstracts, Veterinary Bulletin, Index Veterinario, EMBASE (Excerpta Medica), Medline (Index Medicus), Tropical Diseases Bulletin, Abstracts on Hygiene and Communicable Diseases, Literatura Latinoamericana en Ciencias de la Salud (LILACS), Periódica, LATINDEX, PubMed, SciELO, Science Citation Index Expanded y Redalyc. DIRECTORA ASESORES EN LA ARGENTINA Silvia Carla Predari C. Bantar N. Leardini Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari. J.C. Basílico H. Lopardo Universidad de Buenos Aires M.I. Berría W.P. Mac Cormack SECRETARIO DE REDACCIÓN H.M. Bianchini D. Masih José A. Di Conza N. Binsztein M. Mollerach Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires. R. Campos R. Negroni Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. G. Carballal F. Nicola Universidad Nacional del Litoral A. Cataldi T. Orduna COMITÉ EDITOR J.J. Cazzulo R. Raya Susana Carnovale S.R. Costamagna V. Ritacco Facultad de Medicina. Universidad de Buenos Aires C. Coto H.R. Rodríguez Mauricio G. Carobene M. D’Aquino A. Schudel Facultad de Medicina. Universidad de Buenos Aires. R. de Torres L. Scolaro A.H. Frade F. Sesma Inés E. García de Salamone A. Gentile R. Soloaga Facultad de Agronomía. Universidad de Buenos Aires A. Giri H. Terzolo Ana M. Jar J.E. González G. Vaamonde Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad de Buenos Aires S. González Ayala Lina A. Lett Facultad de Agronomía. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires ASESORES EN EL EXTERIOR Claudia I. Menghi A. Amoroso (Bélgica) M. Philipp (EE.UU.) Hospital de Clínicas. Facultad de Farmacia y Bioquímica. J. Arbiza (Uruguay) F. Queiroz Telles (Brasil) Universidad de Buenos Aires J.A. Ayala (España) A. Restrepo (Colombia) Beatriz N. Passerini de Rossi P. Feng (EE.UU.) G. San Blas (Venezuela) Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires E. García López (España) G. Schmunis (EE.UU.) Cecilia Quiroga M. Gottschalk (Canadá) A. Steinbüchel (Alemania) Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. R. Guerrero (España) M. Tolmasky (EE.UU.) Universidad de Buenos Aires. M.J. Mendes Giannini (Brasil) J. Vila Estapé (España) Suscripción anual a la versión impresa (4 números anuales) © Asociación Argentina de Microbiología (2013) Socios AAM $ 200 Secretaria: Deán Funes 472, C1214AAD Buenos Aires; Argentina no socios $ 400 América Latina U$S 150 Tel./Fax: (54-11) 4932-8858 y (54-11) 4932-8948; Otros países U$S 300 E-mail: [email protected]; http://www.aam.org.ar Personería Jurídica 000908 Registro Nacional de la Propiedad Intelectual Nº. 269649 ISSN: 0325-7541 Correo Argentino Suc. 4-B FTararinfaq uReeod uPcaigdaad Coo Cnocenscieósnió Nn ºN 6º2 48195 XIII Congreso Argentino de Microbiología II Congreso Microbiología Agrícola y Ambiental 23 al 26 de septiembre de 2013 Centro de Convenciones Palais Rouge Jerónimo Salguero 1433/49 Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Argentina. XIII CONGRESO ARGENTINO II CONGRESO DE MICROBIOLOGÍA 2013 MICROBIOLOGÍA AGRÍCOLA Y AMBIENTAL 2013 COMITÉ ORGANIZADOR XIII CAM 2013 Presidente: Rodolfo Campos COMITÉ ORGANIZADOR II DIMAYA 2013 Vicepresidentes: Marta Rivas, Marta Rocchi Presidente: Diego Sauka Secretaría: María I. G. Fernández, Lucía Cavallaro, Silvia Vicepresidente: Diego Libkind Raffellini Secretaria: Susana Vazquez Secretaría Científica: Fernando Goldbaum, Jorgelina Secretaría Científica: Fabricio Cassán Smayevsky Secretaría Técnica: Mónica Baldini Secretaría Técnica: Adriana Sucari, Noella Gardella, Vocales Alfredo Martínez Marcelo Berretta, Rosana Massa, Claudio Penna, Comité Científico Inés García de Salamone, Silvia Toresani Graciela Davel, Liliana Fernandez Canigia, María J. Galle- go, Andrea Mangano, Marcelo O. Masana, Pablo Power, Laura Riera, Diego Sauka Área Finanzas Tesoreros: Teresa Bianchi, Paula Gagetti Vocales Patricia Caballero (Cuyo), Laura Decca (Córdoba), Luis A. Merino (NEA), Isabel Borges de Kestelman (NOA), Per- la Hermida Lucena (Rosario), Marina Rico (S Fe), Mabel Rizzo (Sur) Comité de Difusión María Soledad Ramírez, María Paula Quiroga COMISIÓN DIRECTIVA DE LA COMISIÓN DIRECTIVA DE LA ASOCIACIÓN ARGENTINA DE DIVISIÓN MICROBIOLOGÍA MICROBIOLOGÍA (AAM) AGRÍCOLA Y AMBIENTAL (DiMAyA) Presidente: Manuel Gómez Carrillo Vicepresidente: Gustavo Giusiano Presidente: Fabricio Cassán Secretaria: María Cecilia Freire Vicepresidente: Claudio Penna Secretaria de Actas: María I. G. Fernández Secretaria: Susana Vázquez Prosecretario: Juan Stupka Tesorero : Diego Sauka Tesorero: Paula Gagetti Secretaria de Actas: Rosana Massa Protesorero: Susana Vazquez Vocal Titular 1º: Diego Libkind Vocal titular 1º: Adriana Sucari Vocal Titular 2º: Inés García de Salamone Vocal titular 2º: María José Gallego Vocal Suplente 1º: Noella Gardella Vocal titular 3º: Marta Rivas Vocal Suplente 2º: Débora Radovancich Vocal titular 4º: María Soledad Ramirez Vocal suplente 1º: Angel Cataldi Vocal suplente 2º: Isabel Bogado Vocal suplente 3º: Marina Bottiglieri Vocal suplente 4º: Lucía Cavallaro REVISTA ARGENTINA DE MICROBIOLOGÍA SUPLEMENTO 1 VOLUMEN 45 2013 ÍNDICE Comité Organizador CAM y DiMAyA..............................................................3 Comisión Directiva de la Asociación Argentina de Microbiología.................3 Comisión Directiva DiMAyA...........................................................................3 Presentaciones orales XIII CAM 2013…………………………......………….........…. 6 Pósters XIII CAM 2013……………………………………………………...................…….30 Presentaciones orales II DiMAyA 2013…………………………...………….........…. 184 Pósters II DiMAyA 2013…………………………………………………........…….........….191 Índice de autores………………………………………………………….....................…….267 Instrucciones para autores…………………………………………........……….........….278 REVISTA ARGENTINA DE MICROBIOLOGÍA SUPLEMENTO 1 VOLUMEN 45 2013 INDEX Conference Organizing Committee…………………………………..........................3 Executive Board of the Argentina Society for Microbiololy…....................…..3 Executive Board of DiMAyA……………………………………………….....................….3 Oral Sessions XIII CAM 2013…………………………………………....................…..…6 Poster Sessions XIII CAM 2013………………....................…………………………….30 Oral Sessions II DiMAyA 2013…………………………………....................………...…184 Poster Sessions II DiMAyA 2013……………………………....................….…….......191 Author Index…………………………………………………………...........................……..267 Instructions for Authors………………………………………....................……....….….278 XIII CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA 2013 6 PRESENTACIONES ORALES Brevundimonas vesicularis (1), Ochrobactrum spp. (9), Pannonibacter phragmitetus (14); Rhizobium radiobacter (5); Shewanella spp. (11), Y PÓSTERS DEL XIII Wohlfahrtiimonas chitiniclastica (1). Sobre un total de 260 aislados de BNF, MALDI-TOF identificó correctamente a CONGRESO ARGENTINO DE nivel de género 258 (99 %) y a nivel de especie 248 (95 %). MALDI-TOF pudo identificar más del 95 % de los BNF tanto a nivel de género MICROBIOLOGÍA 2013 como de especie, entre los 26 géneros diferentes ensayados, superando por la exactitud y rapidez a la identificación fenotípica y molecular hasta ahora conocida. Presentaciones Orales O-002 La proteína A de Staphylococcus aureus contribuye al desarrollo de Presentaciones orales 1: Bacteriología osteomielitis en un modelo experimental Clínica 1 A Mendoza Bertelli1, S Lattar1, M Notollana1, DO Sordelli1, MV Delpino2, N Martes 24 de septiembre Sanjuan1, MI Gómez1 1 Instituto de Investigaciones en Parasitología y Microbiología Médica 14:30 – 16:00 h (IMPaM), UBA-CONICET1, Argentina. 2 Instituto de Inmunología, Genética y Salón Rodin Metabolismo (INIGEM), UBA-CONICET, Argentina. O-001 Las infecciones osteoarticulares poseen alta morbi-mortalidad siendo Evaluación de la espectrometría de masa aplicada -MALDI-TOF- en la Staphylococcus aureus responsable de entre el 50% y el 70% de las identificación de bacilos Gram-negativos no fermentadores osteomielitis en individuos adultos. Entre los múltiples factores de virulencia MN Almuzara1, C Barberis1, CH Rodriguez1, N Regalí1, G Traglia2, MS Ramirez2, de S. aureus, la proteína A (SpA) ha sido identificada como inductora de las A Famiglietti1, CA Vay1 cascadas de señalización de TNF-α e IFN beta. La importancia de dichas vías 1 Laboratorio de Bacteriología. Cátedra de Microbiología Clínica. de señalización en el metabolismo óseo, nos permitió hipotetizar que SpA Departamento de Bioquímica Clínica. Facultad de Farmacia y Bioquímica. podría contribuir a la patogenia de la osteomielitis por S. aureus. A fin de Hospital de Clínicas. Universidad de Buenos Aires., Argentina. 2 Instituto de demostrar esta hipótesis, grupos de ratas adultas de la cepa Wistar fueron Microbiología y Parasitología Médica (IMPaM, UBA-CONICET), Facultad de inoculadas bajo anestesia intramedularmente en la tibia izquierda con 2 x Medicina, Universidad de Buenos Aires, Argentina. 106 UFC de S. aureus o una mutante isogénica que no expresa proteína A (spa- ). A las 96 horas, 10 y 15 semanas post-desafío las ratas fueron sacrificadas. En la práctica diaria la identificación de los bacilos Gram negativos no Se cuantificaron las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) recuperadas en fermentadores de glucosa (BNF) por pruebas bioquímicas convencionales hueso y se analizaron parámetros morfométricos (Indice Osteomielitico, suele ser dificultosa. I.O). En grupos inoculados en forma paralela se realizaron estudios Con el fin de evaluar la capacidad de la espectrometría de masa (MALDI- histopatológicos. Se observó una reducción significativa en el tamaño TOF) para la identificación de estos microorganismos se realizó un estudio de la lesión ósea en las ratas inoculadas con la mutante spa- respecto de preliminar con 260 aislados de bacilos Gram negativos no fermentadores las inoculadas con S. aureus a todos los tiempos estudiados (96 horas: provenientes de especímenes clínicos correspondientes al periodo 2009- p<0,01; 10 semanas: p<0,05; 15 semanas: p<0,01). Asimismo se observó una 2012. reducción significativa en el número de UFC a las 96 horas y 15 semanas post- Todas las cepas fueron identificadas mediante técnicas moleculares desafío (96 horas: p< 0,01; 10 semanas: p=0,222; 15 semanas: p<0,001). (secuenciación del ARNr 16S, gyrB, y/o RPO) y métodos fenotípicos A las 15 semanas post-desafío se observó una correlación entre las UFC convencionales. recuperadas y el I.O (r=0,96 p<0,0001). Dada la importancia de la actividad Dado que la secuenciación del ARNr 16S no puede discriminar con alta de las metaloproteinasas (MMPs) en la degradación ósea y por consecuente eficiencia las especies del complejo Pseudomonas putida/Pseudomonas en las enfermedades osteoarticulares, se determinó la actividad de MMP- fluorescens y las especies del género Achromobacter, y abordar a nivel de 9 en los homogenatos de las tibias infectadas utilizando a las tibias sin especie en este grupo requiere la secuenciación de varios genes, se consideró inocular como control de actividad basal. Se observaron diferencias correcta cuando el microorganismo fue identificado por MALDI-TOF como una significativas en la actividad proteolítica de MMP-9 en ratas desafiadas con especie del complejo P.putida/P. fluorescens o cualesquiera de las especies S. aureus respecto de la mutante spa- a las 10 semanas post-inoculación del género Achromobacter respectivamente. (p< 0,05). Paralelamente se realizaron análisis histológicos de las tibias a La espectrometría de masa fue realizada con un equipo MALDI-TOF, Bruker, las 15 semanas post-desafío advirtiéndose la presencia de abscesos, con Daltonics. Los resultados fueron analizados utilizando la base de datos de piocitos y leucocitos polimorfonucleares y escaso tejido de granulación, en Biotyper (versión 3.1, BD, Bruker Daltonik GmbH, Bremen, Alemania). las tibias inoculadas con S. aureus. En las tibias de las ratas infectadas con Se ensayaron 260 BNF: Pseudomonas del grupo fluorescente: (Pseudomonas la mutante spa- el tejido de granulación fue proporcionalmente mayor que grupo putida; P. grupo fluorescens; P. aeruginosa) (30); Pseudomonas los abscesos. Se determinó la presencia de osteoclastos en cortes de tejido spp.: (P. fulva; P. oryzihabitans; P. stutzeri): (13); complejo Burkholderia mediante la reacción enzimática de la fosfatasa ácida tartrato resistente cepacia (9); Burkholderia gladioli (1); Pandoraea sputorum (2); Cupriavidus (TRAP). Se observó un mayor número de osteoclastos (evidenciados por pauculus (1); Stenotrophomonas maltophilia (17); Acinetobacter spp. (34); microscopia óptica como células multinucleadas positivas para TRAP) en Achromobacter spp. (43) y géneros relacionados: Alcaligenes faecalis (3); las tibias desafiadas con S. aureus respecto a las inoculadas con la mutante Bordetella spp. (9); Kerstersia gyorium (2); Oligella urethralis (3); Familia spa-. Estos resultados en su conjunto sugieren un rol para la proteína A en el Flavobacteriaceae: Elizabethkingia meningoseptica:(12); Chryseobacterium desarrollo de osteomielitis por S. aureus. spp. (6), Myroides spp. (4); Shingobacterium multivorum (4); Wautersiella falsenii (2), Weeksella virosa (1), Familia Comamonadaceae: Comamonas testosteroni (1); Comamonas kerstersii (10); Delftia acidovorans (4); otros BNF: Sphingomonas paucimobilis (1); Brevundimonas diminuta (7), 7 Revista Argentina de Microbiología (2013) 45 - Supl. 1 O-003 pneumoniae entre las enterobacterias y también en diversos bacilos Antígenos proteicos incrementan la eficacia protectiva en una vacuna negativos no fermentadores. Si bien se ha documentado la presencia de esta capsular (PC5/PC8) de S. aureus durante el desarrollo de un modelo de carbapenemasas en Pseudomonas aeruginosa, no hay descripciones de la osteomielitis en ratas. emergencia conjunta en K. pneumoniae y P. aeruginosa. SM Lattar1, M Noto Llana1, P Denoel2, S Germain2, FR Buzzola1, JC Lee3, DO Objetivos: Caracterizar genéticamente un brote simultáneo de aislamientos Sordelli1 de K. pneumoniae y P. aeruginosa productores de carbapenemasas KPC en 1 Instituto de Microbiologia y Parasitologia Medica, Argentina. 2 Glaxo Smith nuestra Institución y evaluar la posible dispersión de plásmidos entre ambas Kline Biological, Rixensart, Belgium, Paises Bajos. 3 Channing Laboratory especies. Brigham and Women´s Hospital, Harvard Medical School Boston USA., Métodos: Se estudiaron un total de 44 aislamientos clínicos productores de Estados Unidos. KPC, 24 K. pneumoniae y 20 P. aeruginosa recuperados entre junio del 2009 y marzo del 2010 de muestras clínicas de pacientes internados en las Unidades Introducción: Staphylococcus aureus es una bacteria patógena invasiva, de Terapia Intensiva y Clínica Médica. La presencia de carbapenemasas fue con una estructura poblacional clonal donde algunos clones son resistentes inicialmente sospechada por el patrón de sensibilidad a los carbapenemes a antibióticos lo que impide una adecuado control de las infecciones y se confirmó mediante amplificación por PCR con cebadores específicos provocado por este microbio. Por otra parte los esfuerzos para prevenir las y posterior secuenciación. Los aislamientos se tipificaron por PFGE y MLST infecciones en humanos con una vacuna formada por un único componente para determinar su relación genética. Se evaluó la presencia de plásmidos de S. aureus han fracasado. Por lo que actualmente se están desarrolladas mediante digestión con endonucleasa S1 y la localización de genes bla se KPC-2 vacunas a múltiples componentes altamente conservados en todos los confirmó mediante hibridación Southern-blot. clones de S. aureus. Resultados: Se confirmó la presencia del gen bla en los 24 aislados de KPC-2 Objetivos: Evaluar la eficacia protectiva en ratas de una vacuna con K. pneumoniae y los 20 de P. aeruginosa. Los aislados de K. pneumoniae el polisacárido capsular (PC) de S. aureus conjugado con proteínas mostraron pulsotipos altamente relacionados y según MLST correspondían a conservadas. los ST 258 y ST 309. Por su parte los aislamientos de P. aeruginosa productores Materiales y Métodos: El serotipo 5 (PC5) y el serotipo 8 (PC8) fueron de KPC-2 se agruparon en ST 654 y mostraron un único patrón de bandas en conjugados al toxoide tetánico y administrado a ratas, solo o juntos el PFGE. Los resultados de la digestión con endonucleasa S1 y la posterior con el clumping factor A (ClfA) o la alfa toxina destoxificada (dHla). hibridación sugieren que el mismo plásmido con el gen bla podría estar KPC-2 Las vacunaciones fueron realizadas deacuerdo ha un régimen preventiva presente en las dos especies. o terapéutico y la eficacia protectiva fue evaluado en un modelo de Conclusiones: Describimos el primer brote simultáneo de K. pneumoniae y P. osteomielitis crónica en ratas de 14 semanas de evolución. Como medida aeruginosa productores de carbapenemasa KPC-2 en nuestra institución. Los de virulencia o reducción de las mismas provocado por las bacterias en las secuenciotipos involucrados coinciden con los descriptos como diseminados tibias de las ratas se obtuvo el indice osteomielitico o (I.O.). mundialmente. Además, sobresale el hallazgo del mismo plásmido con el Resultados: La adición de (dHla) al PC5 o PC8 en la vacuna; induce una gen bla en K. pneumoniae y P. aeruginosa, sugiriendo fuertemente su KPC-2 reducción significativa en el numero de bacterias recuperadas o de las transferencia entre ambas bacterias. Dadas las frecuencias de aislamiento unidades formadoras de colonias (UFC) [esquema preventivo (dHla + PC5) p = de estas bacterias y la importancia de la resistencia mediada por estas 0.001]; [esquema terapéutico (dHla + PC5) p = 0.001]; [esquema preventivo carbapenemasas, este hallazgo posee una gran relevancia epidemiológica, (dHla + PC8) p = 0.001]; [esquema terapéutico (dHla + PC8) p = 0.01] y en los constatando la gran versatilidad de este plásmido para transmitirse cambios morfológicos del hueso o indice osteomielitico (I.O.) comparados horizontalmente inter e intra especies. con las ratas vacunadas únicamente con el (PC5) o (PC8), [esquema preventivo (dHla + PC5) p = 0.001]; [esquema terapéutico (dHla + PC5) p = O-005 0.001]; [esquema preventivo (dHla + PC8) p = 0.001]; [esquema terapéutico Clostridium difficile: SU COMPORTAMIENTO IN-VITRO FRENTE A (dHla + PC8) p = 0.001]. Tanto la terapia preventiva como terapéutica METRONIDAZOL fueron protectivas. La inmunización con la dHla conjugada al polisacárido R Rollet, D Vaustat, B Menendez, N Hardie irrelevante de Streptococcus pneumoniae no redujo la osteomielitis U. Bacteriología. Hospital F.J. Muñiz, Argentina. provocada por S. aureus. La emergencia de S. aureus no capsulados y de SCVs fue no significativa entre los grupos vacunados y no vacunados. Clostridium difficile (CD) es la principal causa de diarrea infecciosa en Conclusiones: La adición de dHla a la vacuna conjugada PC5 o PC8 potencia pacientes internados. Los tratamientos se realizan con metronidazol (MTZ) y la eficacia tanto preventiva como terapéutica durante las osteomielitis por vancomicina; sin embargo, hay registros de fracasos terapéuticos (7-30%) y S. aureus, indicando que la inclusión de múltiples antigenos potencia la se han encontrado cepas con sensibilidad disminuida. eficacia de la vacunación durante las osteomielitis crónicas como agudas La prevalencia de resistencia a MTZ es variable (hasta 6,3%). Se trata de provocando la disminución de UFC y del I.O. una resistencia inestable a los repiques y a la conservación, heterogénea e inducible por incubación prolongada. En nuestro Hospital hemos registrado O-004 2 aislamientos con sensibilidad disminuida a MTZ, pero se trataba de CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DEL PRIMER BROTE SIMULTÁNEO DE Klebsiella aislamientos no toxigénicos. pneumoniae Y Pseudomonas aeruginosa PRODUCTORAS DE KPC2 EN UN Los objetivos de este trabajo fueron: evaluar la actividad in-vitro de MTZ HOSPITAL UNIVERSITARIO DE ARGENTINA frente a aislamientos de CD causantes de diarrea y estudiar la expresión de J Nievas1, D García1, F Nicola1, S Arduino1, M Morosini2, M Rodriguez2, A heteroresistencia (HR) en los mismos. Sanchez-Díaz2, R Cantón2, R Del Campo2, J Smayevsky1 Se estudiaron 100 aislamientos de CD conservados a -35ºC. Los mismos 1 Laboratorio de Bacteriología, Micología y Parasitología, Departamento fueron obtenidos de muestras de materia fecal de pacientes asistidos en de Análisis Clínicos, Centro de Educación Médica e Investigaciones Clínicas nuestro Hospital, con diagnóstico microbiológico de diarrea por CD entre (CEMIC), Argentina. 2 Servicio de Microbiología. Hospital Universitario febrero de 2012 y abril de 2013. Ramón y Cajal, Madrid, España. Se determinó la CIM de MTZ mediante difusión de tiras con gradiente de concentración (E-test-Biomérieux), el punto de corte de sensibilidad Introducción: Las carbapenemasas de tipo KPC han sido reportadas en todo utilizado fue 8 μg/ml (CLSI M11-A7). Se realizó una prueba de difusión de el mundo en diferentes especies bacterianas, principalmente en Klebsiella discos de 5 μg de MTZ en agar anaerobios y se midió el halo de inhibición a XIII CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA 2013 8 las 48 hs, luego se registó la presencia de colonias dentro del halo en ese cepacia 92% (24/26), y dos aislamientos fueron identificados como B. momento, a los 4 y a los 7 días. Se definió HR como la aparición de más de lata y B. cenocepacia. Todas las especies no-CBC fueron identificadas una colonia dentro del halo de inhibición a una distancia mayor a 5 mm del correctamente. borde del halo. Los resultados muestran que la EM es una herramienta valiosa para identificar El análisis de los resultados se realizó con el programa SPSS 17.0 (SPSS, INC, el CBC rápidamente, sin embargo los PP de B. contaminans incorporados a la Chicago, IL). base de datos, fueron insuficientes para lograr la identificación correcta de Los valores de CIM obtenidos estuvieron comprendidos en el rango de <0.016 dicha especie. B. contaminans representa algunos aislamientos que habían a 0.94 μg/ml (100% sensible) con una CIM50 de 0,032 μg/ml y una CIM90 de sido comprendidos en el denominado taxón K, que hasta la fecha comprende 0,125 μg/ml. Todos los aislamientos fueron sensibles. las especies: B. contaminans y B. lata. La epidemiología de esta nueva Los halos de inhibición, luego de 48 hs de incubación, variaron entre 26 y 68 especie es desconocida en nuestro país, aunque estudios recientes informan mm con una media de 45,70 mm. que en la Argentina pareciera existir una epidemiología local particular, A las 48 hs de incubación, se encontró HR en un total de 3 aislamientos; a los con alta prevalencia de B. contaminans. Nuestro próximo objetivo será la 4 días, en 10 y a los 7 días en 24. incorporación de un mayor número de PP para ampliar la base de datos y así Se repitió la prueba de difusión de discos con las colonias desarrolladas mejorar la identificación de las especies de B. cenocepacia y B. contaminans. dentro de los halos y se observó la reproducción del efecto. Metronidazol, uno de los agentes habitualmente empleados para el O-007 tratamiento, tuvo buena actividad in-vitro en todos los aislamientos AISLAMIENTO DE Escherichia coli ENTEROAGREGATIVO O104:H4 EN UN CASO analizados. Aún si considerásemos que el método de referencia puede dar DE DIARREA EN ARGENTINA valores de CIM 1 a 2 diluciones mayores que el método empleado, todos los C Carbonari1, N Deza1, M Flores2, A Gasparini3, E Manfredi1, M Rivas1 aislamientos probados serían sensibles. Sin embargo, no podemos hacer 1 Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas – ANLIS “Dr. Carlos G. inferencia a cerca de la actividad de este agente sobre aislamientos no Malbrán”, Argentina. 2 Laboratorio de la Dirección de Patologías Prevalentes conservados. y Epidemiología del Ministerio de Salud de la Provincia de Chubut, La HR aumentó con el tiempo de incubación. A pesar de haber estudiado Argentina. 3 Centro Periférico de Salud Ramón Carrillo del Hospital Zonal de aislamientos guardados entre 1 y 14 meses, hemos demostrado su expresión Trelew, Argentina. en el 24% de los casos. Ante estos hallazgos, cabe realizar estudios para el análisis de correlación Introducción: Las cepas de Escherichia coli asociadas a diarrea en de la expresión de HR con la evolución y los antecedentes de los pacientes humanos se clasifican en cinco patotipos: E. coli enteropatógeno (EPEC), afectados. enterotoxigénico (ETEC), enteroinvasivo (EIEC), enteroagregativo (EAEC), y productor de toxina Shiga (STEC). EAEC puede causar diarreas prolongadas, O-006 tanto en niños de países industrializados como en desarrollo, viajeros y ESPECTROMETRIA DE MASAS Y EL DESAFIO DEL COMPLEJO Burkholderia pacientes inmunosuprimidos. El reservorio conocido son los seres humanos. cepacia Portan un plásmido (pAA) que codifica para una adhesina fimbrial M Prieto, F Rocca, C Martínez, L Cipolla, L Aguerre, R Callejo responsable del patrón de adherencia enteroagregativo en células HEp-2 y el INEI ANLIS DR CARLOS G. MALBRAN, Argentina. epitelio intestinal. En el período comprendido entre 02/05/11 y 28/06/11 se produjo un brote con 3.141 casos de diarrea, 881 casos de Síndrome Urémico El complejo Burkholderia cepacia (CBC) está compuesto por 17 especies. Hemolítico y 32 defunciones, en varios países europeos, Canadá y EE.UU., Algunos miembros del CBC han emergido como patógenos oportunistas en asociado a un nuevo patotipo de E. coli diarreigénico, EAEC-STEC del serotipo pacientes inmunocomprometidos. En pacientes fibroquísticos (FQ), son O104:H4, productor de toxina stx . A partir de ese momento se intensificó la 2a capaces de causar infecciones crónicas y graves en el tracto respiratorio. B. vigilancia de este nuevo patotipo en todo el mundo. cenocepacia está asociada a elevada mortalidad y su aislamiento implica Objetivo: En el presente trabajo se describe el aislamiento y caracterización medidas estrictas de control epidemiológico debido a la alta transmisibilidad. de una cepa EAEC O104:H4 asociada a un caso de diarrea infantil en Nuestro objetivo fue evaluar el desempeño de la espectrometría de masas Argentina. (EM) para la identificación de especies del CBC mediante detector de masas Materiales y Métodos: Se caracterizó una cepa aislada de una niña de por tiempo de vuelo con desorción láser asistida por una matriz (MALDITOF- 6 años con diarrea, de la ciudad de Trelew, Chubut. Como tamizaje de MS). cepas diarreigénicas, se realizaron dos PCR múltiples para EIEC/EAEC/ Se estudiaron 46 aislamientos del CBC aislados durante el período enero 2011- STEC (ipaH/aggR/stx/stx), y EPEC/ETEC (eae/lt/st), y posteriormente la 1 2 junio 2013, en distintos hospitales de Argentina. Los mismos correspondían caracterización por serotipificación, resistencia a antibióticos, PCR múltiple a pacientes FQ(16), dos brotes intrahospitalarios (14) y pacientes para la detección de los genes wzxO104/fliCH4/ter, y PCR simples para: la inmunocomprometidos (16). Se incluyeron 10 aislamientos de especies detección de un fragmento correspondiente a la secuencia del plásmido fenotípicamente relacionadas con el CBC: Pandoraea sp.(3), Achromobacter pCVD432 de EAEC, el gen putativo de virulencia aaiC, que codifica para xylosoxidans(2), Inquilinus limosus(1), B. gladioli(1), Ralstonia pickettii una proteína secretora, y la adhesina lpfO113. Por electroforesis de campo (2) y Stenotrophomonas maltophilia (1). Los aislamientos fueron pulsado (PFGE) se comparó la cepa con otras de la Base de Datos Nacional. caracterizados fenotípicamente y la identificación genotípica se realizó por Resultados: Por serotipificación y PCR múltiple wzxO104/fliCH4/ter se secuenciación de los genes 16SrARN, gyrB y recA (sólo para CBC). La EM se estableció que la cepa correspondía al serotipo O104:H4, ter (-). Se llevó a cabo utilizando el equipo Bruker Biotyper versión 3.0. Se incorporaron detectaron los genes aggR (región del gen correspondiente al regulador de 5 perfiles proteicos (PP) correspondientes a aislamientos representativos de expresión AggR), pCVD432 y los genes de virulencia aaiC y lpfO113. La cepa B. contaminans, para ampliar la base de datos del sistema. fue negativa para el gen stx y sensible a todos los antibióticos ensayados. MALDITOF-MS mostró 100% concordancia con la identificación genotípica Por PFGE, se estableció un 66% de similitud con otras cepas EAEC aisladas para las siguientes especies: B. cepacia (7), B. multivorans (3), B. seminalis durante el presente año. (4) y B. vietnamensis (2). El 50% (2/4) de los aislamientos de B. cenocepacia Conclusión: El hallazgo de una cepa EAEC del serotipo O104:H4 enfatiza la fue identificado correctamente, un aislamiento fue identificado como B. necesidad de fortalecer la vigilancia basada en laboratorio de E. coli diarreigénico seminalis y un aislamiento de B. cenocepacia linaje IIIB no fue identificado mediante metodologías sensibles, específicas y oportunas. Si bien O104:H4 es por EM. Los aislamientos de B. contaminans fueron clasificados como B. un serotipo poco frecuente a nivel mundial, se ha visto involucrado en casos 9 Revista Argentina de Microbiología (2013) 45 - Supl. 1 esporádicos de diarrea y brotes como el del año 2011. Teniendo en cuenta que E. coli posee un genoma dinámico debemos estar alertas a la probable aparición de Staphylococcus aureus meticilino-resistente (SAMR) es un importante patógenos emergentes asociados a enfermedad humana. agente causal de infecciones de piel y partes blandas (PPB) y de infecciones severas e invasivas. En Argentina hemos descripto el reemplazo del clon O-008 ST5-SCCmecIV-spat311-agrII-LPV+ por el clon ST30-SCCmecIV-t019- RESISTENCIA ANTIBIÓTICA DE Streptococcus pneumoniae INVASIVO EN agrIII-LPV+ entre aislamientos de SAMR recuperados de PPB e infecciones PACIENTES ADULTOS SEGÚN EL SEROTIPO, invasivas adquiridas en la comunidad. Asimismo registramos una asociación MG Mortarini, R Rollet, L DeVedia, R Prieto significativa entre la presencia del clon ST30 e infección invasiva (p=0,029, Htal.F.J.Muñiz, Argentina. Fisher). El objetivo de este trabajo fue comparar la capacidad patogénica del clon ST30-IV-t019 respecto del clon ST5-IV-t311. La enfermedad invasiva (ENI) por Streptococcus pneumoniae (Spn) es grave Se determinó por PCR la presencia de los genes sea seg, sec, sei y requiere tratamiento antibiótico adecuado en forma inmediata. Valorar la (enterotoxinas), hemolisina α (hlg), un gen implicado en la formación de resistencia de aislamientos microbioanos es importante cuando se quiere emplear biopelícula (icaA) y genes de adhesinas (fnbA, fnbB, clfA, clfB y fib). La nuevos agentes terapéuticos, así como para vigilar la epidemiológica de los mismos. producción de hemolisinas α,beta y α se estudió mediante la hemólisis en A pesar que se han identificado más de 90 serotipos de Spn, más del 80% de los agar sangre de carnero junto a una estría de S. aureus RN 4220 productor aislamientos resistentes en pediatría, provienen de 6 serotipos específicos: 6A, de beta-hemolisina. Se estudió la producción de biopelícula cultivando las 6B, 9, 14, 19F y 23F, los cuales suelen presentar también resistencia adquirida a cepas en caldo tripteína soya en microplacas de poliestireno. Se realizaron eritromicina (Ery) y trimetoprima-sulfametoxazol (TMS). ensayos en un modelo de osteomielitis aguda con ratas Wistar adultas. Se En un estudio anterior hemos informado los serotipos más frecuentes de 90 inocularon las tibias izquierdas con 1x106 unidades formadoras de colonias aislamientos de Spn de pacientes adultos con ENI internados en nuestro hospital. (UFC) y luego de 96 h se evaluó el número de UFC/tibia. Como marcador de Los mismos fueron 14, 1, 9N y 9V (58,9% del total). daño tisular se midió el índice osteomielítco (IO) de cada tibia infectada. En este trabajo nuestro objetivo fue relacionar los mismos serotipos con la Se utilizó además un modelo de infección respiratoria adquirida por ruta resistencia a antibióticos. intranasal en ratones BALB/c de 8 semanas. Se inocularon 1x108 UFC en Estudiamos 90 aislamientos provenientes de pacientes internados en nuestro un volumen de 10 μl y a las 4 h post-inoculación se evaluó la presencia de hospital entre 2004 y 2011, los cuales fueron serotipificados por técnica de Dot- bacterias en sangre. Blot en el instituto Carlos III, Madrid. Los resultados mostraron que ambos clones portaban los genes sei, seg ,icaA, Valoramos la sensibilidad a Penicilina por el método de difusión de tiras con fnbA, clfB, clfA, hlg y que producían las hemolisinas α y α El gen fib sólo gradiente de concentración (E-test - Biomérieux) y a oxacilina (Oxa), Tms, Ery, se encontró en el clon ST5 y el gen fnbB en el clon ST30. No se observaron clindamicina (Cli), levofloxacina (Lev), tetraciclina (Tet ) y rifampicina (Rif) por diferencias significativas en la formación de biopelícula. En el modelo de método de difusión con discos, según normas de CLSI. Los puntos de corte fueron osteomielitis se recuperó un mayor número de UFC en las tibias desafiadas acordes al sitio de la infección. con el clon ST30-IVc-t019 comparadas con las inoculadas con el clon ST5- El rango de valores de CIM de Pen obtenidos fue entre 0,006-2 mg/ml para los IVa-t311 (p=0.0253, Mann Whitney). Los IO fueron significativamente aislamientos provenientes de sitios no meníngeos y de 0,016 mg/ml en los 2 mayores para las tibias infectadas con el clon ST30-IVc-t019 (p=0,0139, aislamientos provenientes de sitio meníngeo. Mann Whitney). En el modelo de inoculación intranasal, la proporción de Nueve (9) aislamientos fueron resistentes a Ery y correspondieron a los serotipos 14 ratones con bacteriemia fue mayor en el grupo inoculado con el clon ST30 (3), 6 A (3), 9V(2), 19F(1). (p=0.039, Fisher). Diez (10) aislamientos resistentes a TMS, correspondientes a los serotipos 14 (6), 6 En conclusión, el clon ST30-IVc-t019 demostró una mayor capacidad A(1), 9V(1), 9N(1), 16F(1) y 1 aislamiento con sensibilidad intermedia a TMS fue del patogénica en los dos modelos animales realizados. Se observó una mayor serotipo 12F. Los 2 resistentes a Tet, eran de los serotipos 4 y 12F. El aislamiento 12F capacidad del clon ST30-IVc-t019 para establecerse en el nicho óseo y presento resistencia a tetraciclina y valor intermedio a TMS. de causar mayor daño de ese tejido y, también, una mayor capacidad de Se detectó resistencia conjunta a TMS y Ery en 3 aislamientos de los serotipos 14, invasión del epitelio pulmonar causando bacteriemia luego de la inoculación 6ª y 9V. por vía intranasal. La relevancia de estos hallazgos radica en que se trata del En nuestro estudio no detectamos resistencia a penicilina. En cambio, encontramos clon de S. aureus actualmente recuperado en la mayoría de las infecciones resistencia a TMS, Ery y Tet de aislamientos con serotipos 14, 9V, 9N, 6A, 19F, 16F y por SAMR adquiridas en la comunidad en Argentina. 12F. En trabajos de nuestra referencia, ya se había descripto ressistencia antibiótica en los 6 primeros serotipos, sin embargo, no tenemos registro de la resistencia en los O-010 serotipos 16F y 12F. Identificación directa de bacterias sobre botellas de hemocultivos positivos Cabe destacar que en la población estudiada predominan los pacientes VIH (+), los usando espectrometría de masa con matriz asistida por láser MALDITOF cuales reciben diversos tratamientos profilácticos, entre ellos, TMS. M Vilaro, N Aviles, D Hernandez, C Abiega En cuanto a la resistencia a macrólidos, podría relacionarse con el aumento del uso HOSPITAL PRIVADO CENTRO MEDICO DE CORDOBA, Argentina. de estos antimicrobianos para el tratamiento de infecciones del tracto respiratorio causadas por Spn. Introducción: La espectrometría de masa con matriz asistida por láser (MALDI-TOF) representa una metodología altamente específica para la O-009 identificación de colonias de microorganismos en placas de medio de cultivo. Staphylococcus aureus METICILINO-RESISTENTE: APROXIMACIONES Su uso directo en botellas de hemocultivos positivos, previo tratamiento de EXPERIMENTALES AL ANÁLISIS COMPARATIVO DE LA VIRULENCIA DE LOS lisis y extracción de proteínas, ha sido descripto como un método rápido PRINCIPALES CLONES CAUSANTES DE INFECCIONES ADQUIRIDAS EN LA para el diagnóstico de sépsis y bacteriemias. El objetivo de este trabajo COMUNIDAD EN ARGENTINA es comparar la identificación directa sobre las botellas de hemocultivos S Fernández1, S Lattar2, C Ledo2, S Haim1, M Noto Llana2, S Di Gregorio1, MI positivo usando MALDI-TOF con la identificación fenotípica de colonias Gómez2, D Sordelli2, M Mollerach1 bacterianas por el sistema automatizado PHOENIX. Materiales y métodos: 1 Cátedra de Microbiología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Se estudiaron 150 hemocultivos positivos monomicrobianos (BACTEC Plus de Buenos Aires, Argentina. 2 Instituto de Microbiología y Parasitología Aerobic- Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). Los caldos fueron reaislados Médica (IMPaM UBA-CONICET), Argentina. en placas de agar sangre de carnero y en paralelo tratados de acuerdo al
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