1m Januar 1961 erschien Praktikum der Papierchromatographie Anleitung zu Ubungen in der papierchromatographischen Untersuchung pflanzlicher Inhaltsstoffe Von H. F. Linskens Botanisches Institut der Universitat NijmegenJNiederlande undo L. Stange Institut fUr Entwicklungsphysiologie der Universitat K6ln Mit 27 Abbildungen. VIII, 50 Seiten 8°. 1961 Brosaiiert mit Kunststoff-Spiralheftung DM 9,80 SPRINGER-VERLAG· BERLIN· GQTTINGEN· HEIDELBERG Zu beziehen durch LANGE & SPRINGER, Wissenschaftliche Buchhandlung Berlin-Wilmersdorf, Heidelberger Platz 3 Professor H. F. Linskens, der Herausgeber det "Papierchromatographie in der Botanik", und Dr. Luise Stange, Mitarbeiterin von Professor Calvin (BerkeJey), haben ihre reichen Unterrichtserfahrungen auf dem Gebiete det Papier chromatographic in ciner "Handleitung" ftir den Gebrauch der Studierenden zusammengestellt. Das Bandchen folgt der guten Erfahrung, die man mit der ins Detail gehcnden Aufstellung alIer benotigten Gerate, ChemikaHen und des Pflanzenmaterials gemacht hat. Daran schlieBt sich die bis zu den einzelnen Hand griffe n beschriebene Arbeitsanlcitung, so daB bei sorgfaltiger Beachtung das Gelingen der Versuche gewahrleistet ist. Die Dbungen soUten in der dargestellten Reihenfolge ausgeftihrt werden, da sie sich in der Kompliziertheit steigern und dabei zuglcich neue Stoffgruppen dem Experimentator crschlieBen. Nach Durcharbeiten ist man mit allen wichtigen papierchromatographischen Techniken fUr die biochemische Analyse vertraut. Detaillierte Angaben des Zeitbedarfs flir die TeHmanipulationen gestatten einen Einbau des "Praktikum der Papierchromatographie" in bercits bestehende Pflanzenphysiologische ode! Biochemische Praktika, aber auch cine Durch ftihrung in Arbeitsgemeinschaften und im Selbststudium. Neuartig sind an dies em "Kochbuch der Papierchromatographie" folgende "{'unkte: 1. Je des Bandchen enthalt Vordrucke und Formulate fUr die Versuchsauswertung. Das Durcharbeiten des Praktikums ist daher zugleich eine Anleitung zur ProtokollfUhrung bei Experimenten. 2. Am Ende jeder Dbung sind Fragen gestellt, deren Beantwortung ein Mit denken erzwingt und die experimentcHe Arbeit verdeft. 3. Das Praktikum ist spiralgeheftet; es ist daher auch bei geringem Raum am Arbcitsplatz praktisch zu handhaben und schlagt nicht zu. 4. Am Endc des Bandchcns ist ein Gutschein angeheftet, de! an cinen der an gegebenen HersteUer von chromatographischen Spezial-Papieren eingesandt werden kann und zum kostenlosen Bezug einer Mustersammlung ftir die Durchflihrung des Praktikums berechtigt. Das "Praktikum der Papierchromatographie" soll der Intensivierung des Unter richtes dienen und gleichzeitig die Lehrkrafte entlasten. Das durchgearbeitetc Praktikum ist zugleich ein wertvolles Nachschlagcheft fUr andere Aufgabcn stellungen. INHALTSUBERSICHT 1. Ubung: Der TrennprozeB Beobachtung des Trennvorganges. EinfluB der Papierqualitiit auf den Trennvorgang. EinfluB des Trennmittels auf die Trennung. 2. Ubung: Eindimensionales Chromatogramm; EinfluB von Zuschnitt und Temperatur; quantitative Bestimmung von Aminosauren Der EinfluB des Papierzuschnittes. EinfluB der Temperatur. Quan titative Bestimmung: Bestimmung nach der FleckengroBe, Photo metrische Bestimmung. 3. Ubung: Zweidimensionales Chromatogramm mit Vergleichssubstanzen, Aminosauren 4. Ubung: Rundfilter-Technik, Zucker 5. Ubung: Photogramm-Technik, Nucleinsauren 6. Ubung: Extraktion und Hydrolyse (Polysaccharide, Proteine) 7. Ubung: Bioautographic, Doppelchromatographie, Wuchsstoffe 8. Ubung: Fluorescenznachweis, Flechtensauren 9. Ubung: Farbstofftrennung Trennung von Chloroplasten-Farbstoffen. Trennung von Chymo chromen. 10. Ubt;n.g: Plattentest, Antibiotica 11. Ubung: Alkaloide 12. Ubung: Autoradiographle Ferner wird hingewie!en atif Papierchromatographie in der Botanik Herausgegeben von H. F. Linskens Zweite, erweiterte Auflage Mit 124 Abbildungen und 2 Farbtafeln. XVI, 408 Seiten Gr.-So. 1959 Ganzlcinen DM 58,- I nhaltsiibersicht Allgemeiner Tei!: Theorie der Papierchromatographie. Von G. A. J. VAN Os. Einrichtung cines papierchromatographischen Laboratoriums. Von H. F. LINS KENS. - Techniken. Von H. F. LINSKENS. - Papiere. Von H. F. LINSKENS.- Aufbereitung. Von H. F. LINSKENS. - Auftragen und Trocknen. Von H. F. LINSKENS. - Fehlerquellen. Von H. F. LINSKENS. - Auswertung und Doku mentation. Von H. F. LINSKENS. - Isotopentechnik. Von B. D. SANWAL. - Spezieller Teil: Anorganische Kationen und Anionen. Von H. SEILER und B. PRI]S. - Kohlenhydrate. Von L. STANGE. - Organische Sauren. Von H. SCHWEPPE. - Flechtensauren. Von C. A. W ACHTMEISTER. - Phosphatide und komplexe Lipide. Von U. BEISS. - Proteine und ihre Bausteine. Aminosauren. Von H. DORFEL. - Peptide. Von H. DORFEL. - Proteine und Proteide. Von H. F. LINSKENS. - Enzyme. Von H. F. LINSKENS. - Nucleinsauren und ihre Bausteine. Von K. FUJISAWA und K. MAKINO. - Pflanzenvircn. Von H. W. J. RAGETL! und J. P. H. VAN DER WANT. - Farbstoffe. Die Chloroplastenfarbstoffe. Von A. HAGER. - Zellsaftlosliche Pigmente (Anthocyane und Flavonoide). Von R. HANSEL. - Wirkstoffe. Wachstumsregulatoren und verwandte Stoffe. Von S. P. SEN. - Vitamine. Von G. MARTEN. - Hemmstoffe. Antibiotica. Von S. YAMATODANI. - Toxine. Von H. R. HOHL. - Aldehyde und Ketone. Von H. F. LINSKENS. - Phenolische Verbindungen und Gerbstoffe. Von H. F. LINSKENS. - Organische Basen. Amine. Von E. STEIN VON KAMIENSKI. - Alkaloide. Von A. ROMEIKE. - Sterine, Steroide und verwandte Verbindungen. Von H. MAcHLEIDT. - Faehausdrueke der Papierehromatographie. Von H. F. LINSKENS. - Literatur zu einzelnen Beitriigen. - Saehverzeichnis. Aus den Besprcchungen •.. Das Werk bietet nicht nur eine hervorragende Einftihrung in das papier chromatographische Arbeiten, sondern dartiber hinaus die Mogliehkeit, an Hand der gegebenen umfassenden Angaben Papierchromatogramme entspreehend anzu fertigen und zu deuten. Damit wird dem Leser das bisher so sehwierige Gebiet der Untersuchung verschiedener Galenika mit einfachen Mitteln ersehlossen. Der besondere Wert des Werkes liegt darin, daB exakte Vorsehriften uber die Methode, die verwendeten Losungsmittelgemisehe und Entwicklungsreagentien gegeben werden, ohne daB auf die entsprechende Originalliteratur zuruekgegriffen werden muB. Damit eignet sich das Werk nicht nur zur Einftihrung in die papierchromato graphisehe Arbeitsweise, sondern vermittelt aueh den Fortgeschrittenen viel neue Anregung. Das \'V'erk ist ausgezeichnet zusammengestellt und aus der verwirrenden Vielzahl der Methoden sind mit glueklieher Hand von den Bearbeitern die besten ausge wahlt worden. Dem Week ist cine weite Verbreitung zu wtinsehen, da man auf jeder Seite die groBe praktisehe Erfahrung de! Verfasser spurt ... Deutsche Apotheker-Zeitung SPRINGER-VERLAG· BERLIN· GOTTINGEN. HEIDELBERG PRAKTIKUM DER PAPIERCHROMATOGRAPHIE ANLEITUNG ZU OBUNGEN IN DER PAPIERCHROMATOGRAPHISCHEN UNTERSUCHUNG PFLANZLICHER INHALTSSTOFFE VON H. F. LINSKENS LUISE STANGE UNlVERSITAT NIJMEGEN UNIVERSITAT KOLN BOTANISCHES INSTITUT INST. FUR ENTWICKLUNGSPHYSIOLOGIE MIT 27 ABBILDUNGEN SPRINGER-VERLAG BERLIN· GOTTINGEN . HEIDELBERG 1961 Aile Rechte, insbesondere das der "Obersetzung in fremde Sprachen, vorbehalten. Ohne ausdrlickliche Genehmigung des Verlages 1st es anch maht gestattet, dieses Buch oder Telle daraus auf photomechanischem Wage (Photokopie, Mikrokopie) zu vernelfaltigen. © by Springer-Verlag oHG. Berlin' Gottingen' Heidelberg 1961 ISBN -13:978-3-540-02720-1 e- ISBN -13:978-3-642-87904-3 DOI:1 0.1 007/978-3-642-87904-3 Die Wiedergabe von Gebrauchsnamen, Handclsnameu, Warcnbezeichnungen usw. in diesem Werk berechtigt auoh ohne besondere Kennze!chnung nicht zu der Annahme, daB solche Namen im Sinn der Warenzeichen-und l\1arkenschutz-Gesetzgebung als frei Z1l betrachten waren und daher von jedermann benutzt werden diirften. Druck der Universitatsdruckerei H. StUrtz AG., WUrzburg Vorwort Die papierchromatographische Technik gewinnt steigend an Bedeutung fiir die Untersuchung pflanzlicher Stoffe und Stoff wechselprozesse. Sie vermittelt mit geringem apparativem Aufwand Zugang zu biologischen Problemen. Diese Anleitung ist fiir die Hand des Studierenden gedacht. Nach Durcharbeiten der 12 "Obungen in der dargestellten Reihen folge solI der Experimentator in der Lage sein, die Methodik der Papierchromatographie auf Grund der gewonnenen Erfahrungen und mit Hilfe der speziellen Literatur sinnvoll zur Losung eines Problems einzusetzen. Es ist die Absicht, die Moglichkeiten und Grenzen der Papierchromatographie sichtbar zu machen. Die Anlage der Handleitung solI auch bei beschrankter Zeit und mit einfachen Mitteln ein sicheres Arbeiten ermoglichen: AlIe Ver suche sind der Unterrichtspraxis entnommen; die Protokoll Fiihrung wird durch Vordrucke erleichtert; eine abschlieBende Frage solI dem Unterrichtenden eine Kontrolle der aktiven Mitar beit bzw. beirn Alleinstudium eine Selbstkontrolle ermoglichen. Es kann nicht die Aufgabe dieses Praktikums sein, die theoreti schen Zusammenhange aufzudecken und die Vielfalt der Anwen dungsmoglichkeiten auszuschopfen. Dazu sei auf die besonderen Monographien verwiesen. Das "Praktikum" baut auf die zusammen fassende Darstellung "Papierchromatographie in der Botanik" (2. Auflage, 1959, Springer-Verlag: Berlin -Gottingen -Heidelberg) auf. Hier konnen die ausfiihrlichen Literaturnachweise gefunden werden. H. F. LINSKENS L. STANGE Nijmegen und Koln, im Sommer 1960 Inhaltsverzeichnis Erste tnmng Seite Der TrennprozeB 1 A. Beobachtung des Trennvorganges .. 1 Aufgaben ........... . 3 B. EinfluB der Papierqualitiit auf den Treunvorgang 3 Aufgaben ............... . 4 C. EinfluB des Trennmittels auf die Trennung . 4 Aufgabe . . ...... . 5 Literatur ............. . 5 Zweite trhung Eindimensionales Chromatogramm; EinfluB von ZU!Jchnitt und Tempe- ratur; quantitative Bestimmung von Aminosiiuren 5 Arbeitsvorschrift. . . . . . . . . . 7 A. Der Einflufl des Papierzuschnittes . 7 Aufgaben . . . . . . . 8 B. EinfluB der Temperatur. . . . . 8 Aufgaben . . . . . . . . . . . 9 C. Quantitative Bestimmung . . . . 10 0:) Bestimmung naeh der FleckengroBe. II Aufgabe. . . . . . . . . . 11 (J) Photometrische Bestimmung . 12 Aufgabe. . . . . . 12 Literatur . . . . . . . . . 13 Dritte trhung Zweidimensionales Chromatogramm mit Vergleichssubstanzen 13 Arbeitsvorsehrift . 14 Aufgaben 16 Literatur .... 17 Vierle Cbung Rundfilter-Technik, Zucker . 17 Arbeit!Jyorschrift . 18 Aufgaben 20 Literatur . . . . 20 Funfte (rbung Photogramm-Technik. Nucleinsauren. 21 Arbeitsyorschrift . 22 Aufgaben 25 Literatur . . . . 25 VI InhaltBverzeichnis Sechste Vbung Salta Extraktiou uud Hydrolyse 26 Arbeitsvorschrift . 26 Allfgaben 28 Literatur .... 29 Siebente Vbung Bioautographie, Doppelehromatographie, WuchsstoUe . 29 Arbeitsvorschrift . 30 Aufgaben 33 Literatur .... 35 AcMe Dbung Fluorcscenzriachwcis, Flechtenssnren . 35 Arbeitsvorschrift . 36 Aufgabe. 38 Literatur .... 38 Neunte Vbung Farbstoffirennung . . . . . 39 A. Trennung von Chloroplasten-Farbstoffen . 39 AI' beitsvorschrift 39 Aufgaben ......... . 40 Literatur. . . . . . . . . . 41 B. Trennllng von Chymochromen 41 AI' beitsvorschrift 41 Aufgaben. 42 Literatur .... 42 Zehnte Vbung Plattentest, Antibiotics . 42 Arbeitsvorschrift . 43 Aufgaben 46 Literatur .... 46 Elite Vbung Alkalotde 46 Arbeitsvorschrift . 47 Aufgaben 48 Literatllr . . . . 48 Zw6lite Vbung Autoradiographie . . 48 Arbeitsvorschrift . 49 Aufgabe. . . . . 50 Literatur . . . . 50 Gutschein fUr den Bezug von 8pezialpapieren fUr die Papierchromato graphic am 80hlu13 des Teries Ahbildungsnachweis Abb. 1 aus: Seltene Naturstoffe, Bd. 4. Karlsruhe: Fluka-Buchs, C. Roth 1959/60. Abb.2, 13 aus: PilCH-TRACEY, Modame Methoden der Pflanzen analyse. Bd. I, Beitrag HELLMANN. Berlin-Gottingen-Heidelberg: Springer 1956. Abb. 4, 22 aus: Papierchromatographie in der Botanik, 2. Aufl. Berlin Gottingen-Heidelberg: Springer 1959. Abb. 17, 19, 20 aus: LINSER-KIERMAYER, Methoden zur Bestimmung pflanzlicher Wuchsstoffe. Wien: Springer 1957. Abb.26 aus: TURBA, Chromatographische Methoden in der Protein. ehemie. Berlin-Gottingen-Heidelberg: Springer 1954. Abb. 23 aus: HOPPE-SEYLER-THIERFELDER, Handbuch der physiologisch. und pathologisch-chemischeu Analyse, 10. Auflage, Bd. 1. Berlin-Gottingen Heidelberg; Springer 1953.