Plum pox virus PDF
Preview Plum pox virus
UNIVERSIDAD DE MURCIA ESCUELA INTERNACIONAL DE DOCTORADO Análisis de la Expresión Génica de la Resistencia a Plum pox virus en Albaricoquero (Prunus armeniaca L.) D. Pedro Manuel Olivares Belchí 2016 (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) Análisis(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)expresión(cid:3)génica(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)resistencia(cid:3)a(cid:3)Plum(cid:3) pox(cid:3)virus(cid:3)en(cid:3)albaricoquero(cid:3)(Prunus(cid:3)armeniaca(cid:3)L.)(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) Pedro(cid:3)Manuel(cid:3)Olivares(cid:3)Belchí(cid:3) Licenciado(cid:3)en(cid:3)Biología(cid:3) Murcia,(cid:3)2016(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) Directores:(cid:3) Dr.(cid:3)Pedro(cid:3)Martínez(cid:3)Gómez(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)Dr.(cid:3)Manuel(cid:3)Rubio(cid:3)Angulo(cid:3) Dpto.(cid:3)Mejora(cid:3)Vegetal(cid:3)(CEBAS(cid:882)CSIC)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)Dpto.(cid:3)Mejora(cid:3)Vegetal(cid:3)(CEBAS(cid:882)CSIC)(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) Agradecimientos(cid:3) Deseo(cid:3)agradecer(cid:3)a(cid:3)todas(cid:3)las(cid:3)personas(cid:3)que(cid:3)han(cid:3)colaborado(cid:3)durante(cid:3)el(cid:3)desarrollo(cid:3) de(cid:3)esta(cid:3)Tesis(cid:3)Doctoral,(cid:3)en(cid:3)especial(cid:3)a:(cid:3) Dr.(cid:3)Pedro(cid:3)Martínez(cid:3)Gómez,(cid:3)investigador(cid:3)del(cid:3)Centro(cid:3)de(cid:3)Edafología(cid:3)y(cid:3)Biología(cid:3) Aplicada(cid:3)del(cid:3)Segura(cid:3)(CEBAS)(cid:3)por(cid:3)el(cid:3)enorme(cid:3)esfuerzo(cid:3)realizado(cid:3)en(cid:3)la(cid:3)dirección(cid:3)de(cid:3)esta(cid:3) tesis,(cid:3)así(cid:3)como(cid:3)por(cid:3)los(cid:3)enormes(cid:3)conocimientos(cid:3)transmitidos(cid:3)en(cid:3)el(cid:3)ámbito(cid:3)científico(cid:3)y(cid:3) filosófico.(cid:3) Dr.(cid:3)Manuel(cid:3)Rubio(cid:3)Angulo,(cid:3)investigador(cid:3)del(cid:3)CEBAS,(cid:3)por(cid:3)formarme(cid:3)en(cid:3)las(cid:3)técnicas(cid:3) empleadas(cid:3)en(cid:3)esta(cid:3)investigación(cid:3)y(cid:3)por(cid:3)transmitirme(cid:3)sus(cid:3)profundos(cid:3)conocimientos(cid:3)en(cid:3)la(cid:3) materia.(cid:3) Dr.(cid:3)Federico(cid:3)Dicenta,(cid:3)responsable(cid:3)del(cid:3)programa(cid:3)de(cid:3)Mejora(cid:3)de(cid:3)Almendro,(cid:3)por(cid:3)su(cid:3) dilatada(cid:3)experiencia(cid:3)y(cid:3)conocimiento(cid:3)del(cid:3)género(cid:3)Prunus.(cid:3) (cid:3)Dr.(cid:3)José(cid:3)Egea(cid:3)y(cid:3)Dr.(cid:3)David(cid:3)Ruiz(cid:3)como(cid:3)responsables(cid:3)del(cid:3)programa(cid:3)de(cid:3)Mejora(cid:3)de(cid:3) Albaricoquero,(cid:3)por(cid:3)su(cid:3)aportación(cid:3)del(cid:3)material(cid:3)para(cid:3)llevar(cid:3)a(cid:3)cabo(cid:3)esta(cid:3)investigación.(cid:3) A(cid:3) mis(cid:3) compañeros(cid:3) de(cid:3) laboratorio(cid:3) Eva,(cid:3) Jorge(cid:3) y(cid:3) Juan(cid:3) por(cid:3) compartir(cid:3) su(cid:3) experiencia.(cid:3) Al(cid:3) Dr.(cid:3) Werner(cid:3) Howad(cid:3) del(cid:3) CRG(cid:3) de(cid:3) Bareclona(cid:3) por(cid:3) su(cid:3) colaboración(cid:3) en(cid:3) la(cid:3) aplicación(cid:3)de(cid:3)marcadores(cid:3)SSRs.(cid:3)(cid:3) A(cid:3)D.(cid:3)Manuel(cid:3)de(cid:3)Castro(cid:3)de(cid:3)aScidea(cid:3)Bioinformatics(cid:3)Solutions(cid:3)de(cid:3)Barcelona(cid:3)por(cid:3)su(cid:3) colaboración(cid:3)en(cid:3)los(cid:3)trabajos(cid:3)de(cid:3)Bioinformática.(cid:3) Al(cid:3)Dr.(cid:3)Alfonso(cid:3)Albacete(cid:3)del(cid:3)Departamento(cid:3)de(cid:3)Nutrición(cid:3)Vegetal(cid:3)del(cid:3)CEBAS(cid:882)CSIC(cid:3) por(cid:3)su(cid:3)colaboración(cid:3)en(cid:3)las(cid:3)evluaciones(cid:3)hormonales.(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) A(cid:3)la(cid:3)Dra.(cid:3)Ana(cid:3)Rosa(cid:3)Ballester(cid:3)del(cid:3)IATA(cid:882)CSIC(cid:3)de(cid:3)Valencia(cid:3)por(cid:3)su(cid:3)colaboración(cid:3)en(cid:3) la(cid:3)aplicación(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)qPCR.(cid:3) Al(cid:3)Dr.(cid:3)Luca(cid:3)Dondini(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)Universidad(cid:3)de(cid:3)Bolonia(cid:3)por(cid:3)su(cid:3)colaboración(cid:3)en(cid:3)el(cid:3) desarrollo(cid:3)y(cid:3)aplicación(cid:3)de(cid:3)marcadores(cid:3)SNPs(cid:3)mediante(cid:3)SNPlex.(cid:3) Al(cid:3)Ministerio(cid:3)de(cid:3)Economía(cid:3)y(cid:3)Competitividad(cid:3)por(cid:3)los(cid:3)proyectos(cid:3)“Análisis(cid:3)de(cid:3)la(cid:3) expresión(cid:3)génica(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)resistencia(cid:3)al(cid:3)Plum(cid:3)pox(cid:3)virus,(cid:3)PPV(cid:3)(Sharka),(cid:3)en(cid:3)albaricoquero(cid:3) mediante(cid:3)la(cid:3)secuenciación(cid:3)masiva(cid:3)del(cid:3)transcriptoma(cid:3)(RNA(cid:882)seq)”(cid:3)(AGL2010(cid:882)16335)(cid:3)y(cid:3) “Bases(cid:3)genéticas(cid:3)y(cid:3)moleculares(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)Resistencia(cid:3)múltiple(cid:3)a(cid:3)Plum(cid:3)pox(cid:3)virus(cid:3)(PPV)(cid:3)y(cid:3) Apple(cid:3)chlorotic(cid:3)leaf(cid:3)spot(cid:3)virus(cid:3)(ACLSV)(cid:3)en(cid:3)albaricoquero”(cid:3)(AGL2015(cid:882)68021(cid:882)R).(cid:3) A(cid:3)la(cid:3)Fundación(cid:3)Séneca(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)Región(cid:3)de(cid:3)Murcia(cid:3)por(cid:3)el(cid:3)proyecto(cid:3)“Breeding(cid:3)stone(cid:3) fruit(cid:3) species(cid:3) assisted(cid:3) by(cid:3) molecular(cid:3) tools”(cid:3) (19879/GERM/15)(cid:3) por(cid:3) la(cid:3) financiación(cid:3) recibida(cid:3)para(cid:3)la(cid:3)elaboración(cid:3)de(cid:3)esta(cid:3)Tesis(cid:3)Doctoral(cid:3) Y(cid:3)por(cid:3)último(cid:3)a(cid:3)mi(cid:3)familia(cid:3)y(cid:3)amigos(cid:3)por(cid:3)el(cid:3)ánimo(cid:3)y(cid:3)apoyo(cid:3)que(cid:3)me(cid:3)han(cid:3)dado(cid:3)en(cid:3) todo(cid:3)momento.(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) Índice(cid:3) ÍNDICE(cid:3)GENERAL(cid:3) (cid:3) Pág.(cid:3) 1.(cid:3)Antecedentes,(cid:3)justificación(cid:3)y(cid:3)objetivos(cid:3) 1(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)1.1.(cid:3)El(cid:3)albaricoquero(cid:3) 3(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.1.1.(cid:3)Descripción(cid:3)taxonómica(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)especie(cid:3) 3(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.1.2.(cid:3)Descripción(cid:3)botánica(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)especie(cid:3) 5(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.1.3.(cid:3)Origen(cid:3)diversidad(cid:3)genética(cid:3)y(cid:3)antecedentes(cid:3)del(cid:3)cultivo(cid:3) 8(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.1.4.(cid:3)Importancia(cid:3)económica(cid:3)y(cid:3)aprovechamientos(cid:3) 10(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)1.2.(cid:3)El(cid:3)virus(cid:3)causante(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)sharka,(cid:3)Plum(cid:3)pox(cid:3)virus(cid:3)(PPV)(cid:3) 14(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.2.1.(cid:3)Taxonomía(cid:3)y(cid:3)descripción(cid:3)del(cid:3)virus(cid:3) 14(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.2.2.(cid:3)Funciones(cid:3)de(cid:3)las(cid:3)proteínas(cid:3)virales(cid:3) 17(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.2.3.(cid:3)Aislados(cid:3)de(cid:3)PPV(cid:3) 18(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.2.4.(cid:3)Sintomatología(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)sharka(cid:3) 21(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)1.3.(cid:3)Origen(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)sharka(cid:3)y(cid:3)situación(cid:3)actual(cid:3)en(cid:3)España(cid:3) 22(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.3.1.(cid:3)Situación(cid:3)actual(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)enfermedad(cid:3) 22(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.3.2.(cid:3)Propagación(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)sharka(cid:3)y(cid:3)métodos(cid:3)de(cid:3)control(cid:3) 24(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.3.3.(cid:3)Susceptibilidad(cid:3)varietal(cid:3)y(cid:3)fuentes(cid:3)de(cid:3)resistencia(cid:3) 25(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)1.4.(cid:3)Análisis(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)resistencia(cid:3)al(cid:3)Plum(cid:3)pox(cid:3)virus(cid:3)en(cid:3)albaricoquero(cid:3) 29(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.4.1.(cid:3)Estudios(cid:3)genéticos(cid:3)y(cid:3)herencia(cid:3)del(cid:3)carácter(cid:3) 30(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.4.2.(cid:3)Estudios(cid:3)genómicos(cid:3)y(cid:3)análisis(cid:3)de(cid:3)QTLs(cid:3) 31(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.4.3.(cid:3)Estudios(cid:3)transcriptómicos(cid:3)y(cid:3)proteómicos(cid:3) 36(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)1.4.4.(cid:3)Técnicas(cid:3)de(cid:3)secuenciación(cid:3)masiva(cid:3)del(cid:3)transcriptoma(cid:3)(RNA(cid:882)Seq)(cid:3) 39(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)1.8.(cid:3)Justificación(cid:3)y(cid:3)objetivos(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)Tesis(cid:3) 40(cid:3) (cid:3) (cid:3) 2.(cid:3)Material(cid:3)biológico(cid:3)y(cid:3)condiciones(cid:3)experimentales(cid:3) 43(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)2.1.(cid:3)Material(cid:3)vegetal(cid:3) 45(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.1.1.(cid:3)Variedades(cid:3)de(cid:3)albaricoquero(cid:3) 45(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.1.2.(cid:3)Patrones(cid:3)de(cid:3)Prunus(cid:3) 47(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)2.2.(cid:3)Aislado(cid:3)de(cid:3)Plum(cid:3)pox(cid:3)virus(cid:3) 47(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)2.3.(cid:3)Condiciones(cid:3)experimentales(cid:3)controladas(cid:3) 48(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.3.1.(cid:3)Inoculación(cid:3)de(cid:3)los(cid:3)patrones(cid:3)mediante(cid:3)injerto(cid:3) 49(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.3.2.(cid:3)Ciclo(cid:3)de(cid:3)crecimiento(cid:3)artificial(cid:3)(cid:3) 50(cid:3) 2.4.(cid:3)Detección(cid:3)de(cid:3)PPV(cid:3)en(cid:3)albaricoquero(cid:3) 52(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.4.1.(cid:3)ELISA(cid:882)DASI(cid:3) 52(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)2.4.2.(cid:3)RT(cid:882)PCR(cid:3) 53(cid:3) (cid:3) (cid:3) 3.(cid:3)Polimorfismo(cid:3)genómico(cid:3) 55(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)3.1.(cid:3)Introducción(cid:3)y(cid:3)objetivos(cid:3) 57(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)3.2.(cid:3)Material(cid:3)vegetal(cid:3) 65(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)3.3.(cid:3)Metodología(cid:3) 65(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.3.1.(cid:3)Toma(cid:3)de(cid:3)muestras,(cid:3)extracción(cid:3)y(cid:3)cuantificación(cid:3)del(cid:3)ADN(cid:3) 65(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.3.2.(cid:3)Análisis(cid:3)de(cid:3)SSRs(cid:3) 66(cid:3) Universidad(cid:3)de(cid:3)Murcia(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)CEBAS(cid:882)CSIC(cid:3)/ I(cid:3) Índice(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.3.3.(cid:3)Extracción(cid:3)de(cid:3)ARN,(cid:3)secuenciación(cid:3)e(cid:3)identificación(cid:3)de(cid:3)SNPs(cid:3) 69(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.3.4.(cid:3)Identificación(cid:3)de(cid:3)SNPs,(cid:3)diseñodecebadoresygenotipado.(cid:3) 71(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)3.4.(cid:3)Resultados(cid:3)y(cid:3)discusión(cid:3) 73(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.4.1.(cid:3)Análisis(cid:3)SSR(cid:3) 73(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.4.2.(cid:3)Análisis(cid:3)SNP(cid:3) 75(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)3.4.2.(cid:3)Análisis(cid:3)SNPlex(cid:3) 77(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)3.5.(cid:3)Conclusiones(cid:3) 79(cid:3) (cid:3) (cid:3) 4.(cid:3)Análisis(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)expresión(cid:3)génica(cid:3) 81(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)4.1.(cid:3)Introducción(cid:3)y(cid:3)objetivos(cid:3) 83(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)4.2.Material(cid:3)vegetal(cid:3) 88(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)4.3.(cid:3)Metodología(cid:3)(cid:3) 89(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.3.1.(cid:3)Extracción(cid:3)y(cid:3)secuenciación(cid:3)de(cid:3)RNA(cid:3) 90(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.3.2.(cid:3)Análisis(cid:3)bioinformático(cid:3) 91(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.3.3.(cid:3)Validación(cid:3)mediante(cid:3)qPCR(cid:3) 94(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)4.4.(cid:3)Resultados(cid:3)y(cid:3)discusión(cid:3) 97(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.4.1.(cid:3)Transcriptomas(cid:3)obtenidos(cid:3)mediante(cid:3)RNA(cid:882)Seq(cid:3)(cid:3) 97(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.4.2.(cid:3)Análisis(cid:3)funcional(cid:3)de(cid:3)los(cid:3)genes(cid:3)expresados(cid:3)diferencialmente(cid:3) 98(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.4.3.(cid:3)Identificación(cid:3)de(cid:3)genes(cid:3)involucrados(cid:3)en(cid:3)la(cid:3)resistencia(cid:3) 102(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)4.4.4.(cid:3)Análisis(cid:3)de(cid:3)la(cid:3)validación(cid:3)de(cid:3)los(cid:3)perfiles(cid:3)de(cid:3)expresión(cid:3)mediante(cid:3)qPCR(cid:3) 109(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)4.5.(cid:3)Conclusiones(cid:3) 111(cid:3) (cid:3) (cid:3) 5.(cid:3)Cambios(cid:3)hormonales(cid:3) 113(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)5.1.(cid:3)Introducción(cid:3)y(cid:3)objetivos(cid:3) 115(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)5.2.(cid:3)Material(cid:3)vegetal(cid:3) 120(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)5.3.(cid:3)Metodología(cid:3) 120(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)5.4.(cid:3)Resultados(cid:3)y(cid:3)discusión(cid:3) 123(cid:3) (cid:3)(cid:3)(cid:3)5.5.(cid:3)Conclusiones(cid:3) 127(cid:3) (cid:3) (cid:3) 6.(cid:3)Conclusiones(cid:3)generales(cid:3) 129(cid:3) (cid:3) (cid:3) 7.(cid:3)Bibliografía(cid:3) 133(cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) (cid:3) II(cid:3)/(cid:3)CEBAS(cid:882)CSIC(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)(cid:3)Universidad(cid:3)de(cid:3)Murcia(cid:3)
Description:The list of books you might like
