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Pathogenicity of the entomopathogenic nematode Heterorhabditis argentinensis (Nemata: Heterorhabditidae) on insects associated to alfalfa crops PDF

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Rev. Soco Eniomol. Argeni. 55 (1--4): 175-177,1996 CAPACIDAD PATOGENICA DEL NEMATODO ENTOMOPATOGENO HETERORHABDITIS ARGENTINENSIS (NEMATA: HETERORHABDITIDAE) FRENTE A INSECTOS ASOCIADOS CON CULTIVOS DE ALFALFA STOCK, S. Patricia* ABSTRACT.PathogenicityoftheentomopathogenicnematodeHeterorhabditis argentinensis (Nemata: Heterorhabditidae) on insects associated to alfalfa crops. With the purpose of establishing the basis of an integrated pest managementprogram,asurveyonnaturalenemies(specificallyentomogenous nematodes)in the centralprovincesofArgentinawasconducted.The nematode Heterorhabditis argentinensis (Nemata: Heterorhabditidae), isolated from larvae ofNaupactus sp. (Coleoptera:Curculionidae)was testedtoverifyitspathogenicity on differentinsects which freguent alfalfa crops. The results obtained showed thatthis nematodeismorepathogenicwithcoleopteransthanlepidopterans,and barely with hymenopterans. This let to suspect that H. argentinensis would probablybe used as biocideto attackdamaginginsectsof alfalfacropswithout causingserious damages tobeneficinsectslike Apis mellifera. Los entomonemátodos pertenecientes a la familia Heterorhabditidae son consi derados, al igual que los representantes de la familia Steinernematidae, potenciales agentes de biocontrol de insectos plaga o perjudiciales para la agricultura, por ser capaces de infectar un amplio espectro de huéspedes. Ahmad (1974) indicó la pre sencia de steinernemátidos y heterorhabdítidos asociados con curculiónidos en la Argentina. Teniendo en cuenta estas observaciones se realizó un relevamiento de nemátodos entomopatógenos, asociados principalmente con los «gorgojos de la al falfa» (Stock, 1991). Como resultado, un nemátodo perteneciente a la familia Heterorhabditidae, Heterorhabditis argentinensis Stock, fue aislado de larvas del gor gojo Naupactus sp. (Coleoptera: Curculionidae). La capacidad patogénica de este nemátodo fue estudiada exponiéndolo a distintos huéspedes, frecuentemente halla dos en alfalfares, con el fin de evaluar su potencialidad como agente de biocontrol de los insectos plaga de este cultivo. Los insectos empleados para evaluar la capacidad patogénica de Heterorhabditis argentinensis fueronlos siguientes:Coleoptera:larvasdeNaupactussp. (Curculionidae), Diabrotica speciosa (Chrysomelidae) y Diloboderus abderus (Scarabeidae); Lepidoptera: larvas de Galleria melonella (Galleridae) y Agrotis ypsilon (Noctuidae); e Hymenoptera: adultos de Apis mellifera (Apidae). Todos los insectos (con excepción de los adultos de A. mellifera) fueron colocados en cápsulas de Petri. En la tapa inferior de cada cáp sula se colocó un disco doble de papel de filtro (Whatman # 1), sobre el cual se ino cularon 2 ml de solución de infectivos juveniles (IJ) de Heterorhabditis argentinensis, a *CentrodeEstudiosParasitológicosyde Vectores(CEPAVE),calle2nro. 584, 1900 LaPlata, Ar gentina. Dirección actual: DepartmentofNematology,UniversityofCalifornia, Davis,California 95616, USA. 176 Rev. Sac.Eniomol. Argent. 55 (1-4), 1996 una concentración de 4000 IJ/ml. La cantidad de insectos usados por tratamiento, al igual que el número de réplicas realizadas, estuvieron sujetos a la disponibilidad de cada uno de ellos: (1) tratamientos con Naupactus sp., D. abderus, D. speciasa y A. ypsilan: 10 larvas/tratamiento y 5 réplicas; y (2) tratamientos con G. mellanella: 10 lar vas/tratamiento y 10 réplicas. Las cápsulas fueron mantenidas en estufa de cultivo a una temperatura de 23-25°C. La cantidad de insectos muertos fue registrada al tercer día de realizada la in fección. Los controles sólo contenían los insectos empleados en cada ensayo, pero sin nemátodos. Los ensayos con A. mellifera fueron realizados en cilindros plásticos de 10 cm de diámetro y 25 cm de alto, cuyos extremos fueron cubiertos con una malla plástica. En cada cilindro se dispusieron 20 insectos adultos. En la base de cada uno de ellos se colocó un algodón embebido en la solución de nemátodos a una concen tración de 4000 IJ/ml, posibilitando que las abejas tomen contacto con los nemátodos cuando absorben agua del algodón. Los controles fueron preparados de igual mane ra, pero colocando el algodón embebido en agua destilada. Los cilindros fueron man tenidos en la oscuridad a una temperatura de 23-25°C. En este caso se realizaron cin co réplicas. Los insectos muertos, al igual que en los tratamientos anteriores, fueron removidos diariamente y por un lapso de tres días consecutivos. Luego se colocaron en trampas de White (White, 1927) y a las 48 horas fueron disecados para verificar la presencia o no de nemátodos, asumiéndose en el primer caso que la muerte de los insectos es la consecuencia del parasitismo por nemátodos. Heterorhabditis argentinensis demostró ser altamente patógeno con insectos del orden Coleoptera, con excepción de D. speciasa, en segundo lugar con Lepidoptera y escasamentepatógenoconHymenoptera (Tabla1).Labajainfectividadregistradasobre Apis mellifera nos hace suponer que este nematodo podría ser aplicado en programas de control de insectos plaga de alfalfa, como es el caso de Naupactus sp., sin causar mayores daños a poblaciones de insectos benéficos polinizadores como es el caso de los ápidos. Tabla 1.Ensayos de patogenicidad de Heierorhabditis argentinensis frente a insectos asociados con cultivos de alfalfa. Orden Tratados Control nro. insectos nro. insectos %M nro. insectos nro. insectos ensayados muertos (*) ensayados muertos Coleoptera Dilabaderus abderus 50 21 42 50 O Diabrotica speciasa 15 4 16 15 2 Naupactus sp. 25 15 58 25 1 Lepidoptera Calleria mellanella 15 5 44 15 O Agratís ypsilan 50 18 36 50 O Hymenoptera Apis mellífera 25 2 12 25 3 (*) Porcentaje de mortalidad corregido por la fórmula de Abbot (1925): (X-Y)/X. 100; donde X = % de insectos vivos en los controles; Y = % de insectos vivos durante el tratamiento con nemátodos. STOCK,S.P.,nemátodosentomopatógenos 177 A pesar de que G.mellonella es usada habitualmente como huésped alternativo para la cría in vivo de steinernemátidos y heterorhabdítidos en el laboratorio, por ser altamente susceptible a ellos, llama aquí la atención el menor porcentaje de mortali dad registrado con respecto a los Coleóptera. Esto podría indicar que Heterorhabditis argentinensis presenta mayor grado de patogenicidad sobre coleópteros que sobre lepidópteros. AGRADECIMIENTOS Agradezco a los ingenieros Isabel Bertolaccini y Alfonso Paravano de la Facul tad de Agronomía y Veterinaria de la Universidad Nacional del Litoral, por su des interesada colaboración en los muestreos realizados en Santa Fe, Argentina. BIBLIOGRAFIA CITADA ABBOT,W.S.1925.Amethodofcomputingthe effectivenessofaninsecticide.J.Econ.Entomol. 18: 165-267. AHMAD, R.1974.Studies on Graphognathus leucoloma (Boh.) Col.: Curculionidaeand its natural enemiesinthe centralprovincesofArgentina.Tech.Bull.Commonw. Inst. Biol.Control 17:37 51. STOCK, S.P. 1991.Contribuciónal estudiode Nematodesparásitosde insectos Coleópterosdel distritoPampeano.TesisdoctoralN°581,Facultadde CienciasNaturalesyMuseo,Univer sidadNacionaldeLa Plata,187pp. WHITE,G.F.1927.Amethodfor obtaininginfectivenematodeslarvaefrom cultures. 5cience 66: 302-303. Recibido:2-II-1995 Aceptado: 22-VI-1995

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