Instituto de Agroquímica y Tecnología de los Alimentos NOVEL ANTIMICROBIAL FILMS BASED ON ETHYLENE-VINYL ALCOHOL COPOLYMERS FOR FOOD PACKAGING APPLICATION Doctor of Philosophy Presented by: Virginia Muriel Galet Supervised by: Dr. Rafael Gavara Clemente Dra. Pilar Hernández Muñoz Valencia, Noviembre 2014 Dr. Rafael Gavara Clemente, Profesor de Investigación del Instituto de Agroquímica y Tecnología de los Alimentos del Consejo Superior de Investigaciones Científicas y Dra. Pilar Hernández Muñoz, Científica Titular del Instituto de Agroquímica y Tecnolo- gía de los Alimentos del Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Hacen constar que: La memoria titulada “Novel antimicrobial films based on ethylene-vinyl alcohol copoly- mers for food packaging application” que presenta Dª Virginia Muriel Galet para optar al grado de Doctor por la Universidad Politécnica de Valencia, ha sido realizada en el Instituto de Agroquímica y Tecnología de Alimentos (IATA-CSIC) bajo su dirección y que reúne las condiciones para ser defendida por su autora. Valencia, 3 de noviembre 2014 Fdo. Dr. Rafael Gavara Clemente Fdo. Dra. Pilar Hernández-Muñoz A mis padres, Javier y Carmina ACKNOWLEDGEMENTS Me gustaría expresar mis más sinceros agradecimientos a mis directores de Tesis, Dr. Rafael Gavara y Dra. Pilar Hernández por ofrecerme esta gran oportunidad. Muchas gracias por vuestras enseñanzas, dedicación, apoyo y sobre todo por vuestra cercanía, siempre me he sentido muy afortunada de formar parte de vuestro equipo. Agradezco también al Dr. Ramón Catalá todo su tiempo, ha sido un placer las conversaciones, y las orientaciones que he recibido. Con especial cariño a la Dra. Gracia López Carballo por su tiempo y esfuerzo, por transmi- tirme toda su pasión y entusiasmo. Gracias a “Goddard Research Group” y a todos mis compañeros de la Universidad de Mas- sachusetts y al “Institute for Sustainability & Innovation” de la Universidad de Victoria. Ha sido una experiencia inolvidable poder realizar estancias con vosotros. A todos mis compañeros, los que estáis y los que ya os marchasteis, por vuestra acogida, disponibilidad, por compartir conmigo conocimientos y muy buenos momentos. A mis vecinas de laboratorio y a cada una de las personas de este centro que han compartido conmigo esta etapa de la vida. Gracias a Pablo Lacruz por un trabajo de maquetación fabuloso. A todos mis amigos por estar siempre ahí. A mis hermanos, Darío y Adelaida, con los que siempre cuento. A Carlos, por el ánimo constante. Por último y en especial, a mis padres, gracias por transmitirme vuestros valores y por enseñarme a luchar por aquello que merece la pena, por ser un ejemplo profesional y personal para mí. TABLE OF CONTENTS ACKNOWLEDGEMETS........................................................................................................... 7 ABSTRACT ................................................................................................................................. 11 1. INTRODUCTION .................................................................................................................. 17 1.1. Antimicrobial active packaging .................................................................................... 18 1.2. Antimicrobial agents ........................................................................................................ 22 1.2.1. Essential oils .................................................................................................................... 22 1.2.2. Ethyl lauroyl arginate (LAE) ....................................................................................... 24 1.2.3. Epsilon-polylysine (EPL) .............................................................................................. 24 1.2.4. Green tea extract (GTE) ................................................................................................ 25 1.2.5. Lysozyme .......................................................................................................................... 26 1.3. Polymers used in antimicrobial active packaging ................................................... 27 1.3.1. Ethylene vinyl alcohol (EVOH) .................................................................................. 28 1.4. Active packaging legislation .......................................................................................... 29 2. OBJETIVES ............................................................................................................................. 37 3. CHAPTERS ............................................................................................................................. 39 3.1. Chapter I .............................................................................................................................. 41 Article 1 ....................................................................................................................................... 43 Article 2 ....................................................................................................................................... 61 3.2. Chapter II ............................................................................................................................. 75 Article 3 ....................................................................................................................................... 77 Article 4 ....................................................................................................................................... 91 Article 5 ....................................................................................................................................... 107 Article 6 ....................................................................................................................................... 123 3.3. Chapter III ........................................................................................................................... 143 Article 7 ....................................................................................................................................... 145 3.4. Chapter IV .......................................................................................................................... 161 Article 8 ....................................................................................................................................... 163 4. GENERAL DISCUSSION .................................................................................................... 179 5. CONCLUSIONS .................................................................................................................... 191
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