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Modification électrochimique de surface pour la mesure des interactions ADN/Protéines (HsRad51 - Transposase) Charles Esnault To cite this version: Charles Esnault. Modification électrochimique de surface pour la mesure des interactions ADN/Protéines (HsRad51 - Transposase). Chimie théorique et/ou physique. Université du Maine, 2012. Français. NNT: 2012LEMA1012. tel-00752894 HAL Id: tel-00752894 https://theses.hal.science/tel-00752894 Submitted on 16 Nov 2012 HAL is a multi-disciplinary open access L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est archive for the deposit and dissemination of sci- destinée au dépôt et à la diffusion de documents entific research documents, whether they are pub- scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, lished or not. The documents may come from émanant des établissements d’enseignement et de teaching and research institutions in France or recherche français ou étrangers, des laboratoires abroad, or from public or private research centers. publics ou privés. UNIVERSITE´ DU MAINE U.F.R. Sciences et Techniques ´ ECOLE DOCTORALE 3MPL E.D. 500 ` THESE pr´esent´ee pour obtenir le grade de Docteur de l’Universite´ du Maine Sp´ecialit´e : Chimie et Physico-Chimie des Polym`eres par Charles ESNAULT sous la direction du Pr. Jean-Fran¸cois PILARD Titre : Modification ´electrochimique de surface pour la mesure des interactions ADN/Prot´eines (HsRad51 - Transposase) Soutenue le 26 juin 2012 JURY Mme. Chantal GONDRAN Universit´e de Grenoble MCU HDR, Rapporteur Mr. Hamid MORJANI Universit´e de Reims MCU HDR, Rapporteur Mr. Guy LOUARN Universit´e de Nantes PR, Examinateur Mme. Axelle RENODON-CORNIERE Universit´e de Nantes CR CNRS, Examinatrice Mr. Benoˆıt CHENAIS Universit´e du Maine PR, Co-Directeur Mr. Jean-Franc¸ois PILARD Universit´e du Maine PR, Directeur Mme. Corinne AUGE-GOUILLOU Universit´e de Tours PR, Invit´ee Mme. Nathalie CASSE Universit´e du Maine MCU HDR, Invit´ee Mme. Sagrario PASCUAL Universit´e du Maine MCU HDR, Invit´ee 2 Remerciements Je tiens tout d’abord à remercier le Pr. Laurent Fontaine et ancien directeur de l’UCO2M pour m’avoir accueilli au sein de l’équipe MSP de l’Institut des Molécules et Matériaux du Mans (IMMM UMR CNRS 6283) Que serait une thèse sans son directeur de thèse, pour ça je remercie le Pr. Jean-François Pilard pour m’avoir soutenu et dirigé tout au long de ce travail, et ce depuis mon Master 1. Egalement pour tout les échanges que l’on a pu avoir que ce soit scientifique ou non. Je tiens également à remercier le Pr. Benoît Chénais pour avoir co-dirigé ce travailenparticulierpourtoutelapartiebiologique,etdeslonguesdiscussions que nous avons eues. Pour avoir rapporté et apporté leurs commentaires à ce travail je remercie les Dr. Chantal Gondran et Hamid Morjani. Ce travail a été réalisé lors d’un projet régional, pour cela je remercie la ré- gion Pays de la Loire pour avoir soutenu l’ensemble du projet et sa réalisation. Qui dit projet, dit équipe, je remercie le Dr. Masayuki Takahushi et le Pr. FabriceFleurypournousavoirapportélaprotéineHsRad51etégalementleDr. Axelle Renodon-Cornière pour avoir passé de longues heures (voire semaine) avec moi à produire et à purifier la protéine HsRad51. A cette équipe s’ajoute le Dr. Nathalie Casse, je ne saurai suffisamment te remercier, je peux néanmoins te remercier de m’avoir fait connaître et comprendre la biologie moléculaire et ceux depuis mon stage de Master 1, de toutes les discussions que l’on a pu avoir, et pour tout plein d’autres choses, mais la liste est trop longue. J’ajoute également mes remerciements au Pr. Guy Louarn pour tout le temps passé à l’XPS,lesdiscussionsetl’aidequevousavezpum’apporter.Mêmes’ilnefaisait 3 pas partit du projet régional, je tiens à remercier le Dr. Nicolas Delorme pour m’avoir consacré autant de temps à l’AFM. Après autant de temps passé entre le laboratoire de chimie et le laboratoire de biologie, j’ai pu croiser de nombreuses personnes que ce soit dans le bureau ou dans les couloirs, en ne voulant oublier personne, je tiens à toutes les remercier pour leurs apports scientifiques ou personnel. Je tiens également à remercier ma famille pour leur soutien durant toutes ces années qui m’ont permis d’aboutir à la réalisation de ce travail. Dernièrement, je tiens à remercier le Dr. Christian Bour et toute son équipe delacliniqueSOSMain(LeMans),sansquijen’auraisputerminermontravail de thèse. 4 6 Liste des abréviations ADN - Acide DésoxyriboNucléique AFM - Atomic Force Microcopy, Microscopie à Force Atomique Ar - Groupement Aryle ADP - Adénosine DiPhosphate ARN - Acide RiboNucléique ATP - Adénosine TriPhosphate CV - Cyclic Voltametry, Voltampérométrie Cyclique ECS - Electrode au Calomel Saturé ET - Eléments Transposables HTH - Hélice-Tour-Hélice ITR - Inverted Terminal Repeat sequences MS - Motif Sonde PCR - Polymerization Chain Reaction, amplification d’ADN QCM - Quartz Crystal Microbalance, Microbalance à Cristal de Quartz RH - Recombinaison Homologue SAM - Self-Assembled Monolayer SDS - Sodium Dodecyl Sulfate, Dodécylsulfate de Sodium SPR - Surface Plasmon Resonance, Résonance Plasmonique de Surface XPS - X-RayPhotoelectronSpectroscopy, Spectrométrie Photoélectronique X 7
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