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Microsporidia parásitos de larvas de mosquito de la Costa Pacífica del Chocó PDF

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Caldasia17(2);231-236.1993 MICROSPORIDIA PARASITOS DE LARVAS DE MOSQUITOS DE LA COSTA PACIFICA DEL CHOCO S. JUAN ZULUAGA Corporación para Investigaciones Biológicas, Apartado 7378,Medellín, Colombia. JAROSLAV WEISER Centro de Patología de Insectos, Academia de Ciencias de Checoslovaquia, Praga, Checoslovaquia. WILLIAM ROJAS Corporación para Investigaciones Biológicas, Apartado 7378, Medellfn, Colombia. SERGIO ORDUZ Corporación para Investigaciones Biológicas, Apartado 7378, Medellín, Colombia. Resumen Sereportan dosgéneros demicrosporidia queparasitan larvasdemosquitos encriaderos naturales detres localidades en lacosta Pacffica Chocoana. Vavraia sp. (Microsporida: Pleistophoridae) parásita larvas de Wyeomyia circumcincta, de Wyeomya simmsi y de Anopheles neivai, recolectadasenlasrosetasdeespeciesdelafamilia Bromeliaceae enlas localidades de Arusí y Joví. Amblyospora sp. (Microsporida: Amblyosporidae) parásita larvas deAedes angustivittatusde criaderosterrestres semipermanentes enlalocalidad de Nuquí.Sedescribelamorfologíadeestosdosmicrosporidia almicroscopio óptico. Estudios preliminares deinfección enlarvasdeAedesaegypti, Culexquinquefasciatus yAnopheles albimanus, criadas en laboratorio, indican que Vavraia sp. infecta lastres especies, con preferencia aCulex quinquefasciatus. Laslarvasexpuestas aesporas deAmblyospora sp. nopresentaron infección. Sediscuteelposiblepapeldeestosdosgéneros enelcontrol de laspoblaciones demosquitos. Abstraet TwogeneraofMicrosporidia werefoundinfecting mosquito larvaeinthree localities onthe Pacific coastofChoco. Vavraia sp.(Microsporida: Pleistophoridae) wasfound inlarvae of Wyeomyia circumcincta, W.simmsi andAnopheles albimanus collected from plants ofthe Bromeliacea family inArusí yJoví.Amblyospora sp.(Microsporida: Amblyosporidae) was found parasitizingAedes angustivittatuslarvae COllectedfromaterrestrial breeding pondin thelocality ofNuqur.Morphology ofthesporesofthetwoparasites under light microscopy isdescribed, aswellaspreliminary dataonhostrangewhenexposed tolaboratory rearad Aedes aegypti, Culex quinquefasciatus andAnopheles albimanus. Their rola inmosquito control isdiscussed. Introducción Prasertphon (1981), Lord & Hall (1983), Becnel et al., (1987 y 1989). Recientemente Los microsporidia son parásitos intracelula- Brooks (1988) publicó una revisión comple- res con un amplio rango de hospederos en el ta de los microsporidia entomopatógenos. reino animal. Varias especies han sido des- critas como parásitos de larvas y adultos de Los géneros Nosema, Amblyospora yVavraia mosquitos, a los que infectan por vía oral o son los más importantes patógenos de in- por un mecanismo transovárico. Estos sectos. Su estudio ha recibido un considera- microsporidia desempeñan un papel impor- bleinterésdebidoasucondición depotenciales tante en el control natural de las poblacio- agentes de control biológico de mosquitos nes de mosquitos (Weiser & Prasertphon, (Andreadis, 1989;Anthonyetal., 1978;Diarra 1981). Este hecho ha sido bien documenta- &Togebaye, 1990y Kelly et al., 1981) ypor do en los estudios de Hazard & Oldacre su habilidad para disminuir la capacidad (1975), Vavra & Undeen (1981), Weiser & vectorial ylongevidad deAnopheles stephensi 231 Caldasla Vol. 17.1993 en infecciones simultáneas con Plasmodium las larvas infectadas se les removieron las falciparum y P. yoelii (Margos et al., 1992 y masas de microsporidium para hacer prepara- Schenker et al., 1992). ciones en fresco y coloración de Giemsa (Poinar & Thomas, 1984). Se aumentó el Las especies de los géneros Amblyospora y tiempo de exposición de la coloración a 20 Thelohania son transmitidas transovárica- minutos y la concentración del colorante se mente de larvas infectadas que han sobre- duplicó. Las placas coloreadas con Giemsa y vivido hasta el estado adulto (Weiser & las preparaciones en fresco se observaron al Prasertphon, 1981; Andreadis, 1990). Las microscopio con el objetivo de inmersión larvas de mosquito se infectan por vía oral, paraestablecer losdiferentes estados dedesa- mientras que su permanencia y dispersión rrollo de Vavraia culicis y Amblyospora sp. depende de la densidad poblacional del Las esporas se sometieron a las técnicas de huésped..Las tasas de infección varían des- presión entre lámina y laminilla y deshidrata- de el mínimo hasta epizootias, que en oca- ción ehidratación para observar la extrusión siones pueden llegar adiezmar laspoblaciones del microfilamento polar (Weiser, 1982). de mosquitos (Weiser & Prasertphon, 1981). Las esporas de las dos especies y el microfi- En Colombia se ha reportado la infección de lamento polar en Vavraia culicis se midieron larvas de simúlidos por microsporidia (Po- enpreparaciones enfresco. Además, seexpu- lydispyrenia simulii y Polydispyrenia sp.) en sieron larvas sanas de Anopheles albimanus, los municipios de La Calera y Chisacá, Cun- Culex quinquefasciatus yAedes aegypti cria- dinamarca (Torres, 1988; Hernández, 1990; das en el laboratorio con esporas de los mi- Torres et al., 1991). crosporidia para determinar la especificidad del parásito. En este artículo se presentan dos especies de microsporidia quehansidoidentificados como Resultados y discusión A. kadunae oA. benigna y Vavraia culicis. Se presentan observaciones morfológicas al mi- El microsporidium Vavraia culicis infecta croscopio óptico de las dos especies y se larvas de Wyeomyia circumcincta, Wy.simm- reportan los resultados preliminares de las si y Anopheles neivai, recolectadas en los pruebas de infectividad bajo condiciones de depósitos de agua de las plantas de la famila laboratorio. Bromeliaceae. De las larvas evaluadas seen- contraron infectadas 11 de las dos especies Materiales y métodos del género Wyeomyia y solamente dos de Anopheles neivai. Este microsporidium in- Las larvas de mosquitos fueron recolectadas fecta principalmente el tejido graso de las en abril de 1991 en las localidades de Arusí, larvas y las lesiones producidas som masas Joví y Nuquí, en el departamento del Chocó blanquecinas localizadas fundamentalmente dentro deunprograma deevaluación deestra- entre el tercer y octavo segmento abdominal tegias de control de malaria en la costa Pací- (fig. 1). El porcentaje de infección de los fica Chocoana. En las localidades de Arusí y abdómenes fue de 20% enAnopheles neivai y Joví las larvas se recolectaron en las rosetas de 29.1%en las dos especies de Wyeomyia. de especies de Bromeliaceae que crecían so- bre árboles de totumo (Crescentia cujete). Los pansporoblastos de Vavraia culicis tie- Las muestras de agua se tomaron en una nen 8, 16, 32Y64 esporas cada uno (figs. 2a bandeja de peltre, utilizando un sifón y las a 2d). En fresco las esporas son cilíndricas y larvas infectadas se seleccionaron por obser- miden 4.57±0.36umdelargo (n=25) y2.47± vación macroscópica. En Nuquí las larvas 0.12umdeancho(n=25) (fig. 3a).Estos datos fueron recolectadas en criaderos terrestres son similares a los reportados por Weiser y semipermanentes y las larvas infectadas se Coluzzi (1972) para Vavraia culicis al infec- seleccionaron con la metodología anterior. A tar larvas de Culiseta longiareolata. En las 232 Zuluaga et al Mrcroapodta Figura 1.Larva de Wyeomiyacircumcincta, infectada conmicrosporidium enlossegmentos abdominales 5 y6,montaje enfresco microscopio estereoscopio, 1.6x. coloraciones con Giemsa se observaron sola- Al exponer el primer estadio de Anopheles mente esporas uninucleadas. Así mismo, se albimanus, Culex quinquefasciatus y Aedes observó el micro filamento polar cuando las aegypti a un inóculo de esporas de Vavraia preparaciones de esporas se sometieron apre- culicis, la infección fue menor del 20% enAe. sión entre lámina y laminilla. Su longitud aegypti, mientras que en Anopheles albima- nus yCulex quinquefasciatus el porcentaje de promedio fue 35.6± 5.97 11m(n=6) yen algu- infección varió entre el 30 y 50%. nos de ellos se observó el microfilamento con aproximadamente 13 vueltas (fig. 3b). El hallazgo de microsporida en el micro am- biente de las rosetas de bromelias no es excep- La infección de larvas de mosquitos con espo- cional (Frank & Curtís, 1977), generalmente ras uninucleadas de Vavraia sp. ocurre duran- se asocia con la presencia de larvas o pupas te su alimentación. Una vez en el intestino infectadas que no cumplen su desarrollo hasta medio y probablemente debido a cambios en adulto, o por adultos infectados que mueren la presión osmótica, las esporas expulsan el en los criaderos después de depositar sus microfilamento polar e introducen el material huevos. Las larvas que eclosionan en estos nuclear a la célula huésped, en la que se microambientes se alimentan de los cadáve- res o remanentes de los cuerpos adquiriendo multiplican y posteriormente la infección al- de esta manera la infección. Otro mecanismo canza el tejido graso (fig.4). La acumulación de dispersión de los microsporidia en estos de las esporas dentro de las células del tejido micro ambientes es la transmisión vía huevos graso causa su hipertrofia y posterior separa- como fue demostrada para Vavraia culicis ción, transformándose en un conjunto de ma- (Wang, 1982). sas más omenos desorganizadas. Al morir las larvas, las esporas uninucleadas son liberadas El microsporidium de los criaderos terrestres al ambiente, desde donde pueden infectar corresponde morfológicamente al género nuevas larvas para así reiniciar su ciclo en la Amblyospora, posiblemente A. kadunae o A. siguiente generación de mosquitos (Wang, benigna. Las esporas son ovoides con el 1982; Weiser & Prasertphon, 1981). polaroplasto en el polo posterior (fig. 5a) y se 233 Figura 2. Pansporoblastos de Vavraia culicis con 8 (2a), 16 (2b), 32 (2c) y 64 (2d) esporas, coloración de Giemsa, 100x. Figura 4.Sección de larva de Wyeomyia circumcincta en la cual se observa la epidermis y el tejido graso, infectado con pansporoblastos de Vavraia culicis en sus primeros estad íos de desarrollo, 100x. Figura 3a. Pansporoblastos y esporas de Vavraia culicis microscopía de contraste de fase, montaje en Amblyospora sp. infecta larvas de Aedes an- fresco,40x. gustivittatus desde el tórax hasta el último Figura 3b. Montaje en fresco de esporas de Vavraia segmento abdominal. En fresco las esporas culicis en el cual se observa el microfilamento polar miden 5.59± 0.41)lm de largo por 3.76± 0.15 con aproximadamente 13enrollamientos, microscopía um de ancho (n=35). Estas medidas están de contraste de fase, 40x. dentro del rango que se presenta en especies de este género (Hazard & Oldacre, 1975). No agrupan en vesículas esporofóricas de ocho se logró observar el microfilamento polar esporas (fig. 5b). Fuera del huésped las vesí- cuando se utilizaron los métodos de deshidra- culas se desintegran en menos de 5 minutos tación e hidratación y presión entre lámina y liberando las esporas. laminilla descritos por Weiser (1982). 234 Zuluaga elal.: Microspodia Las pruebas experimentales de infección de parasitan larvas de mosquitos de la familia larvas de mosquitos criadas en el laboratorio Culicidae en Colombia y el primer reporte de no fueron exitosas debido posiblemente aque Vavraia culicis infectando larvas de Wyeomia las especies del género Amblyospora conoci- sp. das necesitan un copépodo como huésped intermediario (Sweeney & Becnel, 1991). En Agradecimientos consecuencia el papel deAmblyospora sp., en el control de mosquitos podría ser limitado. Esta investigación recibió apoyo financiero del TDR de la Organización Mundial de la Salud y Colciencias. Los autores desean expresar su agra- decimiento al Entomólogo Tadashi Kano, Unidad de Control Biológico, CIB, por la identificación de las especies de mosquitos. Literatura citada ANDREADIS,T.G. 1989. Infection ofafield population of Aedes cantor with the polymorphyc microsporidian, Amblyospora connecticus via release of the intermediate copepod host, J.Am. Mosq. Control Assoc. 4: 81-85. __ .1990. Polimorphic microsporidia of mos- quitoes: potential for biological control. In New Directions in Biological Control: Alternatives forSuppressing Agricultural Pest and Diseases, Alan R. Liss, Inc 177-188. Figura 5a.Esporas deAmblyosporasp., enlascua- ANTHONY,D.W., SAVAGE,K.E., HAZARD,E.I., AVERY, lesseobserva elpolaroplasto enlaparte posterior, S.W., BOSTON, M.O. & S.W. OLDACRE 1978. 100x. Field test with Nosema algerae Vavra and Figura 5b.Pansporoblastos deAmblyospora sp.con Undeen (Microsporidia: Nosematidae) againt 8esporasendiferentes estadíosdedesarrollo, 100x. Anopheles albimanusWiedemann inPanama. Misc. Publ. Entomol. SocoAmer. 1: 17-28. El potencial de Vavraia sp. como agente de BECNEL,J., HAZARD,E.I., FUKUDA,T. & V. SPRAGUE. control biológico es mayor, debido a su faci- 1987. Life cicle of Culicospora magna Kudo (1920) (Microsporida: Culicosporidae) inCu- lidad de dispersión y transmisión de la infec- lexrestuans Theobals with special reference ción encondiciones naturales. Las dos especies to sexuality. J. Protozool. 34: 313-322. reportadas podrían tener un mayor significa- _____ -=...,.,.-_---,.__ ,1989. Develop- do en el control biológico si se establece con ment of Edhazardia aedis (Kudo, 1930) N.G.,N. Combo (Microsporida: Amblyos- certeza que puedan disminuir la capacidad porida) in the mosquito Aedes aegypti (L.) vectorial de Anopheles albimanus como en el (Diptera: Culicidae). J. Protozool. 36: 119- caso de Anopheles stephensi infectado por 139. Nosema algerae (Margos et al., 1992, BROOKS, W.M. 1988. Entomogenous Protozoa. 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