La tuberculose humaine et animale au Tchad

190 Pages·2005·4.29 MB·French

La tuberculose humaine et animale au Tchad:
Contribution à la mise en évidence et caractérisation
des agents causaux et leur implication en santé publique

INAUGURALDISSERTATION

zur
Erlangung der Würde einer Doktorin der Philosophie

vorgelegt der
Philosophisch-Naturwissenschaftlichen Fakultät
der Universität Basel

von
Colette Diguimbaye
aus dem Tschad
Genehmigt von der Philosophisch- Naturwissenschaftlichen Fakultät der
Universität Basel auf Antrag von

Herrn Prof. Dr. Niklaus Weiss und Frau Prof. Gabriela E. Pfyffer

Basel, den 22. Oktober 2004

Prof. Dr. Hans-Jakob Wirz
Dekan
DEDICACE

Je dédie cet ouvrage

En mémoire de
Ma mère Madjimta Marie Louise Kimto,
Ma sœur aînée Thérèse Sayallah Diguimbaye
Mon neveu Christophe Diguimbaye, Kito.

À mes enfants
Solgoty et Thérèse
Pour tous les moments passés loin de vous.
&
A mon époux
Ngombaye Djaibé
Pour sa compréhension, sa patience, son soutien permanent en dépit de ses multiples
tâches et surtout pour son amour.

A tous ceux qui m’ont assuré leur soutien dans le difficile exercice de concilier vie
familiale et activités estudiantines, je les remercie de tout cœur, je pense à toute ma
grande famille.

Table des matières

REMERCIEMENTS i

RÉSUMÉ v

SUMMARY vii

ZUSAMMENFASSUNG ix

PREMIÈRE PARTIE
1
INTRODUCTION
3
Contexte institutionnel et conceptuel de l’étude 3

Chapitre I LA TUBERCULOSE 5
I-1 Historique 5
I-2 Infection et maladie 7
I-2-1 Chez l’homme 7
I-2-2 Chez l’animal 8
I-2-3 Immunologie de la tuberculose 9
I-3 Diagnostic clinique et de laboratoire 10
I-3-1 Chez l’homme 10
La tuberculose pulmonaire 10
Les tuberculoses extra pulmonaires 11
I-3-2 Chez l’animal (bovin) 13
Le diagnostic in vivo 13
Le diagnostic post-mortem 14
I-4 Prévention et Traitement 14
I-4-1 Chez l’humain 14
I-4-2 Chez les bovins 15
Chapitre II GENRE MYCOBACTERIUM 17
II-1 Description du genre 17
II-2 Définition du genre 18
II-2-1 L’acido- alcoolo- résistance 18
II-2-2 La structure des acides mycoliques 19
II-2-3 Le contenu en Guanosine-Cytosine (G+C%) de l’ADN 19
II-3 Classification 19
II-3-1 Importance clinique 19
II-3-2 Vitesse de croissance 20
II-3-3 Classification des mycobactéries non tuberculeuses ou atypiques 20
II-4 Le complexe M. tuberculosis 21

Chapitre III ÉPIDÉMIOLOGIE DE LA TUBERCULOSE
HUMAINE ET BOVINE EN AFRIQUE 25
III-1 Epidémiologie de la tuberculose humaine 25
III-2 Epidémiologie de la tuberculose bovine 27
III-3 La tuberculose- Zoonose 28

Chapitre IV SITUATION DE LA TUBERCULOSE
AU TCHAD 31
IV-1 Données générales sur le pays 31
IV-2 La tuberculose humaine 32
IV-3 La tuberculose bovine 33
DEUXIÈME PARTIE
35
BUT DE L’ÉTUDE
37

Chapitre V OBJECTIF GÉNÉRAL 37

Chapitre VI OBJECTIFS SPÉCIFIQUES 39

TROISIÈME PARTIE
41
MÉTHODOLOGIES
43

Chapitre VII ZONES DE COLLECTE ET LIEU DE
L’ÉTUDE 43
VII-1 Zone de collecte 43
VII-2 Lieu de l’étude 43
VII-2-1 Au LRVZ/F, N’Djaména- TCHAD 43
VII-2-2 Au CNM, Zurich- SUISSE 43

Chapitre VIII MÉTHODES DE LABORATOIRE 45
VIII-1 Le recueil des prélèvements 45
VIII-2 L’examen microscopique 45
VIII-3 La culture des mycobactéries 45
VIII-4 L’identification phénotypique 45
VIII-5 Le test de sensibilité aux antibiotiques 46
VIII-6 Le «Real time PCR» 46
VIII-7 Le «Spoligotyping» 46
VIII-8 RFLP IS6110 47
QUATRIÈME PARTIE
49
RÉSULTATS
49

Chapitre IX Mycobacterium bovis Isolates from Tuberculous
Lesions in Zebu Carcasses at the Slaughterhouse of
N’Djaména, Chad 51

Chapitre X Identification of Mycobacterium tuberculosis Complex
in Chad: Molecular Characterization and Drug
Resistance. 67

Chapitre XI Comparaison des méthodes de disques et MGIT® pour
tester la résistance de M. tuberculosis aux anti-
tuberculeux essentiels 81

Chapitre XII Species identification of
non-tuberculous mycobacteria from humans
and cattle of Chad 93

CINQUIÈME PARTIE
105
DISCUSSION ET CONCLUSIONS
105
Chapitre XIII DISCUSSION 107
Chapitre XIV CONCLUSIONS, PERSPECTIVES ET
RECOMMANDATIONS 111

RÉFÉRENCES
113
ANNEXES
123
Annexe 1 MESURES DE SECURITE AU LABORATOIRE 125
Annexe 2 MILIEUX DE CULTURES 129
1. Milieu de Löwenstein- Jensen 129
2. Milieu liquide pour culture primaire 130
3. Milieu de Middlebrook 7H-10 enrichi à l’OADC 131
4. Milieu de Lebek modifié 132
Annexe 3 LA COLORATION DE ZIEHL-NEELSEN 135
Annexe 4 DÉCONTAMINATION ET MISE EN CULTURE 137
Annexe 5 CARACTÉRISATION BIOCHIMIQUE DES
SOUCHES DE MYCOBACTERIUM 141
1. Catalase thermostable 141
2. Réduction des nitrates 142
3. Détection de la Niacine 144
Annexe 6 TEST INDIRECT DE SENSIBILITÉ AUX
ANTIBIOTIQUES: MÉTHODE DES DISQUES 147
1. Préparation de l’inoculum à partir de la
culture solide 147
2. Préparation de l’inoculum à partir du milieu
liquide Tween- Albumine 148
3. Préparation du milieu avec disques pour
l’antibiogramme 149
Annexe 7 BRUCELLOSIS AND Q-FEVER SEROPREVALENCES
OF NOMADIC PASTORALISTS AND THEIR
LIVESTOCK IN CHAD 151

Schelling, E., C. Diguimbaye, S. Daoud, J. Nicolet, P. Boerlin, M. Tanner, and J.
Zinsstag. 2003. Brucellosis and Q-fever seroprevalences of nomadic pastoralists and

their livestock in Chad. Prev Vet Med 61:279-293.

Curriculum vitae 167
Liste des figures
Figure 1 Schéma du mode de transmission de la tuberculose entre
l’homme et le bovin 29
Figure 2 La carte du Tchad 32
Figure 3 Profils génomiques en spoligotyping des membres du
complexe M. tuberculosis 48
Figure 4 Spoligotypes obtained from 55 M. bovis isolates
from Chad 59
Figure 5 RFLP patterns of 15 Chadian M. bovis strains of which 14
were within spoligotype clusters 60
Figure 6 Map of Chad with the location of the 5 health centres from
were samples derived in this study 70
Figure 7 Spoligo-patterns of 35 M. tuberculosis isolates of Chad 74

Liste des tableaux
Tableau 1 Caractères culturaux et biochimiques des espèces du
complexe M. tuberculosis 24
Table 2 Specimens collected at the main slaughterhouse of N’Djaména,
Chad, and specifications of the condemned carcasses 56
Table 3 Slaughterhouse data of investigated zebu carcasses 56
Table 4 Microscopy’s results 57
Table 5 Cultures 57
Table 6 Specimens collected in 2001 and 2002 and proportion
of AFB-smear and culture positive (on at least one medium) 73
Table 7 Characteristics and results of drug resistance testing of 35 isolates 75
Tableau 8 Résultats comparatifs obtenus par MD au LRVZ/F et par
MGIT® au CNM 88
Table 9 Classification of mycobacteria isolates by laboratory 98
Table 10 Results of NTM species identification with the two methods
INNO-LiPA and PRA-hsp65 at the IP 98
Table 11 NTM species identification by 16S (rRNA) sequencing
at the NCM 99