Isolamento e identificação de bactérias em telas de celulares

2021·0.22 MB·

by  Castilho, Raquel Batista

M.F. Camussi, R.B. Castilho, M.P. Lima, P.R. Siliano, M.Z. Laporta

Isolamento e identificação de bactérias em telas de celulares

Marina Ferreira Camussi¹, Raquel Batista Castilho¹
Mauricio Pereira Lima², Priscila Reina Siliano³, Marcia Zorello Laporta³

1 Graduação, Ciências Biológicas, Centro Universitário Fundação Santo André,
[email protected], [email protected]
2 Microbiologista, [email protected]
3Professor Doutor, Centro Universitário Fundação Santo André, [email protected],

RESUMO
As bactérias são seres unicelulares e procariontes, estão amplamente distribuídas em todos os
ambientes e desempenham diversas funções, porém há aquelas potencialmente patogênicas,
responsáveis por infecções e doenças em plantas e animais. O objetivo do presente estudo foi
pesquisar a presença de bactérias em telas de celulares, identificar os microrganismos isolados
e verificar sua sensibilidade aos antibióticos. As amostras das superfícies das telas dos
celulares foram coletadas com swabs estéreis, semeadas em caldo nutriente e em meios de
culturas específicos. Para a identificação de bactérias Gram positivas, foram realizadas
semeaduras em meios de cultura ágar sangue, coloração de Gram, teste de catalase,
semeadura em ágar Sal Manitol, teste de DNAse, teste de Pyr, Staph- test, teste da coagulase e
semeadura em meio Baird Parker. Para a identificação de Gram negativas, foram realizadas
semeaduras em ágar MacConkey, coloração de Gram e identificação por meio do Enterokit B.
Foram analisadas 46 amostras, sendo identificadas as espécies Staphylococcus epidermidis,
Staphylococcus lugdunensis, bacilos Gram positivos, Staphylococcus aureus, Serratia
marcescens, Serratia spp, Serratia liquefaciens, Hafnia alvei, Escherichia coli e Klebsiella
pneumoniae. Muitas bactérias encontradas são potencialmente patogênicas, podendo provocar
infecções urinárias, infecções respiratórias, infecções cutâneas e choque tóxico, por este
motivo a eficiente higienização do aparelho e das mãos é de extrema importância para o
controle microbiológico.

Palavras-chave: Celulares. Bactérias. Patogenicidade. Microbiologia.

INTRODUÇÃO primeiros exemplares de celulares foram
comercializados, passaram a ser um item
Os microrganismos estão presentes bastante presente na vida de muitas
em todos os lugares, interna e pessoas. Com o aumento da tecnologia os
externamente no corpo, no meio ambiente, celulares tornaram-se mais modernos e
nos objetos etc. Os objetos utilizados hoje são utilizados como meio de
diariamente estão constantemente sujeitos comunicação, interação por redes sociais e
à contaminação, como é o caso dos até instrumento de trabalho. O tecido
celulares. A partir dos anos 80, quando os cutâneo está constantemente em contato
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com o meio ambiente e com Alemanha) e foram incubados a 37o C por
microrganismos, tornando-se rapidamente 24 h. Após este período, com auxílio de
colonizados por certas espécies uma alça de inoculação esterilizada, a
bacterianas. Microbiologistas dizem que a cultura bacteriana em caldo foi semeada
combinação do manuseio constante e o em 4 quadrantes em uma placa de Ágar
calor gerado pelo funcionamento do sangue (Probac, Brasil) e em uma placa de
celular, criam um local propício para a ágar MacConkey (Merck, Alemanha) e,
maioria dos tipos de microrganismos que então, incubadas a 37º C, por 24 h. Em
são normalmente encontrados em nossa seguida, foi feita coloração de Gram para
pele (NUNES & SILIANO, 2016; BALDO identificação da morfologia e para a
et al., 2016). classificação em Gram positivas ou Gram
Desta maneira, o presente estudo negativas.
teve como objetivos identificar as bactérias As colônias Gram negativas
isoladas a partir de amostras de telas de isoladas na placa de ágar MacConkey
celulares e descrever seu potencial em foram semeadas na série bioquímica
relação aos agravos à saúde dos usuários e Enterokit B (Probac, Brasil), com vistas à
também determinar o perfil de identificação da bactéria.
sensibilidade aos antimicrobianos das As colônias Gram positivas
bactérias encontradas. isoladas na placa de Ágar Sangue foram
submetidas ao teste de catalase. Em uma
lâmina de vidro, foi colocada uma gota de
MATERIAL E MÉTODOS água oxigenada (H O ). Com auxílio de
2 2
uma alça de inoculação esterilizada, a
As amostras foram provenientes de colônia foi coletada e misturada à gota de
telas de 46 celulares do tipo touch screen água oxigenada. Caso ocorra formação de
de alunos do curso de Ciências Biológicas bolhas, que correspondem à liberação de
do Centro Universitário Fundação Santo O , devido à lise da H O pela enzima
2 2 2
André. As amostras foram coletadas com catalase, o resultado é positivo. Cocos
auxílio de um swab estéril, umedecido em Gram positivos, em cadeia, catalase
salina (NaCl 0,9%) estéril. Para a coleta da negativa, são sugestivos de Streptococcus
amostra, o swab foi friccionado em toda a spp. Cocos Gram positivos em cachos,
superfície da tela do celular. As amostras catalase positiva, são sugestivos de
coletadas foram semeadas em tubos Staphylococcus spp.
contendo 2mL de caldo nutriente (Merck,
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Os cocos Gram positivos isoladas foi coletada uma colônia do meio ágar
na placa de Ágar Sangue foram semeadas Manitol e transferida para o tubo com
em Ágar Sal Manitol (Laborclin, Brasil) na plasma. Em seguida, o tubo foi incubado a
forma de um pequeno esfregaço circular, 37º C por até 24h.
em seguida as placas foram incubadas a A leitura foi feita após 24 horas de
37oC, por 24h. Formação de colônias incubação, ocorrendo coagulação do
amarelas indica resultado positivo, ou seja, plasma, o teste é considerado positivo,
fermentação do manitol, enquanto a como é o caso do S. aureus, se após 24
ocorrência de colônias rosadas indica horas não ocorrer a coagulação, o teste é
resultado negativo, ou seja, não considerado negativo.
fermentação do manitol. As colônias coagulase positivas
As colônias Gram positivas foram foram, então, semeadas em caldo nutriente,
também semeadas na placa contendo Ágar incubadas a 37ºC, por 24h e, então,
DNAse (Laborclin, Brasil), na forma de semeadas em meio Baird Parker e
um pequeno esfregaço circular. A seguir, incubada a 37oC, por 24h. Colônias de S.
as placas foram incubadas a 37oC, por 24h. aureus nesse meio são cinzentas escuras a
Após este período a placa Ágar DNAse foi preto, brilhantes, convexas, com margens
nrevelada com ácido clorídrico (HCL 1N), puras e zonas transparentes, com
se ocorrer a formação de colônias com ocorrência ou não de zona opaca – halo-
halo, o resultado é positivo, ou seja, houve em torno.
produção da enzima DNAse, Se as Para confirmar o resultado obtido
colônias desenvolvidas não apresentarem no ágar Baird Parker, as colônias foram
halo, o resultado negativo, ou seja, não submetidas ao Staph-test, que apresenta
houve produção da enzima DNAse. hemácias de carneiro sensibilizadas com
Quando os testes Manitol e DNAse forem hemolisina e fibrinogênio e que podem ser
positivos, são realizados os testes para a aglutinadas pela proteína A e o clumping
identificação da espécie Staphylococcus fator de S. aureus. Para isso, uma gota do
aureus: Staph-test (Probac, Brasil), teste da reagente Staphy-test é colocada em uma
coagulase e semeadura em ágar Baird lâmina de vidro limpa, a seguir, é
Parker (Laborclin, Brasil). inoculado colônias típicas de S. aureus,
O teste da coagulase, iniciou-se crescidas no ágar Baird Parker, estas foram
utilizando um tubo de ensaio com 0,3 mL misturadas à gota do reagente. Se ocorrer
de plasma de coelho (Probac, Brasil). Com aglutinação das hemácias, o teste foi
auxílio de alça de inoculação esterilizada, considerado positivo, ou seja, S. aureus.
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Quando os testes no meio Sal Em 35 amostras testadas para a
Manitol e/ou no teste DNase forem identificação de bactérias Gram positivas,
negativos, é realizado o teste Pyr. Com foram identificadas 5 diferentes espécies
ajuda de uma pinça esterilizada, um disco de bactérias Gram positivas:
do teste Pyr foi umedecido em água Staphylococcus aureus em 17%,
destilada esterilizada. A seguir, foi Staphylococcus spp coagulase negativa em
colocado em contato com a superfície da 39%, Staphylococcus lugdunensis em 19%,
colônia em estudo, desenvolvida na placa Bacilos Gram positivos em 22%.
de ágar Manitol. Em seguida, o disco foi
colocado em uma lâmina de vidro e DISCUSSÃO
novamente umedecido com água destilada
esterilizada. Na sequência, foi adicionada No presente estudo, foi verificado
ao disco uma gota do reagente N, N- que a taxa de celulares contaminados por
dimetilaminocinamaldeído. Se o disco algum tipo de bactéria é bastante alta
adquirir cor rosada, a espécie é (97%), corroborando o trabalho de Nunes e
Staphylococcus lugdunensis e se ficar Siliano (2016), que encontraram a taxa de
amarelado – teste negativo –, a espécie é 96% de contaminação. Bactérias Gram
um provável Staphylococcus coagulase positivas do gênero Staphylococcus foram
negativa. identificadas na maioria dos celulares
(76,08%) enquanto as Gram negativas
RESULTADOS foram encontradas em menor frequência
(21,73%). Os resultados de Nunes e
Do total de 46 celulares, 35 Siliano (2016) foram similares: bactérias
apresentaram bactérias Gram positivas Gram positivas do gênero Staphylococcus
(76,08%), 10 apresentaram bactérias Gram foram encontradas em 91% dos celulares e,
negativas (21,73%), e em 1 celular não dentre as bactérias Gram negativas, a
houve crescimento bacteriano (2,17%). espécie encontrada com maior frequência
Nas 10 amostras que apresentaram foi a Serratia marcescens (7%).
bactérias Gram negativas, foram Kilic et al. (2009), em um estudo
identificadas 06 espécies bacterianas, sobre a colonização microbiana de
sendo 03 destas de Serratia marcescens, 03 celulares utilizados por equipes
de Escherichia coli, 01 de Hafnia alvei, 01 hospitalares, verificaram que 61,5% das
de Serratia sp., 01 de Klebsiella amostras estavam contaminadas e que os
pneumoniae e 01 de Serratia liquefaciens. micro-organismos mais encontrados foram
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Staphylococcus epidermidis, seguido por envolvidas em bacteremias, endocardites,
Staphylococcus aureus, Bacillus sp., infecções e sepse (LOWY, 1998).
Corynebacterium spp. e Escherichia coli. Staphylococcus lugdunensis pode causar
Resultado similar ao encontrado no doenças diversas, como endocardites,
presente estudo: Staphylococcus spp infecções de pele e tecidos moles,
coagulase negativa, (39%), Staphylococcus osteomielites, entre outras. (SILVEIRA &
lugdunensis (19%), Staphylococcus aureus D'AZEVEDO, 2011). Klebsiella
(17%). pneumoniae, também é potencialmente
Diversos tipos de bactérias podem patogênica, sendo muito encontrada em
ser isolados em meios de cultura hospitais, causando infecções no trato
específicos, seletivos e diferenciadores. respiratório. (POIREL et al., 2004).
Uma das bactérias Gram positivas isoladas Escherichia coli é habitante normal da
na presente pesquisa, a Staphylococcus microbiota intestinal, mas há categorias
aureus, é de particular interesse, pois é um implicadas em infecções intestinais
micro-organismo patogênico, coagulase (SOUZA et al., 2016), infecções urinárias,
positiva, ou seja, capaz de promover a meningite, infecções de feridas, entre
coagulação do soro, o que a diferencia das outras. (BUSH; SCHMIDT, 2020).
demais bactérias do gênero Serratia spp, também pode ser responsável
Staphylococcus. Essa bactéria pode por causar graves infecções,
provocar dois tipos de doenças, a primeira principalmente no trato urinário.
consiste numa ação direta, ou seja, o (CARVALHO et al., 2010; MENEZES et
próprio microrganismo provoca a doença, al., 2004) assim como Hafnia alvei, um
havendo invasão nos tecidos; e a segunda potencial patógeno de humanos e outros
envolve liberação de toxinas pela bactéria. animais. (DALLANORA et al, 2018).
(SILVA & PINTALHÃO, 2006).
As bactérias identificadas nas CONSIDERAÇÕES FINAIS
amostras retiradas das telas dos celulares
são comumente encontradas na microbiota Foram estudadas 46 amostras
da pele humana, como bacilos Gram obtidas de telas tipo do tipo touchscreen de
positivos e Staphylococcus spp coagulase aparelhos celulares, sendo identificadas
negativa, entretanto, foram identificadas bactérias Gram positivas, como
bactérias potencialmente patogênicas, Staphylococcus lugdunensis,
como Staphylococcus aureus, que como já Staphylococcus aureus, Staphylococcus
dito, podem produzir toxinas, e estão spp coagulase negativa, e Bacilos Gram
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positivos em 35 celulares, e bactérias Gram
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manuseio, sendo recomendável a limpeza
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