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Grundlagen der Mikrobiologie PDF

285 Pages·1999·14.982 MB·German
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Springer-Lehrbuch Springer-Verlag Berlin Heidelberg GmbH Heribert Cypionka Grundlagen der Mikrobiologie Mit 87 Abbildungen Professor Dr. Heribert Cypionka Universität Oldenburg Institut für Chemie & Biologie des Meeres (ICBM) Postfach 2503 26111 OldenburglOldenburg ISBN 978-3-540-65348-6 Die Deutsche Bibliothek -CIP-Einheitsaufnahme Cypionka, Heribert: Grundlagen der Mikrobiologie / Heribert Cypionka. (Springer-Lehrbuch) ISBN 978-3-540-65348-6 ISBN 978-3-662-07587-6 (eBook) DOI 10.1007/978-3-662-07587-6 Dieses Werk ist urheberrechtlich geschützt. Die dadurch begründeten Rechte, insbesondere die der übersetzung, des Nachdrucks, des Vortrags, der Entnahme von Abbildungen und Tabellen, der Funksendung, der Mikroverfilmung oder der Vervie1fältigung auf anderen Wegen und der Speicherung in Datenverarbeitungsanlagen, bleiben auch bei nur aus zugsweiser Verwertung vorbehalten. Eine Vervie1fältigung dieses Werkes oder von Teilen dieses Werkes ist auch im Einzelfall nur in den Grenzen der gesetzlichen Bestimmungen des Urheberrechtsgesetzes der Bundesrepublik Deutschland vom 9. September 1965 in der jeweils geltenden Fassung zulässig. Sie ist grundsätzlich vergütungspflich tig. Zuwiderhandlungen unterliegen den Stratbestimmungen des Urheberrechtsgesetzes. © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 1999 Ursprünglich erschienen bei Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York 1999 Die Wiedergabe von Gebrauchsnamen, Handelsnamen, Warenbezeichnungen usw. in diesem Werk berechtigt auch ohne besondere Kennzeichnung nicht zu der Annahme, daß solche Namen im Sinne der Warenzeichen- und Markenschutz-Gesetzgebung als frei zu betrachten wären und daher von jedermann benutzt werden dürften. Produkthaftung: Für Angaben über Dosierungsanweisungen und Applikationsformen kann vom Verlag keine Gewähr übernommen werden. Derartige Angaben müssen vom jeweiligen Anwender im Einzelfall anhand anderer Uteraturste1len auf ihre Richtigkeit überprüft werden. Satz: Druckfertige Vorlagen des Autors Einbandgestaltung: de 'blik Graphische Gestaltung, Berlin Umschlagfoto: Elektronenmikroskopische Aufnahme von T4 Bakteriophagen, farbverfremdet; Tony Stone Bilderwelten SPIN 10653211 29/3137 -543210 -Gedruckt auf säurefreiem Papier Vorwort Dieses Buch ist aus einführenden Vorlesungen in die allgemeine Mikrobiologie, die Physiologie der Mikroorganismen und die mikrobielle Ökologie sowie aus Vorbe reitungskursen für das Vordiplom Biologie und Marine Umweltwissenschaften an der Universität Oldenburg hervorgegangen. Es soll grundlegende Zusammenhänge und die vielfältigen Aspekte der Mikrobiologie darstellen. Dabei kann und soll es nicht eine enzyklopädisch vollständige Darstellung des gesamten Stoffes der Mi krobiologie geben. Ich habe versucht, die Datenfülle der vorhandenen Lehrbücher zu vermeiden und die wichtigsten Grundlagen möglichst anschaulich zu erklären. Im Mittelpunkt stehen die Prokaryonten, ihr Energiestoffwechsel, ihre Lebens konzepte, ihre spezifischen Leistungen in der Natur und für die Menschen. Viren und eukaryontische Mikroorganismen werden an verschiedenen Stellen verglei chend einbezogen. Morphologie und Systematik werden nur knapp behandelt. Aspekte, die auch in der Botanik, Zoologie, Biochemie und Genetik behandelt wer den, treten gegenüber den spezifisch mikrobiologischen Fragestellungen in den Hintergrund. Allerdings werden moderne molekularbiologische Methoden erklärt. Das Buch soll die Anforderungen des Vordiploms darstellen und erlernbar ma chen. Ich hoffe, dass auch Lehrende davon profitieren können. (Besonders an den Schulen wäre die Vermittlung eines anderen Bildes der Mikroben als das von heimtückischen Schädlingen wünschenswert). Ausgangspunkt eines jeden Kapitels sind jeweils Fragen, wie sie etwa in der Vordiplom-Prüfung gestellt werden. (Ich empfehle die Prüfungsvorbereitung zu zweit. Im wechselweisen Frage- und Ant wortspiel lassen sich Zusammenhänge mit relativ wenig Mühe erarbeiten.) Die Abbildungen sind bewusst einfach gehalten, so dass man sie beim Lernen oder auch in einer Prüfung nachzeichnen kann. Die wichtigsten Begriffe werden in ei nem Glossar am Ende eines jeden Kapitels kurz definiert. Der Index am Schluß des Buches ist sehr ausführlich und enthält Hinweise auf Glossar, Abbildungen und Tabellen. Wertvolle Hinweise zum Manuskript habe ich von den Kollegen Susanne Fetz ner und Ulrich Kattmann aus Oldenburg sowie von Bernhard Schink aus Konstanz erhalten. Aus meiner Familie haben Ruth (sen.) und Anna bei der Korrektur des Manuskripts geholfen, die anderen -wie auch meine Arbeitsgruppe -klaglos mei ne zeitweise erheblich eingeschränkte Verfügbarkeit ertragen. Auch von den Stu dierenden kamen Verbesserungsvorschläge. Ihnen allen danke ich sehr herzlich! Oldenburg, im Dezember 1998 Heribert Cypionka Inhaltsverzeichnis 1 Mikrobiologie - Wissenschaft von unsichtbaren Lebewesen ........................... 1 Mikroorganismen und Viren ...................................................................................... 2 Wissenschaftliche Basis der Mikrobiologie ............................................................... 2 Teilgebiete ..................................................................................................................... 2 Auswirkungen auf andere Disziplinen ....................................................................... 4 Kleine und große Zahlen ............................................................................................. 4 Oberflächen-Volumen-Verhältnis .............................................................................. 6 Sind die Mikroben primitiv? ....................................................................................... 7 2 Aufbau der Zelle -der Grundbedarf des Lebendigen ......................................... 9 Weshalb ist der Frosch grün? ...................................................................................... 9 Kennzeichen von Leben ............................................................................................. 10 Aufbau einer Prokaryontenzelle ................................................................................ 11 Zellwand ...................................................................................................................... 12 Zellmembran .............................................................................................................. 12 DNA .............................................................................................................................. 13 DNA-Replikation ........................................................................................................ 15 Transkription und Translation ....................... _. ........................................................ 15 Stoffwechselkatalyse .................................................................................................. 17 Unterschiede zwischen Prokaryonten und Eukaryonten ....................................... 19 Einheit der Biochemie ............................................................................................... 20 Chemische Zusammensetzung der Zelle ................................................................. 22 Makro-und Spurenelemente .................................................................................... 23 3 Spezielle Morphologie von Prokaryonten ........................................................... 27 Murein ..................................................................... :. .................................................. 28 Lysozym und Penicillin ............................................................................................. 29 Gram-negative und Gram-positive Bakterien ......................................................... 29 Kapseln ........................................................................................................................ 29 Geißeln und Pili .......................................................................................................... 30 Chemotaxis .................................................................................................................. 31 Zelleinschlüsse ............................................................................................................ 32 4 Eukaryontische Mikroorganismen ........................................................................ 35 Algen ........................................................................................................................... 35 Pilze ............................................................................................................................. 37 Protozoen .................................................................................................................... 39 Bedeutung von Protozoen an verschiedenen Standorten ...................................... 42 VIII Inhaltsverzeichnis 5 Viren ..............................................................................................................................4 5 Aufbau von Viren ....................................................................................................... 45 KlassifIkation der Viren. ............................................................................................ 47 Lytischer Cyclus eines Bakteriophagen .................................................................... 48 Lysogenie .................................................................................................................... 49 Der Phage Qß ..............................................................................................................4 9 6 Mikrobiologische Methoden ..•.•..•.•...••.•.•..•.•....•.•.•....•....•.••.•.••...•.••••..•.•..•.••••••..•..•.. 51 Mikroben sichtbar machen ........................................................................................ 51 Strahlengang des Mikroskops ................................................................................... 52 Hellfeld-Mikroskopie und Färbungen ..................................................................... 53 Transmissions-Elektronenmikroskopie .................................................................. 54 Phasenkontrast- Verfahren ........................................................................................ 55 Polarisation und Interferenz-Kontrast .................................................................... 55 Dunkelfeld .................................................................................................................. 56 Fluoreszenz-Mikroskopie .......................................................................................... 58 Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop .................................................................. 58 Raster-Elektronenmikroskopie ................................................................................ 58 Sterilisation ................................................................................................................ 60 Teilentkeimung ......................................................................................................... 60 Kulturmedium ........................................................................................................... 60 Anreicherungskultur ................................................................................................. 61 Vereinzelung von Zellen ............................................................................................ 62 Direktisolierung ......................................................................................................... 64 7 Klassifizierung und Grundstruktur des phylogenetischen Stammbaums ... 67 Taxonomie .................................................................................................................. 67 Artenvielfalt ................................................................................................................ 68 Einordnung einer Reinkultur. ................................................................................... 68 PCR - Polymerase-Kettenreaktion ........................................................................... 70 Sequenzierung von DNA ........................................................................................... 71 Die ribosomale 16 S-RNA .......................................................................................... 73 Grundstruktur des phylogenetischen Stammbaums .............................................. 74 8 Wachstum von Mikrobenkulturen ......................................................................... 79 Potentielle Unsterblichkeit und der Traum der Bakterien .................................... 79 Exponentielles Wachstum ......................................................................................... 80 W achstumsexperiment .............................................................................................. 82 Wachstumsphasen ..................................................................................................... 83 Kontinuierliche Kultur .............................................................................................. 84 Erhaltungsstoffwechsel .............................................................................................. 86 Substrat-Affmität und Ks-Wert ................................................................................ 86 Turbidostat ................................................................................................................. 86 Inhaltsverzeichnis IX 9 Allgemeine Bioenergetik ......................................................................................... 89 Energieformen ............................................................................................................ 89 Thermodynamische Grundlagen ............................................................................. 90 Entropie und Ordnung .............................................................................................. 92 Widerspricht Leben dem zweiten Hauptsatz der Thermodynamik? .................... 92 Freie Energie ............................................................................................................... 93 Freie Energie von Transportprozessen .................................................................... 93 Freie Energie chemischer Reaktionen ...................................................................... 94 Berücksichtigung der tatsächlichen Konzentration der Reaktionspartner .......... 95 Freie Energie von Redoxreaktionen ......................................................................... 95 Energiekopplung -der Umweg als biologisches Prinzip .......................................9 6 ATP als Energiewährung ........................................................................................... 97 Energieladungszustand der Zelle .............................................................................. 98 Mechanismen der ATP-Nutzung .............................................................................. 98 Mechanismen der ATP-Regenerierung .................................................................... 99 10 Transport ................................................................................................................. 103 Semipermeabilität.. .................................................................................................. 103 Aufnahme von partikulärer Substanz .................................................................... 104 Aufnahme von Eisen ................................................................................................ 106 Sekundärer Transport ............................................................................................. 106 Primärer Transport .................................................................................................. 108 Zucker-Transport durch Gruppentranslokation .................................................. 109 11 Abbau eines Zuckermoleküls ............................................................................. 111 Kopplung zwischen Anabolismus und Katabolismus ........................................... 111 Wachstum mit Glucose als Substrat ........................................................................ 112 Energiebedarf für die Assimilation ......................................................................... 112 Energieausbeute der Dissimilation. ......................................................................... 113 Berechnung des zu erwartenden Ertrages .............................................................. 113 Transport und Aktivierung von Glucose ................................................................ 113 Glykolyse .................................................................................................................... 114 Reduktionsequivalente ............................................................................................. 117 Pyruvat- Oxidation .................................................................................................... 117 Tricarbonsäure-Cyclus ............................................................................................. 119 Bilanz der Oxidation von Glucose .......................................................................... 120 12 Regulation ...............................................................................................................1 23 Die Bedeutung irreversibler Schritte ....................................................................... 123 Regulation der Genexpression ................................................................................ 124 Das lae-Operon von Eseheriehia eoli ....................................................................... 125 Katabolit- Repression ............................................................................................... 126 Regulation anabolischer Prozesse .......................................................................... 126 Attenuation ............................................................................................................... 128 X Inhaltsverzeichnis Regulation der Aktivität von Enzymen .................................................................. 128 Pasteur-Effekt ........................................................................................................... 129 Regulation der Enzymaktivität durch chemische ModifIkation ........................ 129 13 Elektronentransport und chemiosmotische Energiekonservierung ........ 131 Bilanz der Veratmung von Glucose ......................................................................... 133 Prinzip des Elektronentransports ............................................................................ 134 Komponenten der Atmungskette ........................................................................... 136 Ablauf des Elektronentransports ............................................................................ 136 Charakterisierung der Atmungskette. .................................................................... 136 Chemiosmotische Energiekonservierung ............................................................... 138 Aufbau von chemiosmotischen Gradienten durch alternative Mechanismen. .. 140 Chemiosmotische Gradienten in Bakterien, Mitochondrien, Chloroplasten ...... 141 Energetische Bewertung des Protonen-Gradienten .............................................. 142 ATP-Konservierung durch die membrangebundene ATPase ............................. 142 Energiebilanz von Atmung und chemiosmotischer ATP-Konservierung .......... 144 14 Gärungen .................................................................................................................1 47 Prinzip der Gärungen .............................................................................................. 147 Rolle von Pyruvat bei den Gärungen ...................................................................... 149 Milchsäure-Gärung .................................................................................................. 149 Alkoholische Gärung ................................................................................................ 151 Pyruvat-Ferredoxin-Oxidoreduktase ...................................................................... 152 Pyruvat-Formiat-Lyase ............................................................................................. 153 Buttersäure-Gärung .................................................................................................. 153 Propionsäure-Gärung ............................................................................................... 154 Gemischte Säure-Gärung. ........................................................................................ 156 Vergärung von Substratgemischen ........................................................................ 156 1 SAnaerobe Atmungsprozesse .............................................................................. 1 S9 Nitrat-Reduktion ....................................................................................................... 161 DenitrifIkation .......................................................................................................... 162 Dissimilatorische Nitrat-AmmonifIkation ............................................................ 163 Sulfat-Reduktion ...................................................................................................... 164 Biochemie und Energiekonservierung bei der Sulfat-Reduktion ........................ 167 Vergärung von anorganischen Schwefelverbindungen ........................................ 168 Schwefel-Atmung ..................................................................................................... 168 Anaerobe Atmung mit Metall-Ionen als Elektronenakzeptoren ......................... 169 Reduktion von Kohlendioxid .................................................................................. 169 Carbonat-Atmung ..................................................................................................... 171 Methanogenese .......................................................................................................... 171 Biochemie der Kohlendioxid-Reduktion zu Methan ............................................. 172 Methanogene Acetat-Spaltung ................................................................................. 173 Homoacetat -Gärung ................................................................................................. 175

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