fontes protéicas alternativas utilizadas nos meios de cultivo durante a produção in vitro de ...

198 Pages·2011·1.26 MB·Portuguese

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UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA
FACULDADE DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E VETERINÁRIAS
CAMPUS DE JABOTICABAL

FONTES PROTÉICAS ALTERNATIVAS UTILIZADAS NOS
MEIOS DE CULTIVO DURANTE A PRODUÇÃO
IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

Tatiane Almeida Drummond Tetzner
Médica Veterinária

JABOTICABAL, SP - BRASIL
2011
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UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA
FACULDADE DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E VETERINÁRIAS
CAMPUS DE JABOTICABAL

FONTES PROTÉICAS ALTERNATIVAS UTILIZADAS NOS
MEIOS DE CULTIVO DURANTE A PRODUÇÃO
IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

Doutoranda: Tatiane Almeida Drummond Tetzner
Orientador: Prof. Dr. Joaquim Mansano Garcia
Co-orientadora: Dra. Christina Ramires Ferreira

Tese apresentada à Faculdade de Ciências
Agrárias e Veterinárias – UNESP Câmpus de
Jaboticabal da Universidade Estadual Paulista “Júlio
de Mesquita Filho”, como parte das exigências para
obtenção do título de Doutor em Medicina
Veterinária (Reprodução Animal).

JABOTICABAL – SÃO PAULO - BRASIL
- 2011 –
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Tetzner, Tatiane Almeida Drummond
Fontes protéicas alternativas utilizadas nos meios de cultivo
durante a produção in vitro de embriões bovinos / Tatiane Almeida
Drummond Tetzner. – – Jaboticabal, 2011
xxvi, 170 f. ; 28 cm

Tese (doutorado) - Universidade Estadual Paulista, Faculdade de
Ciências Agrárias e Veterinárias, 2011
Orientador: Joaquim Mansano Garcia
Banca examinadora: César Roberto Esper, Felipe Perecin, Karina
Belotti Avelino, Paulo Henrique Franceschini
Bibliografia

1. Produção in vitro. 2. Bovino. 3. Embriões. 4. Fontes protéicas.
I. Título. II. Jaboticabal-Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias.

CDU

Ficha catalográfica elaborada pela Seção Técnica de Aquisição e Tratamento da Informação – Serviço
Técnico de Biblioteca e Documentação - UNESP, Câmpus de Jaboticabal.
e-mail: [email protected]
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DADOS CURRICULARES DO AUTOR

TATIANE ALMEIDA DRUMMOND TETZNER – nascida em Ituiutaba – MG, aos
07 dias do mês de outubro de 1980; concluiu o ensino médio no “Colégio Carlos
Drummond de Andrade – Nacional”, na cidade de Uberlândia – MG, em dezembro de
1998. Ingressou no curso de graduação em Medicina Veterinária na Faculdade de
Medicina Veterinária – FAMEV, Universidade Federal de Uberlândia – UFU, em agosto
de 1999; obteve bolsa de Iniciação Científica pelo CNPq, sob a orientação do Prof. Dr.
Edmundo Benedetti. Concluiu, em julho de 2004, o curso superior em Medicina
Veterinária. Obteve bolsa de Treinamento Técnico pela FAPESP, junto ao
Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Reprodução Animal da
Universidade Estadual Paulista -UNESP – Jaboticabal, sob orientação do Prof. Dr.
Joaquim Mansano Garcia, de agosto de 2004 a fevereiro de 2005. Ingressou, em março
de 2005, no curso de Pós-graduação, ao nível de Mestrado, sob a orientação do Prof.
Dr. Joaquim Mansano Garcia, no Programa de Medicina Veterinária, Área de
concentração em Reprodução Animal, na Faculdade de Ciências Agrárias e
Veterinárias - FCAV, Campus de Jaboticabal da Universidade Estadual Paulista –
UNESP, com bolsa de Mestrado pela FAPESP. Ingressou em março de 2007, no curso
de Pós-graduação, ao nível de Doutorado, sob a orientação do Prof. Dr. Joaquim
Mansano Garcia, no Programa de Medicina Veterinária, Área de concentração em
Reprodução Animal, na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - FCAV, campus
de Jaboticabal da Universidade Estadual Paulista – UNESP, com bolsa de Doutorado
pelo CNPq.
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Dedico aos meus pais,
João Henrique Tetzner e Thelma Regina Almeida Drummond Tetzner,
por estarem sempre presentes em todos os momentos, por serem “exatamente
como são”, pelo carinho, pela dedicação constante e pelo
“amor infinito”.

Dedico à minha irmã Talita,
minha amiga, companheira, que nos presenteou com a Júlia,
alegria e bênção em nossas vidas.

Dedico aos meus avós,
Vô Rui e Vó Vera,
meus padrinhos, fonte de amor e de carinho, pela presença contínua e pelo
incentivo incondicional, pelos bons momentos da infância, da adolescência e da vida
adulta.

Dedico aos meus avós,
Vó Ilda e Vô Lotário,
exemplos de simplicidade e trabalho.

Dedico a toda minha família, em especial aos meus Tios
Arlindo, Marcos e Winston,
sempre presentes e amigos.
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AGRADECIMENTOS

A Deus que se faz sempre presente em minha vida, fonte de luz, renovação e
amparo, e que a cada dia me surpreende por sua generosidade para comigo.
Ao professor Prof. Dr. Joaquim Mansano Garcia pela orientação, pelos
ensinamentos, e por ter me acolhido desde a época do estágio supervisionado.
A pesquisadora Dra. Christina Ramires Ferreira pela co-orientação, amizade,
ensinamentos, apoio e ajuda incondicional, sempre solícita e presente.
À Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de Jaboticabal – UNESP, e
à Pós-graduação pela oportunidade oferecida e por proporcionar a realização do
Mestrado e Doutorado.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
pela concessão da Bolsa de Estudos.
Aos professores do Departamento de Reprodução Animal – UNESP Jaboticabal,
em especial ao Prof. Dr. César Roberto Esper, Prof. Dr. Paulo Henrique
Franceschini e Prof. Dr. Wilter Ricardo Russiano Vicente, pelos ensinamentos
transmitidos, pelos conselhos e apoio durante todo esse período.
Ao professor Dr. Felipe Perecin, pela amizade, pelo companheirismo e pela
enorme contribuição em estatística.
Aos funcionários e amigos do DRA, Isabel Aparecida Penariol Natarelli, Ivo
Luiz de Almeida Jr. e Edson, pela convivência e por todos os auxílios. Em especial
meu agradecimento a Rô, Roberta Vantini, pela amizade, dedicação, companheirismo,
e ajuda fundamental durante todo o meu tempo em Jaboticabal.
Aos amigos do laboratório que não estão mais presentes: Andréa Basso,
Alexandre Wolf, Eliana Gazoto, Eric Castro, Gabriel Soria, Karina Avelino, Letícia
Barreto, Mabel Cordeiro, Max Resende, Lorivaldo Landim Jr, Rúbia Silva, Viviane
Sgobbi Dias e Walt Yamazaki, e aos presentes: Aline Costa de Lúcio, Ana Paula
Perini, Clara Slade Oliveira, Fábio Morato, Danilas Salinet de Melo, Juliana Corrêa
Borges, Marina Ragagnin de Lima, Letícia Zoccolaro, Maria Emília, agradeço a
todos pela convivência, auxílio e companheirismo.
8

Às amigas muito especiais, Naiara Zoccal Saraiva, Clara Slade Oliveira e
Simone Cristina Méo Niciura, pela força, incentivo, amizade, auxílio, sugestões, e por
todos os ensinamentos, vocês foram essenciais nessa fase.
Aos amigos da CRV LAGOA pelo apoio, amizade e companheirismo.
A toda minha família, pela constante preocupação, pelo amor e carinho, e por
compreenderem a minha ausência, sempre apoiando e incentivando a continuar a
“caminhada”...
Às amigas Dani, Carlitcha, Naná e Rá, companheiras fiéis, pessoas importantes
e presentes na minha vida em Jaboticabal, agradeço pelas risadas, pelas lágrimas,
pelos inúmeros favores, enfim, por tudo que vivemos juntas.
Aos estagiários que auxiliaram nas etapas práticas no Laboratório, e que muito
contribuem nos experimentos executados, agradeço pelo auxílio e convívio.
Enfim, a todos, que de forma direta ou indireta, participaram na realização deste
trabalho e contribuíram de alguma forma para conclusão de mais essa etapa, meus
sinceros agradecimentos.
9

APOIO FINANCEIRO

Esse projeto foi financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado
de São Paulo – FAPESP, sob processo no 04/12248-8, e pelo Conselho Nacional de
Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq, no período de março de 2007 a
agosto de 2010.
10

SUMÁRIO
Página

LISTA DE TABELAS...............................................................................................xii

LISTA DE FIGURAS...............................................................................................xvi

ABREVIATURAS..................................................................................................xxiv
CAPÍTULO 1 – CONSIDERAÇÕES INICIAIS ......................................................... 1
1. INTRODUÇÃO .................................................................................................. 29
2. OBJETIVOS ...................................................................................................... 32
2.2. Objetivos gerais .............................................................................................. 32
2.3. Objetivos específicos ..................................................................................... 32
4. REVISÃO DE LITERATURA ............................................................................. 33
4.1. Histórico da PIV .............................................................................................. 33

4.2. Produção in vitro de embriões bovinos .......................................................... 35

4.3. Maturação in vitro..............................................................................................7

4.4. Fecundação in vitro..........................................................................................10

4.5. Desenvolvimento e viabilidade embrionária...................................................11
4.6. Qualidade do embrião PIV ............................................................................. 42
4.7. Patógenos em meios utilizados para produção in vitro de embriões bovinos. 45

4.8. Risco de transmissão de doenças pelas técnicas de reprodução in vitro.......22
4.9. Soro Fetal Bovino (SFB) como fonte de suplementação protéica na produção in
vitro de embriões ................................................................................................... 51
4.10. Albumina Sérica Bovina (BSA) como fonte de suplementação protéica na
produção in vitro de embriões ............................................................................... 54