Effect of physiological age of the ticks Dermacentor marginatus (Ixodidae) on their infection and penetration of the tick-borne encephalitis virus into saliva

9 Pages·1991·2.7 MB·English

by  Razumova, I. V.

ПАРАЗИТОЛОГИЯ, 25, 2, 199 1
УДК 576.895.421 : 578.427
© 1991
ВЛИЯНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО ВОЗРАСТА КЛЕЩЕЙ
DERMACENTOR MARGINATUS (IXODIDAE) НА ИХ
ЗАРАЖЕНИЕ И ПРОНИКНОВЕНИЕ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО
ЭНЦЕФАЛИТА В СЛЮНУ
И. В. Разумова, А. Н. Алексеев
При парентеральном заражении вирусом клещевого энцефалита природных самок Derma-
centor marginatus выявлено решающее влияние физиологического возраста клещей на инфици-
рованность их слюны. Вирус отсутствовал в слюне молодых особей II возраста. Максимальное
число случаев заражения слюны было у клещей зрелого III возраста (50 %). Зараженность
слюны не зависела от количества вируса в теле клеща. Отмечена меньшая восприимчивость
к вирусу молодых особей, возможно, связанная со способом заражения. В слюнных железах
клещей II и III возрастов не выявлено существенных различий при световой микроскопии.
Предполагаем, что заражению слюны молодых особей препятствует барьер жирового тела на пути
вируса в слюнные железы, зависимый от возраста клещей. Влияние барьера, вероятно, имеется
также при естественном трансфазовом заражении клещей.
Ранее выявлено влияние календарного возраста клещей на сохранение,
размножение и передачу вируса клещевого энцефалита (КЭ) (Мишаева и др.,
1978). Отмечена также большая эффективность заражения и передачи вируса
у природных клещей по сравнению с лабораторными (Кондрашова и др.,
1975). Было высказано предположение о существенном влиянии физиологичес-
кого возраста клещей на их способность к заражению и передаче возбудителя
(Разумова, 1984). Задача работы — доказать экспериментально влияние фи-
зиологического возраста клещей на заражение вирусом клещевого энцефалита
при проведении исследования на природных особях.1
МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА
В опыте использованы голодные самки D. marginatus природной популяции
(Жигули, май 1987 г.).2 Клещей содержали в пробирках дифференцирован-
ной влажности при 4°. По внешним признакам отобраны наиболее разли-
чающиеся по физиологическому возрасту особи.3 Выделены три возрастные
группы: молодые, зрелые и старые, точнее начало II, начало III и конец
IV физиологических возрастов (Балашов, 1961; Разумова, 1977). Изучено
187 самок.
1 Первое сообщение по данной работе смотри Алексеев и др., 1988.
2 Авторы выражают благодарность Р. Л. Наумову, Л. А. Буренковой и В. П. Гутовой за собран-
ных в природе клещей.
3 Использованы внешние возрастные признаки, частично описанные ранее (Разумова, 1977,
1987), метод будет изложен отдельно.
147
Заражение клещей произведено парентерально уколом в сочленение вертлуга
с 3-й или 4-й коксой. Введено по 0.2—0.6 мкл центрифугата 10 %-ной
мозговой суспензии вируса КЭ с титром 7 lg ЦД50 в 0.03 мл. Контроль произ-
веден двойной — с уколом мозговой суспензии без вируса в объеме опытного
и без укола. Использовано в опытах по 22 особи и в контроле по 10 особей
каждого возраста. После инокуляции все клещи содержались индивидуально
во влажных пробирках при 20—22° в течение 21 дня. По окончании опыта
у части клещей получена при стимулировании слюна и определено заражение
вирусом раздельно слюны и тела клеща. Наличие вируса определяли инди-
видуально в каждом клеще методами титрования на сосунках новорожденных
белых мышей (НБМ) или на культуре клеток почек эмбриона свиньи по
числу бляшкообразующих единиц (БОЕ). Возрастные изменения слюнных же-
лез клещей проследили на гистологических препаратах самок D. marginatus
и больше D. reticulatus, окрашенных трехцветным азановым методом после
фиксатора суза.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
1. Наличие вируса в клещах разного физиологического возраста. Прежде
всего была оценена спонтанная зараженность природных клещей, собранных
в очаге клещевого энцефалита и использованных в опыте. Самки каждого
исследованного возраста были проверены на естественную зараженность
до начала опыта и после его окончания. Для той же цели были использованы
после завершения опыта также обе контрольные партии тех же возрастных
групп. Все исследованные клещи (121 самка, 12 групп) были без вируса клеще-
вого энцефалита. Экстраполировав полученные данные, оценили опытных
клещей как исходно не зараженных.
Примененный парентеральный способ введения вируса уколом под коксу
в большинстве случаев не оказывал заметного влияния на жизнеспособность
клещей. Выживание на 21-й день опытных клещей всех возрастов после
укола с вирусом почти полное (91 —100 %). Выживание контрольных клещей
после укола без вируса почти такое же у особей II и III возрастов (90 %)
и заметно ниже у клещей IV возраста (40 %). В обоих случаях при
уколе выживание старых клещей IV возраста было наименьшим при полном
выживании в контроле.
Заражение клещей, получивших вирус, оценили на 21—24-е сутки (рис. 1).
Число заразившихся клещей (экстенсивность заражения) было высоким среди
особей III и IV возрастов (91—95 %) и достоверно ниже у особей II возраста
(67%). При этом число зараженных особей, выявленных титрованием на
мышах, было заметно больше, чем на культуре клеток. Причины этого неясны,
возможно, второй метод выявления вируса оказался менее чувствительным.
При обоих методах заметна тенденция меньшей восприимчивости к вирусу кле-
щей II возраста. Возможно, это влияние парентерального способа заражения.
В частности, это может быть связано непосредственно с механическим фак-
тором — выталкиванием заражающей суспензии внутренним давлением, кото-
рое заметно при вскрытии молодых клещей. Возможно, аналогично старые
клещи заразились в большем числе в силу значительного высыхания, отчего
заражающая суспензия буквально впитывалась в их тело.
По количеству вируса (интенсивность заражения) результаты, получен-
ные обоими методами, неоднозначные, хотя и близкие — 3 и 3.5 lg ЦД50/О.ОЗ мл
в среднем 5.5 и 6.0 Ig максимально (рис. Г). Максимальный уровень сходен
с пределом репродуктивной емкости организма у клещей. Hyalomma plumbeum
при парентеральном заражении (Чунихин и др., 1980). Интенсивность зара-
жения клещей разных возрастов на культуре клеток сходная — от 3.5 до 3.67 lg.
Однако при титровании на НБМ выявлены некоторые возрастные различия.
148
ш
II IV Возраст
А
67% 91% 9^%
83% 50% 100% 83% 100%' 90%
Б
6 1
5
г
3.7Ьдг
3.1 Ig- z.6ig
3 з
z
ч-
1
il III IV
Рис. I. Заражение клещей Derrnacentor marginatus разного физиологического возраста вирусом клещевого энцефалита при парантеральном
инфицировании (голодные самки на 21—24-е сутки).
А — число заразившихся особей среди инокулированных исследованных (в %)\Б — количество вируса в клещах при индивидуальном определении; 1 — при
титровании на сосунках белых мышей (в lg ЦД50 в 0.03 мл.); 2 — при титровании на культуре клеток (в lg по БОЕ); 3 — общее количество заразивших
ся клещей; 4 — вирус в клещах без определения титра; II—IV—возраст клещей. По оси абсцисс—возраст клещей, по оси ординат — титр вируса в клещах.
Fig. 1. Parenteral infection of the ticks of Derrnacentor marginatus of different physiological age with tick-borne encephalitis virus (hungry fe-
males on the 21st—24th day).
Наиболее высокий в среднем и стабильный титр вируса был у молодых
клещей II возраста (3.67 lg). Немного ниже в среднем (3.06 lg), но не ста-
бильный, с большими индивидуальными отклонениями от 1.0 до 6.0 lg титр
вируса у клещей III возраста. Заметно ниже в среднем и стабильнее титр
вируса у старых клещей IV возраста (2.57 lg, различия статистически недосто-
верные). Возможно, возрастные различия клещей по репродуктивности вируса
проявились бы определение при более отдаленных сроках наблюдений после
заражения. В частности, отмеченные ранее возрастные различия в интенсив-
ности заражения клещей (Мишаева и др., 1978) выявлены через 40 дней
после их инфицирования.
Наиболее значительные возрастные различия обнаружены в проникновении
вируса в слюну клещей разного возраста (рис. 2). Вирус полностью отсутство-
вал в слюне молодых особей II возраста, несмотря на довольно высокий
его титр в теле клещей (до 4.5 lg). Максимально зараженной оказалась
слюна клещей III возраста, у половины особей она была с вирусом (50 %),
при этом и количество вируса в слюне у данной группы клещей было тоже
больше (>0.1 lg). Слабо проник вирус в слюну старых клещей IV возраста
(17 %), и количество его в слюне у них было меньше (<0.1 lg). Различия
II и III возрастов клещей по проникновению вируса в слюну достоверны
(Р=0.97).
Особенно обращает на себя внимание факт, что наличие вируса в слю-
не не зависело от количества вируса в теле клеща (рис. 2, Б). В наиболее
заразившейся группе клещей III возраста слюна была заражена при откло-
нениях титра вируса в теле от 1.5 до 5.5 lg. В то же время даже при большом
титре в 6.0 lg у клещей данного возраста вирус в слюне не обнаружен.
Следовательно, заражение слюны клещей определялось не количеством вируса
в теле клеща, а состоянием самого клеща, в частности его физиологическим
возрастом.
2. Возрастные изменения в слюнных железах. Итак, установлено отсутствие
вируса в слюне очень молодых клещей начала II возраста. Не ясно, блокирован
ли вирус при входе в слюнные железы или при выходе из них.
В слюнных железах голодных клещей заметны некоторые возрастные
различия. Ранее у голодных Rhipicephalus appendiculatus отмечены с возрас-
том большая разрыхленность цельных слюнных желез, уменьшение размера
альвеол и числа е гранул, а также снижение пиронинофилии альвеол III
(Walker, 1985).
У голодных самок D. marginatus и D. reticulatus мы различаем три
типа гранулосодержащих клеток: а — в альвеолах II, d, в — в альвеолах
III.4 Клетки a, d, е расположены базально, у выхода из альвеол. С возрастом,
по нашим данным, заметно уменьшается размер альвеол, в частности альвеол
III, примерно в 2 раза. Изменяется заполненность е клеток секреторными
гранулами. Наиболее обильные накопления во II и III возрастах — вся клетка
забита гранулами. Число е гранул меньше у свежеслинявших и старых
особей I и IV возрастов — видны свободные от гранул участки клетки. Изменя-
ется и способность к окрашиванию альвеол. Слабое удерживание краски
отмечено в I возрасте, наилучшее и максимально дифференцированное ок-
рашивание во II возрасте (клетки a, d — синие, клетки е — красные) и повыше-
ние окрашиваемости при снижении ее дифференцировки в зрелом и особенно
в старом возрастах. Различное окрашивание клеток a, d, е свидетельствует
о разном биохимическом составе их содержимого. Снижается также количество
секрета в слюнных протоках альвеол III — выстилка секрета в протоках
истончается почти вдвое. При этом из голубоватой она становится красно-
4 Обозначение клеток соответствует более поздней номенклатуре (Binnington, 1978; Kemp е. а.,
1982.
150
II Ш IV Возраст
А 0% 50% 17%
Б ч.
6
5
1
V
z
3
2
3
1
II П1 IV
Рис. 2. Проникновение вируса клещевого энцефалита в слюну клещей Dermacentor marginatus
разного физиологического возраста при парентеральном инфицировании (голодные самки на 21 —
24-е сутки).
А — число особей с вирусом в слюне среди заразившихся (в %); Б — количество вируса в теле клещей
(в lg ЬДБО в 0.03 мл) и наличие вируса в слюне при индивидуальном определении. 1 — вирус в теле клеща;
2 — то же, с вирусом в слюне клеща; 3— вирус в теле клеща без определенного титра.
Fig. 2. Penetration of tick-borne encephalitis virus into the saliva of the ticks of Dermacentor margina-
tus of different physiological age at parenteral infection (hungry females on the 21st—24th day).
ватой, что, возможно, связано с последовательным выходом секрета из
клеток d затем е.
f
Большинство отмеченных изменений в слюнных железах относится к раннему
или позднему периодам возрастного развития и связаны с незрелостью желез
в период физиологического доразвития (Балашов, 1967) или с их функцио-
нальным истощением у старых особей. Снижение зараженности слюны вирусом
старых клещей, видимо, связано с падением функциональной активности
желез. Полное отсутствие вируса в слюне молодых клещей нуждается в спе-
циальном обсуждении.
Ранее при электронно-микроскопическом изучении установлено, что вирус
клещевого энцефалита локализуется в слюнных железах питающихся клещей
на эндоплазматических мембранах вакуолей в клинообразных клетках дна
альвеол III (Nosek е. а., 1972).5 У голодных клещей эти клетки недо-
развитые и только с началом питания значительно увеличиваются и в них
появляются секреторные гранулы (Балашов, 1967; Binnington, 1978).
Местонахождения вируса в слюнных железах голодных клещей не выявлено.
Однако выход вируса в слюну клещей зрелого и старого возрастов в наших
5 Эти клетки авторы отмеченных данных (Nosek е. а., 1972) называют е клетками, а по более
поздней номенклатуре (Binnington, 1978) это клетки /.
151
опытах свидетельствует о том, что вирус уже попал в гранулосодержащие
клетки либо во все три типа (а, d, е), либо в какой-то из них. При
этом, на наш взгляд, присутствие вируса наиболее вероятно прежде всего в
е клетках. Они наиболее богаты (из всех трех типов клеток) цитоплазмой,
на внутриплазматических мембранах которой можно ожидать нахождение
вируса. Эти же клетки и больше изменяются в возрастной динамике. Заметим
также, что именно в них развиваются тейлерии (Walker, 1985).
Окончательно судить об отсутствии вируса в слюнных железах голодных
молодых клещей II возраста нельзя без специального электронно-микроскопи-
ческого изучения. Но отсутствие существенных морфологических различий
в железах особей II и III возрастов при световой микроскопии позволяет
предположить и другую причину — непопадание вируса в слюнные железы
молодых клещей.
3. Барьер жирового тела. Отсутствие корреляции между интенсивностью
заражения тела и заражением слюны клещей свидетельствует также в пользу
представления, что на пути вируса из полости тела в слюнные железы
есть преграда, меняющая прямую зависимость проникновения вируса в слюну
от его количества в теле.
Ранее было выявлено, что в переходный период от II к III возрасту у
голодных клещей происходят существенные изменения в состоянии жирового
тела (Разумова, 1975). Последнее в виде сетеобразной ажурной ткани из
тяжей и комочков покрывает внутренние органы и гиподерму. Жировое тело,
наиболее обильное у молодых особей I и II возрастов, напротив, заметно
уменьшается к началу III возраста. При этом визуально выявляются и его
качественные измения.
По нашим данным (Разумова, 1975, 1977), при старении у голодных
клещей, помимо обилия, изменяется сама ткань жирового тела, исчезает ее
тургор и пузырчатая структура, она спадается. Существенные возрастные
изменения претерпевают и особые клетки — эноциты или нефроциты. У молодых
клещей они почти бесцветные со значительным слоем цитоплазмы вокруг
главной вакуоли. При старении нефроциты темнеют, при этом темнеет и увели-
чивается главная вакуоль, заполняющая почти всю клетку, истончается слой
цитоплазмы. По гистологическому окрашиванию вакуоль нефроцита сходна с
гемоглобином кишечного эпителия и, видимо, содержит те же белки.
По данным ультраструктурного изучения (Амосова, 1978), нефроциты
клещей обладают высокой эндоцитозной активностью и интенсивно поглощают
из гемолимфы белки. Известно также, что базофильные клетки жирового
тела клещей содержат большое количество цитоплазматической РНК и явля-
ются камбиальным элементом (Цвиленева, 1961). По Обенчайну (Obenchain
е. а., 1973), базофильные клетки жирового тела отличаются высоким уровнем
цитоплазматической РНК и выраженной способностью к пиноцитозу макромо-
лекул из гемолимфы.
Наличие обильного жирового тела с густой сетью клеточных тяжей, на
наш взгляд, может быть причиной непопадания вируса в слюнные железы
молодых клещей. Эндоцитозная активность молодых нефроцитов, видимо, также
особенно высока. В молодой ткани жирового тела, вероятно, и больше базофи-
лов. Кроме того, отмечалось, что в рыхлой соединительной ткани, включающей
и жировое тело, находится большое число осевших гемоцитов (Цвиленева,
1961; Балашов, 1967, 1984). Вероятно, значительная часть гемоцитов, несу-
щих вирус (Алексеев и др., 1985; Burgdorfer е. а., 1967), тоже оседает
в толще тяжей жирового тела молодых клещей. Следовательно, можно пола-
гать, что именно сеть обильного жирового тела с базофилами и молодыми,
активно поглощающими нефроцитами, адсорбирующая гемоциты с вирусом,
блокирует заражение слюнных желез на пути вируса из гемолимфы.
Ранее была отмечена также фагоцитирующая роль клеток жирового тела
152
(«трахейного комплекса») в отношении бруцелл и боррелий у аргасовых
клещей (Сидоров, 1961). Ржачек (Rehachek, 1965) охарактеризовал это явление
как возможный механизм, влияющий на распространение в организме кле-
щей вирусов и риккетсий. Исходя из изложенного, жировое тело молодых
клещей может, на наш взгляд, представлять биологический барьер для проник-
новения вируса в слюну клещей, причем барьер, зависимый от возраста кле-
щей. Высказанное представление согласуется с мнением, что в соединительно-
тканных образованиях тела клеща может происходить размножение и накопле-
ние различных возбудителей (Алексеев и др., 1985). Отмечено нахождение
в значительных количествах риккетсий в тяжах жирового тела (Балашов,
Дайтер, 1973). Известно также, что в жировом теле комаров некоторые
вирусы накапливаются раньше, чем в слюнных железах (Алексеев и др., 1985).
Существенно представить, возможно ли влияние барьера жирового тела
при естественном, прежде всего трансфазовом, заражении клещей.
Известно, что слюнные железы клещей формируются заново при каждой
линьке на каждой фазе и заново должны заражаться (Балашов, 1967;
Burgdorfer е. а., 1967).
Привлекательность слюнных желез для вируса КЭ отмечена давно (Павлов-
ский и др., 1941). Позднее показано очень быстрое заражение слюнных желез
питающихся клещей вирусом КЭ — на 2—5-е сутки после начала питания самок
(Nosek е. а., 1972; Nosek, 1980). Ткань слюнной железы клещей, видимо, одна
из наиболее благоприятных для вируса КЭ. Об этом свидетельствует и
наиболее полная репликация вируса КЭ в эксплантатах нимфальной ткани
именно слюнных желез (Чунихин и др., 1985).
Показано, что при линьке гиподермальные клетки линяющих клещей явля-
ются «домом на полпути» для вируса, прежде чем заразятся вновь форми-
рующиеся слюнные железы (Burgdorfer е. а., 1967). Гиподермальные клетки
в этот период, до окончания послелиночного доразвития, особенно богаты
цитоплазматической РНК (Балашов, 1967) и являются местом активного
размножения вируса (Nosek, 1980; Nosek е. а., 1984). Следовательно,
на пути вируса из гиподермы в слюнные железы у недавно перелинявших
и молодых клещей находится разветвленная сеть жирового тела с отмечен-
ными выше особенностями.
Учитывая изложенное, представляется вероятным, что при трансфазовом
заражении клещей вирусом барьер жирового тела может задерживать инфици-
рование слюны молодых имаго, возможно, до окончания II физиологического
возраста даже при значительном количестве вируса в теле клеща. Соответствен-
но такая особь, возможно, еще не содержит готовой зараженной слюны
и по крайней мере в начальный период кровососания не способна заразить.
В то же время показано, что именно этот период является оптимальным для
заражения позвоночного хозяина (Чунихин и др., 1988).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При парентеральном заражении природных самок D. marginatus вирусом
клещевого энцефалита впервые выявлено, что физиологический возраст клещей
решающим образом влияет на проникновение вируса в слюну. Вирус полностью
отсутствовал в слюне молодых клещей начала II возраста. Максимальное
число случаев заражений слюны было у клещей зрелого начала III возраста
(50 %) и существенно меньше заражений слюны у старых особей конца
IV возраста (17 %). По данному показателю клещей III возраста можно
отнести к потенциально превосходным переносчикам (Chamberlain, 1954, см.
Чунихин и др., 1985).
Установлено, что заражение слюны не зависело от количества вируса
в теле клеща. Вирус в слюне выявлен при разных титрах в теле от 1.5 до
5 Паразитология, № 2, 1991 г. 153
5.5 lg ЬДзо в 0.03 мл и не обнаружен при тех же титрах и выше (до 6.0 lg).
Это расходится с данными по комарам о слюнном барьере, зависимом от титра
вируса западного лошадиного энцефалита в теле переносчика (Kramer е. а.,
1981).
Выявлена также меньшая восприимчивость к вирусу молодых клещей
при парентеральном введении (67 %) у клещей II возраста по сравнению
с 91—94 % у особей III и IV возрастов, что, возможно, связано со способом
заражения. Отмечена и тенденция к снижению интенсивности заражения
у старых клещей IV возраста, что подтвердило ожидаемое.
В слюнных железах клещей II и III возрастов, достоверно различавшихся
зараженностью слюны, не выявлено существенных возрастных различий при
световой микроскопии, хотя вопрос не решен окончательно.
Предполагаем, что наиболее вероятным фактором, препятствующим зара-
жению слюны молодых клещей, может быть барьер жирового тела, зависи-
мый от возраста клещей и наиболее проявляющийся у молодых особей
(Разумова, 1990). Влияние данного фактора весьма вероятно и при естест-
венном трансфазовом заражении клещей. При этом возможна задержка инфи-
цирования слюны молодых особей даже при значительном количестве ви-
руса в их теле. Особенно это реально у видов с обильным жировым телом,
в частности рода Dermacentor. Полученные данные подтверждают в целом ги-
потезу о существенном влиянии физиологического возраста клещей на их спо-
собность к заражению и передаче возбудителей, в частности вируса клещевого
энцефалита.
Список литературы
Алексеев А. Н., К о н д а ш о в а 3. И. Организм членистоногих как среда обитания возбудите-
лей. Свердловск, 1985, 180 с.
Алексеев А. К., Разумова И. В., Ч у н и х и н С. П., Р е ш е т н и к о в И. А. Поведение
вируса клещевого энцефалита в клещах Dermacentor marginatus Sulz (Ixodidae) разного
физиологического возраста // Мед. паразитол. 1988, №3. С. 17—21.
Амосова Л. Н. Ультратонкое строение жирового тела иксодового клеща Hyalomma asiaticum //
Ультра структурные особенности наземных членистоногих. Л., 1978. С. 61—69.
Балашов Ю. С. Динамика запасных питательных веществ и определение возраста у голодных
иксодовых клещей // Зоол. журн. 1961. Т. 40. № 9. С. 1354—1365.
Балашов Ю. С. Кровососущие клеща (Ixodoidea) —переносчики болезней человека и живот-
ных. Л., 1967. 319 с.
Балашов Ю. С. Роль морфофизиологических особенностей кровососущих членистоногих в пере-
даче возбудителей инфекций // Паразитол. сб. Л. 1984. Т. 32. С. 22—42.
Балашов Ю. С., Дайтер А. Б. Кровососущие членистоногие и риккетсии. Л., 1973. 250 с.
Кондрашова 3. Н., Котельникова Г. М. Поведение вируса клещевого энцефалита
в клещах Ixodes persulcatus разного происхождения // Мед. паразитол. 1975. № 1. С. 25—39.
Мишаева Н. П., Вотяков В. И. Влияние физиологического состояния клещей на интенсив-
ность размножения в них вируса клещевого энцефалита // Вопр. вирусол. 1978. № 2. С. 232—
238.
Павловский Е. Н., Соловьев В. Д. О циркуляции вируса весенне-летнего энцефалита
в организме клеща переносчика Haemaphysalis concinna // Тр. Воен.-мед. акад. им. С. М. Ки-
рова. 1941. Т. 25. С. 9—18.
Разумова И. В. Анатомические возрастные изменения голодных имаго иксодовых клещей.
(К вопросу о физиологическом возрасте) // Мед. паразитол., 1975. № 2. С. 188—191.
Разумова И. В. Физиологический возраст имаго иксодовых клещей и ускоренный метод его
определения // Мед. паразитол. 1977. № 5. С. 557—566.
Разумова И. В. Значение использования определения физиологического возраста иксодоидных
клещей для понимания взаимоотношений переносчиков с возбудителями//11-я Всесоюз.
конф. природ, очагов, болез. (Тез. докл.) Алма-Ата, 1984, ч. 2, с. 315.
Разумова И. В. Анатомический экспресс-метод определения физиологического возраста
клещей рода Ixodes / Мед. паразитол., 1987. № 6. С. 33—38.
Разумова И. В. Возрастной барьер жирового тела у иксодоидных клещей // 6-е Всесоюз. совещ.
теор., приклад, акарологии (Тез. докл.). Л., 1990. с. 105.
Сидоров В. Е. Условия существования и пути циркуляции возбудителей в аргасовых клещах
на примере бруцелл и боррелий; Автореф. канд. дис. М., 1961. 15 с.
154
Цвиленева В. А. Рыхлая соединительная ткань иксодоидных клещей // Арх. анатом., гистол.,
эмбриол. Л. 1961. Т. 41, вып. 12. С. 79—89.
Чуни хин С. П., Куренков В. В. Изучение динамики репродукции вируса клещевого
энцефелита в клещах Hyalomma plumbeum // Мед. паразитол. 1980. № 2. С. 25—27.
Чунихин С. П., Леонова Г. Н. Экология и географическое распространение арбовирусов. М.,
1985. 127с.
Чунихин С. Гк, Алексеев А. Н., Решетников И. А. Определение дозы вируса клещевого
энцефалита в слюне голодных иксодоидных клещей // Мед. паразитол. 1988. № 3. С. 89—91.
Binnington. К. С. Sequential changes in salivary gland structure diring attachment and feeding
of the calle tick, Boophilus microplus//Int. J. Parasitol. 1978. Vol. 8. N 2. P. 97—115.
Burgdorfer W., Varma M. G. Transstadial and transovarial development of disease agent
in artropods / Ann. Rev. Ent. 1967. Vol. 12. P. 347—376.
Kemp D. H., Stone B. F., Binnington К. C. Tick attachment and feeding: role of the
mouthparts, feeding, apparatus, salivary gland secretions and the host response//Physiol.
Ticks. Oxford e. a. 1982. P. 119—168.
К r a m e r L. D., H a r d у J. L., P r e s s e r S. В., H о u k E. J. Dissemination barriers for Western
equine encephalomyelitis viris in Culex tarsalis infected after ingestion of low viral doses//
Amer. J. Trop. Med. Hyg. 1981. Vol. 30, N 1. P. 190—197.
Nosek J. Virus-vector-host relationships // Proceedings International Symposium New Aspects in
Ecology of Arboviruses. Bratislava. 1980. P. 223—244.
Nosek J., Ciampor F., Kozuch O., R a j с a n i. Localization of tickborne encephalitis
TBE virus in alveolar cells of salivary gland in Dermacentor marginatus and Haemaphysalis
inermis ticks//Acta virol. 1972. Vol. 16. P. 493—497.
N о s e k J., К о г о 1 e v M. В., С h u n i k h i n S. P., Kozuch О., С i a m p о r F. The replication
and eclipse-phase of the tick-borne encephalitis virus in Dermacentor reticulatus // Folia
parasitol. 1984. Vol. 32. N 2. P. 187—189.
О b e n с h a i n F. D., О 1 i v e r J. H. A Qualitaitive Analysis of the Form, Function and Interrela-
tionships of Fat Body and Associated Tissues in Adult Ticks (Acari-Ixodoidea) //J. Exp. Zool.
1973. Vol. 186. P. 217—236.
Rehachek J. Development of animal viruses and rickettsiae in ticks and mites//Annual Rev.
Entomol. 1965. Vol. 10. P. 1—24.
Walker A. R. Age grades and infection rates of Rhipicephalus appendiculatus Neumann
(Acari : Ixodidae) to assess theileriosis challenge in the field // Bull. Entomol. Res. 1985.
Vol. 75, N 4. P. 653—660.
ИМПиТМ им. E. И. Марциновского Минздрава СССР Поступила 28.03.1989
Москва
EFFECT OF PHYSIOLOGICAL AGE OF THE TICKS DERMACENTOR MARGINATUS (IXODI-
DAE) ON THEIR INFECTION AND PENETRATION OF THE TICK-BORNE ENCEPHALITIS
VIRUS INTO SALIVA
I. V. Razumova, A. N. Alekseev
Key words: physiological age of ixodids; tick-borne encephalitis virus; infection of ixodid ticks' saliva
with tick-borne encephalitis virus
SUMMARY
The decisive effect of physiological age of ticks on the infection of their saliva was revealed
by means of parenteral infection of D. marginatus females with tick-borne encephalitis virus. The
virus was not found in the saliva of young individuals of instar II. Maximum number of cases of saliva
infection was recorded in mature ticks of instar III (50 %). It was established that the in-
fection of saliva did not depend on the amount of virus in the tick's body. Less susceptibility
to the virus of young individuals, associated probably with the way of infection, was noted.
Under light microscopy there were observed no significant age differences in salivary glands
of ticks of instars II and III.
The infeciton of saliva of young individuals is, apparently, opposed by the barrier of fat
body on the way of virus to salivary glands, depending on the age of ticks. The barrier is
supposed to have an influence under natural transphase infection of ticks.