Diapositiva 1 - Sociedad Española de Anatomía Patológica

48 Pages·2013·2.49 MB·Spanish

Estudio de proteínas musculares por Western blot y técnicas de
genética aplicadas a las enfermedades neuromusculares: PCR,
RFLP y secuenciación
Dra. IRENE VIÉITEZ GONZÁLEZ
Servicio de Anatomía Patológica y Neuropatología – Hospital Meixoeiro
Complejo Hospitalario Universitario de Vigo (CHUVI)

Instituto de Investigación Biomédica de Vigo
Cádiz, 21-24 Mayo 2013 - XXVI Congreso Nacional de la SEAP-IAP, XXI Congreso Nacional de la
SEC, II Congreso Nacional de la SEPAF
Consideraciones generales sobre ácidos
nucleicos y proteínas
FUNDAMENTO CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR
• La información genética, contenida en el ADN, se mantiene y es trasferida a su descendencia por su
capacidad de REPLICACIÓN
•El ADN transfiere la información al ARN mediante la TRANSCRIPCIÓN en el núcleo.
•El ARN mensajero se desplaza al citoplasma con la información del ADN y, mediante la
TRADUCCIÓN, sintetiza las proteínas
•Las proteínas son las encargadas de desarrollar las diferentes funciones de las células
Núcleo Citoplasma
Replicación Transcripción Traducción
ADN ARN Proteína
• Excepciones:

- Retrovirus  Transcripción inversa (transcriptasa inversa)
- Virus de ARN  Duplicación del ARN (ARN polimerasa)
- Ribozimas: ARN con propiedades autocatalíticas, que son capaces de modificarse y replicarse por si mismos.
- Priones: Proteínas que se autoreplican
ADN: Ácido didesoxirribonucleico

- NUCLEÓTIDOS de desoxirribosa: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) y Timina (T)
- ENLACE FOSFODIÉSTER
- Dirección 5’  3’
- Estructura en DOBLE HÉLICE y ANTIPARALELA
- COMPLEMENTARIEDAD:
A – T (2 puentes de H ) / G – C (3 puentes de H )
2 2
Nucleótido
ARN: Ácido ribonucleico

- NUCLEÓTIDOS de ribosa: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) y Uracilo (U)
-De cadena sencilla (5’  3’) : MONOCATENARIO (excepto reovirus)
- Complementariedad con el ADN molde (la Adenina se combina con Uracilo)  TRANSCRIPCIÓN
- Tipos de ARN  Distintos papeles en la transmisión de la información
ARN Mensajero: sirve de molde para la síntesis de las proteínas y transporta la información
desde el DNA (núcleo) hasta el centro de producción de la síntesis proteica (ribosoma)
ARN Ribosómico: forma parte de los ribosomas que llevan a cabo la traducción
ARN Transferente: sirve para el transporte de los aminoácidos específicos desde las reservas
citosólicas hasta los ribosomas y aseguran su correcto alineamiento
Otros ARNs se emplean en la elaboración del RNA y en la exportación extracelular de
proteínas

RNA ribosomal

(rRNA)
RNA de transferencia

(tRNA)
RNA mensajero
(mRNA)
LAS PROTEÍNAS

- Combinación de AMINOÁCIDOS (20 diferentes)
- Compleja organización estructural: Cadena aminoacídica > Estructura cuaternaria (Complejo proteico)
- Funciones muy diversas: Estructurales, Enzimas, Receptores, Hormonas, Anticuerpos…
EL CÓDIGO GENÉTICO

Relación entre la secuencia de nucleótidos del ADN y la secuencia de aminoácidos de la proteína

Organizado en tripletes o CODONES: cada
tres nucleótidos corresponden a un
aminoácido.
Los codones TAA, TAG y TGA indican la
parada de la síntesis proteica.

DEGENERADO: existe más de un triplete
que codifica por el mismo aminoácido.

ESPECÍFICO: ningún codón codifica más de
un aminoácido

CONTÍNUO: el cuadro de lectura de los
tripletes se realiza sin espacios en sentido 5’-3’
desde el codón de inicio hasta el de parada.

UNIVERSAL: el mismo triplete en diferentes
especies codifica para el mismo aminoácido.
¿ Qué es un Gen?
Unidad física y funcional básica de información contenida en el ADN

Exón: Región del gen que se mantiene en el ARN mensajero tras su maduración (Splicing). Parte
codificante del gen

Intrón: Región del gen que no se mantiene en el ARN mensajero tras el proceso de Splicing. Parte no
codificante del gen.
GEN
Maduración del
ARNm
¿ Qué es un Alelo?
En organismos diploides es cada una de las dos copias del gen presente en su genoma
ALELO DOMINANTE: Alelo que enmascara la expresión fenotípica del otro alelo del mismo locus.
ALELO RECESIVO: Alelo que para expresarse debe estar en ambos locus.
HOMOCIGOTO: Los dos alelos iguales para un locus.
HETEROCIGOTO: Los dos alelos distintos para un locus.
MUTACIÓN: Tipos de mutaciones
Cambio en la información genética que puede ser transmitido a la descendencia
MUTACIONES PUNTUALES: Se produce el cambio de un único nucleótido

“Missense”: Variación de un nucleótido que conlleva el cambio de un aminoácido por otro distinto.

Secuencia normal Secuencia mutada

5’ ACTGCATTTAGC 3’ 5’ ACTGCATCTAGC 3’

T A F S T A S S
“Nonsense”: Variación de un nucleótido que conlleva el cambio de un aminoácido por un codón de parada
(TAG, TAA o TGA).
Secuencia normal Secuencia mutada
5’ AGCTGCAGCAAT 3’ 5’ AGCTGAAGCAAT 3’
S C S N S X
MUTACIONES FRAMESHIFT (Cambio en la pauta de lectura): Se produce un cambio total en el
sentido del mensaje genético a partir del sitio de la mutación. Se sintetiza una proteína inactiva, a menudo
truncada.
Se debe a: DELECIONES, INSERCIONES, INDELS, DUPLICACIONES

MUTACIONES IN-FRAME: Si el cambio afecta a un triplete o varios, la proteína solo pierde los
aminoácidos implicados.

MUTACIONES DE SPLICING (de corte y empalme) : Mutaciones que alteran el proceso de maduración
de los ARNm generando transcriptos alterados que codifican por proteínas truncadas.