CUANTIFICACIÓN DE ÁCIDO OLEANÓLICO, ÁCIDO URSÓLICO Y ÁCIDO ROSMARÍNICO EN TRES ESPECIES PERUANAS DE CLINOPODIUM (LAMIACEAE, NEPETOIDEAE, MENTHEAE)

2016·10.1 MB·Spanish

by  Carlos Alberto Serrano Flores

Arnaldoa 23 333 - 350, 2016 ISSN: 1815-8242 (edición impresa)
(1):
ISSN: 2413-3299 (online edition)
de
Cuantificación ácido ácido
oleanólico,
ursólico ácido rosmarínico en especies
y tres
Clinopodium
peruanas de (Lamiaceae,
Mentheae)
Nepetoideae,
Quantification of oleanolic acid, ursolic acid
and
rosmarinic acid three Peruvian species of
in
Clinopodium (Lamiaceae, Nepetoideae, Mentheae)
ARNALDOA
333
23 Enero - Junio,
(1):
i
I
6
C. Serrano etai:. Cuantificación de ácidos oleanólico, ursólico y rosmarínico en tres especies de Clinopodium
i
Recibido: 28 - 02 - 2016, aceptado 30 - 03 -2016; publicado junio 2016
Resumen
Se evaluó contenido de ácido oleanólico (AO), ácido ursólico (AU) ácido rosmarínico
el y
(AR) en 4 muestras de tres especies peruanas de Clinopodium (Lamiaceae); dos de estas muestras
de Puno corresponde a Clinopodium bolivianum una última muestra de Huánuco es Clinopodium
y
revolutum "Flor de Arena" ó "Té Indio". Se observó que en estas plantas a mayor contenido de ácidos
AR
triterpénicos (AO, AU), contenido de es menor viceversa. La especie más prometedora como
el y
AU
fuente de es Clinopodium revolutum.
Palabras clave: Clinopodium, Lamiaceae, ácidos triterpenicos, ácidos fenólicos, cromatografía.
was evaluated the contení of oleanolic acid (AO), ursolic acid (AU) and rosmarinic acid (AR)
It
two
in four samples of three Peruvian species of Clinopodium (Lamiaceae), samples are Clinopodium
sericeum from Amazonas department, other sample from Puno corresponds to Clinopodium
bolivianum and the from Huánuco Clinopodium revolutum "Flor de Arena or Té Indio". In those
last is
when AU)
plants triterpenic acids (AO, have higher contents, the rosmarinic acid (AR) contení
is
lower and viceversa. The more expectant plant like source of ursolic acid Clinopodium revolutum.
is
Keywords: Clinopodium, Lamiaceae, triterpenic acids, phenolics acids, chromatography.
Introducción
AR
presencia de sino también por contener
La Lamiaceae una
familia tiene
AO AU
como
ácidos triterpénicos
el y el y
mundial comprende más
distribución
y
usualmente también
aceite esencial (Viturro
de 7200 especies en aproximadamente 240
et 2000).
al.,
géneros los cuales están clasificados en 7
sub familias: Ajugoideae Kostel, Lamoideae El ácido ursólico (AU) y su isómero el
Harley, Nepetoideae (Dumort.) Luerss., ácido oleanólico (AO) pertenecen a una
de compuestos
categoría fitoquímicos
Prostantheroideae Luerss., Scutellaroideae
más
que llaman
Symphorematoideae se triterpenoides,
(Dumort.) Caruel,
son
específicamente ácidos
Dentro de triterpénicos.
Briq. Viticoideae Briq. estas
y
ampliamente en
Nepetoideae una de Estos están distribuidos
subfamilias, es las
han
más reino vegetal sido frecuentemente
claramente definidas, caracterizadas el y
como
mezclas
por polen trinucleado hexacolpado, aislados (fig.
el 1).
embrión de
invertido presencia ácido
y la
Liu publicó una revisión de
(1995)
rosmarínico. La sub familia Nepetoideae a
los estudios farmacológicos con estos
su vez 4 Ocimeae,
tiene tribus: Elsholtzieae,
triterpenoides, resaltándose su potencial
Hay un
Lavanduleae Mentheae. gran
y
en área de oncología en función a sus
el la
número
de géneros especies en tribu
y la
actividades antimutagénicas,
citotóxicas,
Mentheae que subdivide en sub
se tres
primer
antivirales antiinvasivas. El trabajo
y
Nepetinae Menthinae
tribus: Salviinae,
y
que registra contenido de estas sustancias
el
(Brauchler Precisamente,
et 2010). el
al.,
en plantas andinas es aquel publicado
género Clinopodium que
L. (antes Satureja L.)
Almanza Son
por
notables
los
et al. (2004).
ahora trataremos pertenece a la sub tribu AO AU
de
siguientes trabajos: Análisis
y
ARNALDOA
334 23 Enero - Junio, 201
):
(1
I
C. Serrano eta/:. Cuantificación de ácidos oleanólico, ursólico y rosmarínico en tres especies de Ch'nopodium
Fig. 2. El ácido rosmarínico (AR) (C18H1608,peso fórmula 360.31) pertenece a la categoría de los ácidos fenólicos.
ARNALDOA
23 Enero - Junio, 2016 335
(1):
I
6
Cuantificación de ácidos oleanólico, ursólico rosmarínico Clinopodium
?/: y
i
por hplc en "llantén" (Zacchigna (HUT!-58330).
et al, 2009), Fig. 4.
AO AU
efecto del en cáncer de colon
y (Li,
Clinopodium revolutum (Ruiz &Pav.)
AU
como
(Okabe
antichagásico
2002); et
Govaerts fué colectado en departamento
el
AU
como
antituberculoso
2002); (Pauli,
al.,
de Huánuco, cerro Sullcapunta, 3770 m, VII-
AU
en
(Jiménez-Arellanez,
2008), 2013);
(HUTI-58329).
2014, C. Serrano Fig.
s.n. 6.
de
cáncer próstata (Kassi
el et 2007);
al.,
AO AU
tamizaje cromatográfico de en Clinopodium sericeum (C. Presl ex Benth.)
y
AO
como
Govaerts en departamento
39 plantas se colectó
(Jáger et 2009); el
al.,
AO AU
en Amazonas,
antiurolitiásico (Vyas, alrededores del
2013); y sitio
AU
C
hepatitis (Li, 2013); en regeneración arqueológico de Kuelap, 3025 m, 11-2016,
AO
en
neural (Liu, 2013); esclerosis múltiple C. Serrano s.n. (HUTÍ-58331) (Fig. dpto.
5);
(Nieto, 2010). Recientemente, se ha dado ídem anterior, camino de las cataratas de
una
a conocer revisión de los posibles Gocta, 1970 m, 11-2016, C. Serrano (HUT!-
s.n.
AU
mecanismos de acción del responsables
58332). Fig.
3.
de (Hardeep
sus efectos terapéuticos
et
al.,
AO/AU
Análisis cualitativo hptlc del
2016).
Se trabajó con prederivatización con
un
El ácido rosmarínico (AR) es éster del
%
solución clorofórmica de iodo según
al 1 lo
ácido cafeico del ácido 3,4-diihidroxifenil
y
&
Nagy,
describe (Mucaji El extracto
2011).
han demostrado
láctico al cual se le varias
de de
etanólico planta i/o soluciones
la
actividades biológicas: Antitrombótico
AO/AU
en
estándar (de 2 a 4 pL) se aplica
(Zou antioxidante (Lamien-
et 1993),
al.,
G
Merck
cromatoplaca hptlc Kieselgel 60 de
Meda, (Swarup
antiinflamatorio
2010), etal.,
tamaño adecuado
sobre esta aplicación
y
antimutágeno
(Tavares
2007), et al, 2008),
volumen
de
se coloca igual la solución
de iodo 1%. Se abandona en oscuridad
al
(Swarup
(Tavares
antiviral
et 2008), et
al.,
por 10 minutos luego se desarrolla con
(Namasivayam y
anticancerígeno
2007),
al.,
MeOH
CHC13: La
placa revela
se
HIV-1 (Hooker (48:2).
et al, 2012) e incluso anti
Y por inmersión en ácido sulfúrico 10%
al y
también, recientemente
2001). se
et
al.,
de Los
aplicación calor. ácidos triterpénicos
ha estudiado mejor procedimiento de
el
AU como
AR muestran zonas de
AO, se color rojo.
extracción simultanea de
y
a partir de hojas de Rosmarinus AR
officinalis
Análisis cualitativo hptlc del
(Bernatoniene
et 2016).
al.,
como
en
Se
trabajó está descrito (Janicsák
En
presente comunicación, nuestro
la &
Mathé, de
1997): el extracto etanólico la
en
objetivo consiste cuantificar estas tres AR
planta o soluciones de estándar (de 2
i/
importantes sustancias bioactivas en
tres
Merck
a 4 gL) se aplican en cromatoplaca
peruanas género
especies del Clinopodium.
G
de tamaño adecuado
hptlc Kieselgel 60
y
con de
se desarrolla tolueno: acetato
etilo:
Métodos
Materiales
y
La
ácido fórmico placa se revela
(15:12:3).
Especies estudiadas
por pulverización con solución metanólica
1%
Clinopodium bolivianum (Benth.) Kuntze de difenilborinato de etanolamina al
nm &
se colectó en departamento de Puno, luz ultravioleta de 365 (Angenot
el y
localidad de Cucuraya a del lago Brasseur, 1986). El ácido rosmarínico se
orillas
como
3800 m, muestra zona
Titicaca, IX-2014, C. Serrano celeste brillante.
s.n.
ARNALDOA
336 23 Enero - Junio, 201
):
(1
I
ARNALDOA
337
23 Enero - Junio,
(1):
i
I
6
dinopodium
Cuantificación de ácidos oleanólico, ursólico rosmarínico
?/: y
i
ARNALDOA
338 23 Enero - Junio, 201
):
(1
I
dinopodium
C. Seri Cuantificaciónn de ácidos oleanólico, ursólico rosmarínico en tres especies de
y
/.:
AO/
lmL/min
Análisis cuantitativo dad-hplc de minutos a 30°C, detección
flujo: y
AU
nm.
a 210
AU
lg de vegetal pulverizado se extrae con Se trabajó por separado para luego
y
mL
EtOH
AO.
10 de x 10 minutos en ultrasonido para
x 10 veces.
AR
Análisis cuantitativo dad-hplc del
El extracto etanólico seco se desengrasa
mismo
Se de
utiliza el extracto etanólico
mL
con 10 de Eter de Petróleo x 5 minutos
como
planta tal está descrito para el caso de
AO/AU.
mL
en de
El residuo se redisuelve 25
El análisis cromatográfico se ejecutó
gm.
etanol se a 0.45
y filtra
según Venskutonis
et al. (2005):
El análisis cromatográfico se ejecutó
según
Srivastava
(2010):
Cromatógrafo uhplc Ultímate 3000 de
Thermoscientific con detección por arreglo
Cromatógrafo uhplc Ultímate 3000 de de diodos.
Thermoscientific con detección por arreglo
Estándar:
de
diodos.
AR
Se utilizó obtenido a partir
de Lepechinia meyenii (Walp.) Epling
AU
Se utilizó obtenido a partir de (Lamiaceae) procedente del Cusco, según
Clinopodium revolutum con pureza no menor método descrito por Serrano
(2012) y
AO
95%. obtuvo por de agua con pureza no menor
del El se extracción recristalizado
superficial de hojas de "olivo" Olea europaea del 96%. La sustancia se disuelve en etanol
(
mg/mL.
dando una
sin purificación cromatográfica para hacer concentración de 1
L.)
un no menos 95%
material de del de pureza.
Método: Columna Phenomenex RPC18
Para hplc estándares
el análisis estos se mm
de 250 x gm, elución en gradiente
4,6 5
y
mg/mL
preparan a una concentración de 1
%
con en agua
a) ácido acético al 2 b)
y
en
etanol.
tiempo de 35 minutos
acetonitrilo, análisis
Método: a 30°C, 0,3mL/min detección a 280
flujo: y
nm.
330
y
Columna Phenomenex RPC18
de 250
mm
x gm, elución con Gradiente:
4,6 5 isocrática
y
agua tiempo de 35
acetonitrilo: análisis
(8:2),
%
Tiempo
(minutos) b)
0 10
20
80
25 100
30
100
35 10
ARNALDOA
339
23 Enero - Junio,
(1):
i
I
ARNALDOA
340
23(1):
I
s oleanólico, ursólico rosmarínic
y
Jl
ARNALDOA
23 Enero - Junio,
(1): í
6
dinopodium
C. Serrano etal\ Cuantificación de ácidos oleanólico, ursólico y rosmarínico en tres especies de
ARNALDOA
342 23 Enero - Junio, 201
):
(1
I