CONTROL DE SUPERVIVENCIA/MUERTE CELULAR EN LA PATOLOGÍA DE ALZHEIMER ...

240 Pages·2009·3.97 MB·Spanish

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID
Facultad de Ciencias Biológicas
Dpto. de Bioquímica y Biología Molecular I

CONTROL DE SUPERVIVENCIA/MUERTE CELULAR
EN LA PATOLOGÍA DE ALZHEIMER. ESTUDIOS EN
CÉLULAS EXTRANEURALES

Memoria presentada por
Fernando Bartolomé Robledo
para optar al grado de doctor en Biología

Este trabajo ha sido realizado en el departamento de Fisiopatología Celular
y molecular del Centro de Investigaciones Biológicas (CSIC) y dirigido por
la Dra. Ángeles Martín Requero.

Vº Bº de la directora de tesis Vº Bº del interesado

Ángeles Martín Requero Fernando Bartolomé Robledo

Madrid, 2009
Portada: “Alzheimer”
Raquel Bartolomé Robledo
Acrílico sobre tabla
Esta tesis ha sido realizada en el “Departamento de Fisiopatología Celular y Molecular” del Centro
de Investigaciones Biológicas (CSIC) con recursos aportados por el Fondo de Investigaciones Sanitarias
(01/1194) yPI04/0312 del Ministerio de Sanidad y Consumo, por el Ministerio de Educación y Ciencia,
(SAF2007-62405), por Caja Segovia Obra Social y por la Fundación E. Rodríguez Pascual. Parte de esta
tesis ha sido publicada:

• Bartolome F, de Las Cuevas N, Munoz U, Bermejo F, Martin-Requero A (2007) Impaired
apoptosis in lymphoblasts from Alzheimer's disease patients: cross-talk of Ca2+/calmodulin and
ERK1/2 signaling pathways. Cell Mol Life Sci 64:1437-1448.
• Sala SG, Munoz U, Bartolome F, Bermejo F, Martin-Requero A (2008) HMG-CoA reductase
inhibitor simvastatin inhibits cell cycle progression at the G1/S checkpoint in immortalized
lymphocytes from Alzheimer's disease patients independently of cholesterol-lowering effects. J
Pharmacol Exp Ther 324:352-359.
• Bartolome F, Muñoz U, Esteras N, Esteban J, Bermejo-Pareja F, Martin-Requero A (2009)
Distinct regulation of cell cycle and survival in lymphocytes from patients with Alzheimer's
disease and amyotrophic lateral sclerosis. Int J Clin Exp Pathol 2:390-398.

Además, ha dado lugar a las siguientes comunicaciones en congresos nacionales e internacionales:

• U. Muñoz. N. Cuevas, F. Bartolomé A. Martín-Requero. "Enhanced proteasome-dependent
degradation of the CDK inhibitor p27kip1 in immortalized lymphocytes from Alzheimer’s
dementia patients". 30th FEBS Congress and 9th IUBMB Conference. Budapest.

• F. Bartolomé, N. de las Cuevas, U. Muñoz, A. Martín-Requero. "Papel de Ca2+/Calmodulina
en el control de supervivencia/muerte celular en linfocitos inmortalizados de pacientes de
Alzheimer". XXVIII Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular
(SEBBM). Zaragoza, 2005.

• Martín-Requero, F. Bartolomé, U. Muñoz, F. Bermejo. "Ca2+/Calmodulin-mediated
modulation of ERK1/2 activation regulates survival of lymphoblasts from patients with
Alzheimer dementia". 10th Internacional Conference on Alzheimer’s Disease and Related
Disorders (ICAD). Madrid, 2006.

• U. Muñoz. F. Bartolomé, S. Sala, A. Martín-Requero."Papel de la interacción entre las vías de
señalización Ca2+/Calmodulina, PI3K/Akt y ERK1/2 en el control de supervivencia/muerte
celular en linfoblastos de pacientes de Alzheimer". XXXI Congreso de la Sociedad Española de
Bioquímica y Biología Molecular (SEBBM). Elche (Alicante), 2006.

• Úrsula Muñoz, F. Bartolomé, F. Bermejo y A. Martín-Requero. “PPAR gamma-independent
inhibition of PI3K/Akt by 15-deoxy-delta 12,14-prostaglandin J2 increases p27kip1 protein levels
in immortalizd lymphocytes from Alzheimer’s disease patients”. III Meeting on the molecular
mechanisms of Neurodegeneration. Milán, 2007.

• F. Bartolomé, U. Muñoz, N. Esteras, J. Esteban, F. Bermejo-Pareja y A. Martín-Requero.
“Alteraciones en los mecanismos de regulación de supervivencia/muerte de células periféricas de
pacientes de alzhéimer y de esclerosis lateral amiotrófica”. XXIX Congreso de la Sociedad
Española de Bioquímica y Biología Molecular (SEBBM). Bilbao, 2008.

AGRADECI MIENTOS

Ha llegado el momento, por fin, de terminar esta etapa que empezó hace más de
4 años y que entonces no tenía muy claro en qué consistía. Pero ahora, con una
perspectiva hacia atrás, se ve diferente, como todas las cosas aprendidas después de
probar una vez. Por mi parte, creo que “misión cumplida”, aunque eso lo deben juzgar
también otras personas que he tenido cerca en este tiempo.

La que más huella deja sobre mí, aparte de marcarme el camino, es Ángeles, mi
directora de tesis. Gracias a tu decisión, perseverancia, esfuerzo y tiempo que has
dedicado conmigo, además de enseñarme a plantear preguntas y buscar respuestas.

A Ángeles le sigue Úrsula, mi compañera de laboratorio. Sin duda ella ha
contribuido enormemente a llevar a término este trabajo y sin su ayuda creo que aún no
habría acabado (y ya esta bien). De ella he aprendido prácticamente todo lo que sé del
trabajo del laboratorio. He tenido mucha suerte coincidiendo con Úrsula durante mi
estancia en el CIB. Nuestra relación personal ha sido parecida a la de un matrimonio de
años: sobre un escenario de mucho cariño, apoyo en todo y confidencias compartidas,
alguna que otra tormenta y después calma, siempre calma. De personas como Úrsula se
aprenden importantes valores; en mi caso, deseo que haya sido así.

El vacío de la marcha de Úrsula a Nueva York se ha llenado con la presencia de
nuevas compañeras de laboratorio. Primero llegó Noemí, con su risa contagiosa y
después, Carolina y Andrea. Además de ser buenas compañeras de trabajo, estar con
ellas y conocerlas ha enriquecido mi personalidad como lo hizo el paso de Marta y
Toño. También quiero dar las gracias a Nati por sus aportaciones y consejos a pesar del
corto tiempo que coincidimos y a Simone Sala que estuvo una temporada con nosotros
contribuyendo con su trabajo y contagiando su “chispa” italiana. En resumidas cuentas,
todo han sido ganancias en mi paso por el laboratorio de Ángeles.

Quiero agradecer el apoyo que me ha dado el resto del “grupo” desde el Dr.
Roberto Parrilla y la Dra. Matilde Sánchez por sus consejos, hasta Nora por su
complicidad, Elena, Tomás, Adela, Nanda, Darío, Adam y Ramón. También, al
laboratorio de Consuelo González: Dina, Isabel y Asier, una gran persona.

En el CIB, también hay ratos de diversión, no sólo para trabajar. En algún que
otro cumpleaños, celebraciones de tesis, despedidas y, por supuesto, la fiesta del CIB
con performance incluida, he pasado buenos momentos con Amaia, Carlos, Rodri,
David, Luisa…

Mi agradecimiento a los servicios técnicos del CIB, que sin su ayuda no habría
sido posible llevar a cabo gran parte de este trabajo: citometría de flujo, proteómica,
cultivos celulares, electrónica e instrumentación, compras, almacén y comedor.

No puedo pasar por alto la ayuda prestada por el Dr. Bermejo, jefe del Servicio
de Neurología del Hospital Doce de Octubre, que nos ha proporcionado con constancia
las muestras de sangre. Además, echaré de menos sus consejos y palabras de apoyo.
Pertenece también al hospital Eva Carro a la que también le doy las gracias por el
interés mostrado. También gracias a Lourdes, la enfermera a la que hemos incordiado
cada martes o jueves para hacer las extracciones de sangre.

Gracias al Departamento de Bioquímica y Biología Molecular de la Universidad
Complutense de Madrid y en especial al Dr. José Ignacio Rodríguez Crespo, por haber
aceptado la tutela de esta tesis.

Mi recuerdo también para Samuel González, Ana, Mª José, Mónica, Mayte y
Javier Lacadena, todos ellos profesores de mi etapa universitaria. En ella se forjaron
buenas amistades que no han dejado de estar pendientes de mi trabajo y de mi vida en
todo momento: Javier Casas, Jimmy, María Arranz, Gote, Elena Ruano, Silvia
Gutiérrez, Barri, Fuen…

Gracias también a los amigos “de toda la vida” o no relacionados con el mundo
de la biología que, sin tener muy claro lo que me traigo entre manos, siempre preguntan
y muestran interés por ello. Entre ellos Leticia, Silvia y Jorge, Juan, Cristi, Virginia,
Jaime, César, Esther, Fonta y Santiago. Por la misma razón, debo dar las gracias a Jesús
y Mª Carmen, Jesús (el niño) y, muy especialmente, a Inma y Agus.

A toda mi familia y, en particular, a los culpables de traerme al mundo, mis
padres que, aunque al principio no participaran en mi decisión de trabajar en este
mundo, sé que ahora me apoyan plenamente (gracias a los dos).

A las dos personas que, junto a mí forman los lados del triángulo Bartolomé-
Robledo, mis hermanos, Darío y Raquel. A veces me hacéis ver lo que viendo no veo,
mostrándome otra visión de las cosas distinta a la mía. Vuestro aliento siempre impide
que me venga abajo.

Finalmente, a Carmen, quien siempre ha estado a mi lado, ayudándome en lo
que ha podido y con la que comparto todos los días. A ella le agradezco su fidelidad,
confianza, sinceridad y cariño.

¡Más de cuatro años! ¡Qué largos iban a ser entonces y qué poco han durado
ahora!

Madrid, junio de 2009

“Saber es relativamente fácil. Querer y obrar de acuerdo a lo
que uno quisiera es siempre más duro”
Aldoux Huxley

“Si buscas la verdad, prepárate para lo inesperado, pues es
difícil de encontrar y sorprendente cuando la encuentras”
Heráclito de Éfeso

“Si sale, sale. Si no sale, hay que volver a empezar. Todo lo
demás es fantasía”
Eduard Manet