Katholieke Universiteit Leuven Faculteit Bio-ingenieurswetenschappen DISSERTATIONES DE AGRICULTURA Doctoraatsproefschrift nr. 743 aan de faculteit Bio-ingenieurswetenschappen van de K.U.Leuven Comprehensive evaluation of the acoustic impulse-response of apples as a measure of fruit quality Promotor: Prof. J. De Baerdemaeker, K.U.Leuven Proefschrift voorgedragen tot het behalen van de graad van Leden van de examencommissie: Doctor in de Prof. G. Volckaert, voorzitter Bio-ingenieurswetenschappen Prof. B. Nicolaï, K.U.Leuven Prof. J. Keulemans, K.U.Leuven door Prof. N. De Belie, UGent Dr. B. Herold, ATB, Potsdam, Duitsland Sandra LANDAHL Dr. ir. B. De Ketelaere, K.U.Leuven JUNI 2007 i Nederlandse samenvatting In dit doctoraat wordt de akoestische impuls-responstechniek voorgesteld als middel voor het evalueren van appelkwaliteit. Fysiologische veranderingen in de appel werden bestudeerd en gerelateerd aan de akoestische techniek, om de interactie tussen de evolutie van de vrucht en de meettechniek te begrijpen. In de akoestische impuls-responstechniek wordt een vrucht met een hamertje aangeslagen en trilt dan aan zijn resonantiefrequentie. De trillende vrucht produceert geluidsgolven die worden opgenomen en geanalyseerd. Deze snelle methode levert een gemiddelde waarde voor de vrucht: de stijfheid. Experimenten tonen aan dat de akoestische impuls-responstechniek een waardevolle, objectieve methode is voor evaluatie van de veranderende stijfheid tijdens bewaring. Een beter begrip van deze niet-destructieve techniek is evenwel nodig. De stijfheid is strikt gezien een maat voor elasticiteit. Consumenten zouden dit als een eigenschap van textuur bekijken, wanneer ze de kwaliteit van fruit en groenten beoordelen. De rijpheid van een vrucht hangt af van zijn fysiologische ontwikkeling. Om de rijpheid te bepalen, worden gewoonlijk fysische eigenschappen zoals hardheid gemeten in de commerciële omgeving. Daarom werd de stijfheid met de hardheid vergeleken in dit werk. Een prototype werd gebouwd om niet-getraind personeel en kwaliteitsinspecteurs de rijpheid van appels te laten meten op een objectieve manier. De prestaties van dit toestel werden bestudeerd als een mogelijke commerciële toepassing van de techniek. Een andere toepassing van de akoestische impuls-responstechniek zou de detectie van interne eigenschappen van een vrucht kunnen zijn. Hiermee zou kwaliteitsopvolging van vruchten kunnen verbeterd worden. Om dit verder te onderzoeken, werd een experiment opgezet waarbij interne warmteschade in appels met deze techniek werd gemeten. De schade kon aangetoond worden door de sterk verlaagde stijfheid, hoewel de schade niet zichtbaar was aan de buitenkant van de vrucht. In een volgende stap werd informatie verzameld over de mogelijkheden van de meettechniek voor het bepalen van rijpheid van de vruchten voor de oogst. Deze testen werden over verschillende jaren herhaald, om seizoensgebonden effecten in rekening te kunnen brengen. Vroegere studies toonden aan dat de vorm van de appels effect heeft op de akoestische responsmeting. Er werden dan ook verschillende appelvariëteiten met verschillende vormen opgenomen in de experimenten. Indien de evolutie van de stijfheid tijdens het rijpen een duidelijke trend vertoont, dan zou deze factor als maat voor rijpheid kunnen gebruikt worden. De indexen voor rijpheid zijn nodig om de geschiktheid van geoogst fruit aan te geven, voor de consument of voor bewaring. Anders dan verwacht, kon geen duidelijke trend in de stijfheid aangetoond worden bij al de geteste appelvariëteiten: Stijfheid ontwikkelde minder voorspelbaar of bleef zelfs constant tijdens het rijpen. ii Nederlandse samenvatting Het is al langer geweten dat de elastische eigenschappen van een weefsel bepaald worden door de waterstatus en door de mechanische eigenschappen van de celwand. Om het onverwachte resultaat te kunnen evalueren is het aangetoond de interactie tussen de fysische en fysiologische eigenschappen van de appel te bestuderen. De fysiologische eigenschap 'waterstatus' werd vergeleken met verschillende elasticiteitsmetingen van de modelvrucht radijs. De veranderingen op korte termijn in niet-gunstige bewaaromstandigheden waren het gevolg van een daling in celwaterpotentiaal. Die veranderingen waren voornamelijk te wijten aan een vermindering in watervolume, terwijl de celwandeigenschappen onveranderd bleven. De onderlinge afhankelijkheid van een grote verscheidenheid aan parameters van vruchtkwaliteit werden herhaaldelijk gemeten tijdens snelle uitdroging bij middel van verschillende niet-destructieve technieken. Het werd duidelijk dat de quasi-statisch gemeten elasticiteit een duidelijker relatie had tot de waterpotentiaal van de vrucht, dan de dynamisch gemeten stijfheid, die op zichzelf een waardevolle indicator is van de verandering in waterinhoud in de vrucht. De resultaten toonden aan dat de stijfheid weinig gerelateerd was met de korte-termijn veranderingen in de hardheid van de vrucht, minder dan de quasi-statisch gemeten elasticiteit. Een combinatie van beide eigenschappen zou daarom een betere indicatie geven van de status van de vrucht. De mogelijkheid dat de stijfheid meer gerelateerd zou zijn aan de veranderingen in celwand, werd in eerste instantie geëvalueerd. Een snelle meetmethode werd gezocht voor het aangeven van veranderingen op het niveau van de celwand. De dynamica van de veranderingen in de celwand bij een rijpende vrucht worden mogelijk bepaald door de lokale zuurtegraad. De veranderingen van de apoplastische zuurtegraad heeft effect op de enzymes die verbonden zijn aan de celwand. De apoplastische zuurtegraad daalt bij het rijpen van tomaat, perzik en abrikoos. Het is mogelijk dat de appel zachter wordt onder invloed van de veranderingen in de apoplastische zuurtegraad. Een methode om apoplastische vloeistof te oogsten werd beschreven. Er is evenwel verder biochemisch onderzoek nodig om de rol van de apoplastische zuurtegraad bij het zachter worden van de vrucht te bevestigen en om de zuiverheid van de geoogste vloeistof te verzekeren. Een relatie tussen apoplastische zuurtegraad en de stijfheid van de vrucht leek mogelijk. Multi-sensortoestellen zouden fruitinspectoren kunnen bijstaan en de sorteermachines verbeteren zodat vruchten van meer uniforme kwaliteit aan de consument aangeboden worden. Vroegere studies toonden aan dat fusie van verschillende technieken tot betere resultaten leiden, en voorheen onbekende informatie leveren, b. v. de klassering van cultivars. De combinatie van spectrale techniek en akoestische impuls-responstechniek heeft potentieel om het voorspellen van de hardheid voor de oogst en in bewaring te verbeteren. iii Abstract The acoustic impulse-response technique is a means to evaluate apple quality. In this work the effect of physiological changes in the fruit on the physical measurements of fruit quality are examined. In the acoustic impulse-response technique the fruit is mechanically excited by an impact force and starts to vibrate at its own natural frequency. The resulting sound waves are then recorded and analysed. It is a fast method and yields a produce- averaged value: the stiffness factor. Experiments confirmed that the acoustic impulse-response technique is a valuable objective method for evaluation of the changes of firmness during storage. The stiffness factor is strictly speaking a measure for elasticity. It could be perceived by consumers of fruit and vegetables as an indicator of texture. The maturity of the fruit depends on its physiological development. To determine the maturity usually physical properties, e.g. firmness measured means of penetrometer, are recorded in the commercial environment. Therefore the stiffness is compared to firmness throughout this thesis. A prototype was built to enable unskilled workers and quality inspectors to measure ripeness of apples objectively. The performance of this device was examined as a possible commercial application of the technique. Another application for the acoustic impulse-response technique could be the detection of internal properties of the fruit. This could enhance fruit quality monitoring. An experiment is presented, where the method is used to detect internal heat damage in apples. It is shown that it was possible to detect this damage, which is invisible on the outside of the apple, by drastically lowered values of the stiffness factor. As a next step, information about the technique's power to examine fruit maturation before harvest was collected. This was done over a number of years to take seasonal changes into account. Various varieties were examined to obtain stiffness values of apples with different shapes, because former studies showed that the shape of the apples has an influence on the acoustic impulse-response test. If the development of the stiffness factor during maturing would show a clear trend, then there could be scope to use the value as a maturity index. Maturity indices can indicate the acceptability of freshly harvested fruit for the consumer and the storability. The results revealed, other than first expected, that no clear trend of the stiffness development could be found in all examined apple varieties: Stiffness develops less predictably or even stays constant during maturation. iv Abstract It is known that water status and cell wall mechanical parameters determine tissue elastic properties. In order to understand the unexpected results it is necessary to examine the interaction between the physical and the physiological properties of the apple. The physiological water status was compared to various elasticity measurements on the model produce radish. Short-term texture changes under unfavourable storage conditions result from a decline in cell water potential. Those changes are mainly due to a decline in water volume, while physical cell wall properties may remain unchanged. The interdependence of a large number of parameters of produce quality were repeatedly examined by means of various non- destructive instrumental techniques during rapid desiccation. It becomes apparent that the elasticity measured in a quasi-static way has a stronger relation to the produce’s water potential than the stiffness measured dynamically, which itself is a valuable indicator for the water content change in the produce. The results revealed that stiffness showed very low relationship with short-term changes of product rigidity, less than the elasticity measured in a quasi-static way. A combination of both properties may therefore be a more appropriate indication of the produce condition. To start an evaluation of the possibility that the stiffness factor is more related to cell wall changes, a quick method was sought to indicate changes at the cell wall level. The dynamics of changes in the cell wall of a ripening fruit are possibly controlled by local pH. The changes of apoplastic pH have impact on the cell wall-associated enzymes. The pH of the apoplast declines during ripening in tomato, peach and apricot fruit. It is possible in apple that changes in apoplastic pH induce softening. A method is described, to collect apoplastic fluid. However, further biochemical research is needed to confirm a role of apoplastic pH in softening and to confirm the absence of contaminants in the collected fluid. A relation between apoplastic pH and stiffness seemed possible. Multi-sensor devices could support fruit inspectors and could improve machine sorting to provide more homogenous fruit packages to consumers. Former studies have shown that fusion of different techniques improve results and offer former hidden information, e.g. classify cultivars. A combination of the spectral technique with the acoustic impulse-response technique seems suitable to enhance prediction of firmness before harvest and in storage. Table of contents v NEDERLANDSE SAMENVATTING i ABSTRACT iii TABLE OF CONTENTS v CHAPTER 1 INTRODUCTION 1 CHAPTER 2 NON-DESTRUCTIVE MEASUREMENT OF APPLE STIFFNESS USING A PORTABLE DEVICE 9 2.1 INTRODUCTION 9 2.2 MATERIALS AND METHODS 13 2.2.1 The importance of the mass measurement 13 2.2.2 Measurement set-ups for the acoustic impulse-response 14 2.2.3 Performance of the portable prototype "Glove" 23 2.2.4 Influence of grip force on frequency measurement on apples 26 2.3 RESULTS 29 2.3.1 The effect of mass on the acoustic impulse-response measurement on peaches 29 2.3.2 The apple quality 30 2.3.3 The effect of mass on the acoustic impulse-response measurement on apples 32 2.3.4 Performance of the portable prototype "Glove" 34 2.3.5 Influence of grip force on frequency measurement on apples 39 2.4 DISCUSSIONS 44 2.4.1 The importance of the mass measurement 44 2.4.2 Performance of the portable prototype "Glove" 44 2.4.3 Influence of grip force on frequency measurement on apples 45 2.5 CONCLUSIONS 46 CHAPTER 3 NON-DESTRUCTIVE MEASUREMENT OF APPLE STIFFNESS OF THERMALLY DAMAGED APPLES 47 3.1 INTRODUCTION 47 3.2 MATERIALS AND METHODS 48 3.3 RESULTS 49 3.4 DISCUSSION 52 3.5 CONCLUSIONS 53 CHAPTER 4 THE STIFFNESS DEVELOPMENT OF VARIOUS APPLE VARIETIES DURING MATURATION 54 4.1 INTRODUCTION 54 4.2 MATERIALS AND METHODS 56 4.2.1 Material 56 4.2.2 Software to process impulse-response 57 4.2.3 Sequence of reference tests 57 4.2.4 Statistics 58 4.3 RESULTS 58 4.3.1 Development of stiffness of different apple varieties 59 4.3.2 Development of OHD parameters 60 4.3.3 Relation between OHD parameters and stiffness 66 4.4 DISCUSSION 72 4.4.1 Mass development during maturation 72 4.4.2 Firmness development during maturation 72 4.4.3 Stiffness development during maturation 73 4.4.4 Stiffness as maturity indicator 76 4.5 CONCLUSIONS 77 vi Table of contents CHAPTER 5 ACOUSTIC IMPULSE-RESPONSE OF APPLES MEASURED ON AND OFF THE TREE 78 5.1 INTRODUCTION 78 5.2 MATERIALS AND METHODS 79 5.2.1 Materials 79 5.2.2 Separate test for frequency change on and off the tree 80 5.2.3 Methods 80 5.3 RESULTS 84 5.3.2 Separate test for frequency change on and off the tree 85 5.3.3 Development of apples measured by means of reference tests 87 5.3.4 Acoustic impulse-response of apples measured repeatedly on the tree 91 5.3.5 Stiffness of apples after harvest 94 5.3.6 Comparison of acoustic impulse-response of apples measured on and off the tree 96 5.3.7 Development of the water potential of the apple tissue 97 5.3.8 Relation between stiffness and destructive tests 98 5.4 DISCUSSION 107 5.4.1 Development of apples measured by means of reference tests 107 5.4.2 Acoustic impulse-response of apples measured repeatedly on the tree 108 5.4.3 Stiffness of apples after harvest 109 5.4.4 Comparison of acoustic impulse-response of apples measured on and off the tree 109 5.4.5 Development of the water potential of the apple tissue 110 5.4.6 Relation between stiffness and destructive tests 110 5.5 CONCLUSIONS 111 CHAPTER 6 INTERACTIONS BETWEEN WATER STATUS AND TEXTURE 112 6.1 INTRODUCTION 112 6.2 MATERIALS AND METHODS 114 6.2.1 Overview 114 6.2.2 Stiffness 115 6.2.3 Apparent elastic modulus 115 6.2.4 Volumetric elastic modulus 116 6.2.5 Data description 117 6.3 RESULTS 118 6.3.1 Tuber characteristics 118 6.3.2 Tuber changes in time 119 6.3.3 Interaction between radish water status and texture 123 6.4 DISCUSSION 132 6.4.1 Data description 132 6.4.2 Interaction between radish water status and texture 132 6.5 CONCLUSIONS 135 CHAPTER 7 COLLECTION OF APOPLASTIC FLUID FROM DEVELOPING APPLES USING A SCHOLANDER PRESSURE BOMB 137 7.1 INTRODUCTION 137 7.2 METHODS 140 7.2.1 Material 140 7.2.2 Weather 141 7.2.3 Stiffness 141 7.2.4 Red edge 142 Table of contents vii 7.2.5 Firmness and SSC measurement 143 7.2.6 Water potential measurement during storage 143 7.2.7 Tissue photos 144 7.2.8 Apoplastic pH 145 7.3 RESULTS 150 7.3.1 Tissue structure 150 7.3.2 Picking-maturity and ripeness characteristics 157 7.4 DISCUSSION 161 7.4.1 Apple development 161 7.4.2 Softening detection with the acoustic technique 162 7.5 CONCLUSION 163 CHAPTER 8 COMBINING SENSORS FOR DETECTING APPLE QUALITY ATTRIBUTES 165 8.1 INTRODUCTION 165 8.2 METHODS 167 8.2.1 Optical reflection spectra collection and analysis 167 8.2.2 Wavelengths of principal absorption bands for common constituents of biological material 171 8.3 RESULTS 172 8.3.1 Overview non-spectral data 174 8.3.2 Prediction of firmness and SSC by combining data from non-spectral techniques 177 8.3.3 Vis and NIR reflectance 178 8.3.4 Visible and NIR reflectance predicting firmness 180 8.3.5 Influence of measurement day 186 8.4 DISCUSSION 188 8.4.1 Prediction of firmness and SSC by combining data from non-spectral techniques 189 8.4.2 Wavelength analysis 189 8.4.3 Prediction of firmness by combining non-destructive techniques 191 8.5 CONCLUSIONS 193 GENERAL CONCLUSIONS AND FUTURE OUTLOOK 195 BIBLIOGRAPHY 199 LIST OF PUBLICATIONS 203 ABBREVIATIONS 205 ACKNOWLEDGEMENTS 207
Description: