i Arnaldoa 20 69 82 2013 (1): - pp. Argemone (Papaveraceae) subfusiformis de etnomedico: especie nativa su interes anatomia en de aplicacion control calidad y el Argemone subfusiformis (Papaveraceae) native anatomy species ethnomedical and of interest: its application the quality control in H Natalia Cuellar i' Maria Claudia Lujan Catedra de Farmacia, Area Farmacobotanica (FCQ). Institute Multidisciplinario de Biologfa Vegetal (IMBIV-CONICET). Universidad 5000 ARGENTINA. Nacional de Cordoba. 495. Cordoba. C. C. * Maria Cosa Teresa Catedra de Morfologia Vegetal (FCEFyN). Institute Multidisciplinario de Biologfa Vegetal (IMBIV-CONICET). Universidad Nacional de Cordoba. C. 5000 ARGENTINA. 495. Cordoba. [email protected] C. ARNALDO/ Enero-Junio 2013 69 20(1) I 3 N. Cuellar etal- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusiformis. Palabras clave: hierba medicinal, anatomia, laticiferos. Abstract Argemone subfusiformis Q. B. Ownbey, a species that has numerous medicinal properties. There is unknown are few contributions on the anatomy of the vegetative organs and histology of the is flower and the fruit. In order to achieve a correct identification of A. subfusiformis'and provide useful we anatomical evidence for adequate quality control, examined the internal structure of leaves, stems, roots, flowers and fruits. Quality control and hygienic-sanitary botanical samples from Argemone es un genero de la familia Lujan, 2002), posee importantes cualidades medicinales tradicionalmente reconocidas Papaveraceae constituido por 28 especies, de America en (Marzocca, 1993; Martinez, 2010). Las hojas nativas (Stermitz etal, 1969); Argentina habitan 3 especies y dos de ellas y su latex presentan propiedades cicatrizantes, en de dermopaticas, oftaimicas y antiulcerantes. Provincia Cordoba: A. la subfusiformis Ownbey Sus son purgantes G. B. y A. hunnemannh''Otto et Dietr raices y emeticas; la flor propiedades emolientes (Ownbey, Barboza tiene pectorales; 1961; etal, 2006). y como de empleada la infusion petalos es Argemone llamada "cardo subfusiformis antiasmatica digestiva y las semillas y santo" o "cardo amarillo" se distribuye como usan se febrifugas y diaforeticas Chubut desde hasta preferentemente Jujuy; (Barboza Se atribuyen tambien etal, 2009). le en suelos sueltos y arenosos (Lujan, 2002), y actividades biologicas; la parte aerea se como en ocasiones comporta invasora de se como emplea hipotensora, antiarritmica campos de cultivos. cardiaca, fungicida, antimalarica, anti- HIV Se caracteriza por tener abundante latex, e insecticida y las flores, frutos y el el cual es rico en polisacaridos polifenoles aceite de las semillas presentan actividad y (Chang et al, 2003). Se han detectado antibacteriana (Lujan, 2002; Barboza et al, & alcaloides altamente toxicos (Soraru 2009). & Bandoni, Ragonese Milano, 1978; 1984), En ultimas decadas incremento las se & aminoacidos (Dinda Bandyopadhyay, uso de productos naturales con el & 1986), fenoles (Harborne Williams, 1983) fines terapeuticos (Balick et al, 2000). acidos grasos (Shaukat y etal, 2002). muchas embargo, de Sin plantas las Si bien toda la planta es toxica (Soraru de uso medicinal popular, carecen & & Bandoni, 1978; Ragonese Milano, 1984; de estudios botanicos, bioqmmicos y A ARNALDO 70 20 Enero Junio 201 - (1 ) I N. Cuellar etai- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusiformis. farmacologicos (Del Vitto et al, 1997), sufriendo sustituciones, falsificaciones metodos Material y Cuando (Arenas, 2007). se analizan plantas Materiales: Los materiales utilizados un etnomedicinales que presentan amplio ARGENTINA. proceden de Prov. Cordoba: pueden rango de distribution geografica, La Dpto. Colon, Calera. Cuellar 1 y 03- 2, presentar variaciones entre poblaciones San XII-2010. Prov. Dpto. Antonio, Jujuy: para distintos caracteres fenotipicos San Antonio. Cuellar 18-1-2011; Cuellar 3, con relacionados diferencias geograficas 20-01-2011. Los ejemplares de herbario 4, como y ambientales, temperatura, luz, encuentran depositados en Museo se el condiciones hidricas, entre otras (Diaz et aL, Botanico de Cordoba (CORD). pueden 2009); dichas diferencias ocasionar una cuando determination erronea, se lleva perteneciente a Provincia fitogeografica la una a cabo control de calidad de hierba el msm, de Las Yungas, a 1345 con clima medicinal. templado, de subtropical precipitaciones y mm Debido que en muchas a ocasiones unos 900 anuales (Braun Wilke et al, es dificil obtener muestras comerciales y localidad de La Calera perteneciente 2001), completas, resulta identificar Chaco dificil el a Provincia fitogeografica del la material vegetal, especialmente cuando se Serrano, a 450 msm, con clima continental y de presenta esteril (privado flor y fruto); precipitaciones que oscilan entre los 400-600 mm donde anatomicos es alii los estudios e anuales (Vervost et al, 1981). una histologicos constituyen herramienta Metodos: Se realizaron preparados para de o eficaz la identification la las permanentes de cortes tranversales y & especies (Lujan Barboza, 2008). por longitudinales hojas, tallos, flores Teniendo en cuenta que son escasas o en en antesis y frutos distintos estadios fragmentarias contribuciones sobre las la de desarrollo. El material previamente FAA anatomia de los organos vegetativos (Lujan, en fue deshidratado en fijado serie 2002) y se carecen de datos anotomicos de de alcohol etilico-xilol y se lo incluyo en en La la flor y el fruto esta especie. presente histowax (Conn Se efectuaron et al, 1960). investigation propone, 1: Ampliar el cortes de 10 a 15 \im de espesor, los que se conocimiento sobre anatomia vegetativa, con la colorearon azul astral y fucsina basica y e indagar en las particularidades de la flor se montaron con balsamo de Canada (Kraus y fruto en dos poblaciones que crecen en Los por 1998). cortes raiz se realizaron eta/., mano Provincias fitogeograficas diferentes (Las con a alzada, se tineron azul astral y Yungas Chaco y Serrano) y Evaluar, a montaron en 2: safranina y se glicerina diluida un de adecuado de traves control calidad, 50%. Para estudio de epidermis al el la foliar la autenticidad y grado de pureza de se tomaron de cada poblacion 40 hojas muestras comerciales de A. subfusiformis adultas y de cada hoja se analizaron 10 mm procedentes de dos localidades distantes. campos por cara de 0,625 2 Se realizaron . Los datos obtenidos podran contribuir extendidos mediante tecnica de Peeling la al conocimiento de especies nativas de (D'Ambrogio de Argiieso, 1986) y se valoro importancia medicinal, proporcionar datos de estomas de tipo y frecuencia y celulas el de taxonomico de en interes y aplicacion epidermicas propiamente dichas. El indice de control calidad botanico e higienico- el A ARNALDO 20 Enero - Junio 201 3 71 (1 ) I 3 Cuellar etal.- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusrformis. I. determinando comerciales obtenidas, asi legitimidad de droga comercial. Se la la la = frecuencia de estomas /frecuencia I.E como o Por autentica clasifico falsificada. de estomas + frecuencia de celulas ormacion otro lado, se analizo la inf presente epidermicas x 100 (Stace, 1965). en envase de cada muestra rotulo del el Las epidermicas fueron variables comercial. comparadas estadisticamente entre caras las Para determinar calidad de la las de cada adaxial y abaxial poblacion, y entre muestras comerciales se siguio en todos Mediante programa poblaciones. las el metodologia basada en casos los la los determinaron "Infostat" (version se 1.0) la lineamientos de muestreo de Farmacopea la media y desvio estandar para cada una, a Argentina 7 edicion sugeridas y las (2003) discriminando caras Para aquellas las foliares. OMS por la (1992). que cumplieron supuestos ormadas los (transf o no), fueron analizadas utilizando estadistica Resultados ANOVA, & parametria, (Musicante Galetto, Las poblaciones de A. subfusiformis 2008), a fin de determinar existen diferencias si procedentes de las Provincias de Jujuy y significativas entre ellas. Cordoba presentan caracteristicas similares Los preparados observaron con se como tanto en su estructura vegetativa microscopio optico y se fotografiaron con camara Nikon Coolpix 500. Las la hoja: celulas Se llevo a cabo el control de calidad botanico epidermicas propiamente dichas en e higienico-sanitario de 12 muestras, 6 por son de vista superficial isodiametricas y cada de San Salvador localidad (Prov. Jujuy: contornos poligonales. Los estomas de tipo de Jujuy y Prov. de Cordoba: Cordoba), ambas anomocitico se distribuyen en caras procedentes de diferentes herboristerias y de de forma la hoja y las celulas oclusivas puestos ambulantes en mercados; mismas las levemente arrinonada estan rodeadas por 4 nombre fueron por vernaculo solicitadas el 6 5 celulas epidermicas propiamente dichas mas frecuente. (Fig.lAyB). Para control sanitario se llevo a cabo el En seccion transversal, epidermis la un peso cantidad analisis cuantitativo, se la con de paredes es unistratificada, celulas de material extrano en 40 g de cada muestra engrosadas en sentido radial tangencial y y de acuerdo con los resultados obtenidos externo, la cuticula es lisa ligeramente y como cada muestra altamente se caracterizo engrosada en ambas estomas caras y los 90% pura (mas de del material libre mismo estan ubicados nivel que al las contaminante), regularmente pura (70- modo emergencias de otras celulas; las a % 90 de material contaminante) libre y espinas constan de epidermis y estratos % pura (menos deficientemente del 70 libre subepidermicos erencian en borde y se dif el de Ademas, material contaminante). se de hoja y venas mayores. El mesofilo es la un determino mediante analisis cualitativo de parenquima en estructura isolateral; el material contaminante organico e el empalizada presentan 2 estratos celulares inorganico. Para control botanico, el En en en el epifilo y 1 el hipofilo (Fig. 1 D). la confrontaron morfo- se los caracteres vena media hay cuatro o haces vasculares seis A ARNALDO 72 20 Enero Junio 201 - (1 ) I A ARNALDO 73 20 Enero - Junio 201 3 (1 ) I 3 Cuellar etal- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusiformis. I. rodeados por una vaina colaterales (Fig. 1 C), de celulas parenquimaticas y asociados a las (Fig. 2 B-E G). El androceo tiene de 50 y celulas del floema se diferencian numerosos a 60 estambres de diferentes longitudes. laticlferos articulados anastomosados. Los El gineceo es tetracarpelar (Fig. 2 F), de hacecillos menores del mesofilo estan poco placentacion parietal, la epidermis externa desarrollados y carecen de laticlferos. del carpelo presenta estomas dispersos. Entre ambas epidermis hay unos 12 estratos Anatomia En del seccion tallo: parenquimaticos con escasos espacios de transversal es circular y esta provisto de intercelulares, las celulas los estratos La epidermis espinas. es unistratificada, mas internos almacenan almidon. El estilo con levemente isodiametricas celulas muy es abierto corto, sus estratos internos y engrosadas en sentido tangencial y cuticula presentan con contenido denso celulas y los La delgada. corteza tiene dos estratos lisa y haces vasculares se disponen formando dos de colenquima lagunar subepidermicos estigma lobulado anillos concentricos. El es y entre 9-14 estratos de parenquima, con de contornos irregulares que dejan celulas con relacionados recepcion pluricelulares, la escasos espacios intercelulares. El sistema de los granos de polen (Fig 2 H). forma una vascular eustela (Fig. 1 E), los hacecillos colaterales estan separados unos Ontogenia y anatomia del fruto: un de otros por tejido parenquimatico Durante su desarrollo y hasta estadios un numero presentan casquete de madurez, de interfascicular y la el estratos i fibras hacia ambos polos, xilema forma del pericarpo el V una asociados floema encuentran modificaciones en pared contenido y al se la y numerosos laticlferos, igual que en la hoja de sus celulas. Luego de la fecundacion cm y en todos los organos analizados. La cuando fruto tiene unos 2 de long. el medula es conspicua presenta celulas 3 A), epidermis externa presenta (Fig. la y parenquimaticas voluminosas. celulas pequenas e isodiametricas 3 (Fig. con paredes tangenciales ligeramente B), engrosadas y estomas dispersos; junto con subepidermicos forma estratos las presentan peridermis con transversal, En emergencias epidermis espinescentes. la numerosos estratos de suber y 2 6 3 de son comprimidas de interna las celulas y Los felodermis (Fig. 1 G). tejidos vasculares en paredes engrosadas sentido tangencial homogeneos floema xilema tienen radios y Los medios y anticlinal (Fig. 3 C). estratos en pluriseriados, y centro del cilindro y el varlan entre 17 a sus celulas son 21, central se observan 2 polos de protoxilema mas isodiametricas y los internos contienen por lo que la estructura primaria es diarca. granos de almidon. Los estan laticiferos Los laticlferos se encuentran dispersos en la siempre asociados floema de haces al los peridermis y el floema (Fig. 1 F y H). D vasculares (Fig 3 F) y se los observa en y Anatomia de La la flor: flor se estudio todos los estadios del desarrollo. en cortes longitudinales y transversales cm En de unos de los frutos 3 long. (Fig. A en todas piezas (Fig.2 y F); las florales la 3 E), las celulas de la epidermis externa epidermis es unistratificada y se diferencian aumentan su tamano en sentido anticlinal y Los laticlferos asociados al floema. estratos en epidermis interna se alargan en sentido la medios de los sepalos petalos constan y tangencial e incrementan grosor de todas el A ARNALDO 74 20 Enero Junio 201 - (1 ) I A ARNALDO 20 Enero - Junio 201 3 75 (1 ) I 3 N. Cuellar etal- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusiformis. sus paredes. Los estratos intermedios consume por completo. acumulan tornan grosor, se irregulares y Analisis estadistico. El analisis abundante almidon. de epidermicas estadistico las variables Proximos a la madurez, frutos de foliares puso de manifiesto lo siguiente: hay cm unos 4 de long., en la region apical, las diferencias significativas en la frecuencia celulas de epidermis interna acumulan de estomas y de celulas epidermicas la En taninos lignifican sus paredes. su propiamente dichas entre las caras foliares y media ambas una misma portion y basal, epidermis de poblacion. Las 2 poblaciones y parenquima del mesofilo incrementan su se diferenciaron significativamente en el tamano y grosor de sus paredes celulares frecuencia de celulas epidermicas el la y los estratos subepidermicos (externos e propiamente dichas e mdice estomatico. internos) comienzan a consumirse. Los resultados de los analisis de la varianza (ANOVA) resumen en Tabla se la 1. maduro una El fruto es capsula espinosa ambas De con dehiscencia presenta Control de calidad botanico: apical, las epidermis completamente 12 muestras analizadas por cada lignificadas (seis y comprimen 100% expenden los estratos intermedios se localidad), se bajo y el G acumulan abundantes taninos 3 H). nombre vulgar de "car do santo" (Fig. y el y resultaron autenticas; las estructuras Tabla 1. Resultados del analisis de varianza (ANOVA) paratres variables epidermicas, con un (p< 0,05) JUJUr CORDOBA Mas Caraadaxial Caraabaiial Cara adaiial Cara afaaaial ± ± 62,96 16,62 b ± tt.SU flAB ± ' 6,90 a bB,3b ,',66 a r.i !:: 1 fa poblacion; diferencias b: estadisiicamenie signif icativa entre poblaciones. numerosas en halladas (hojas, tallo, flores, frutos y irregularidades el rotulado: semillas) corresponden a A. subfusiformis. 16,67% se expenden sin rotular y sin el Las hojas se reconocen por sus margenes ningun tipo de information, solo 16,67% el provistos de espinas y el tallo, cuando esta presentan fecha de envasado y vencimiento; seco presenta estriaciones evidentes; fruto 66,66% restante se rotula unicamente por el el numerosas nombre y la flor (gineceo) presentan su vulgar (Tabla 2). venation de espinas; la los petalos secos Control higienico-sanitario: El total se torna rojiza; las semillas se reconocen de muestras analizadas resultaron las por su superficie externa alveolada. Sus contaminadas con materia organica estar estructuras anatomicas coincidieron con vegetal y animal y diversos contaminantes hallado en Se observaron lo este trabajo. En que inorganicos. respecta a cantidad lo la A ARNALDO 76 20 Enero Junio 201 - (1 ) I ARNALDO/ Enero-Junio 2013 77 20(1) I 3 ! N. Cuellar etal- Anatomia y Control de Calidad de Argemone subfusiformis. Tabla 2. Irregularidades en el rotulo de muestras de Argemone subfusiformis la Provincia de Jujuy y de Cordoba fecha de envasado; fecha de vencimiento; n i 5 de materia extrana, se encontraron entre 6,7 La presencia de estomas anomociticos un un suma y 12,9 gr de material contaminante sobre es caracter diagnostico de total de 40 consecuentemente del total importancia y coincide con lo descripto g; & de muestras consideradas 83,33% resulto para familia por Metcalfe Chalk el la (1950). % regularmente pura y el 16,67 restante Por otro lado, segun dichos autores, las resulto deficientemente pura. hojas en Papaveraceae son de estructura embargo, en dorsiventral; sin este estudio Control higienico-sanitario: El total encontro que A. presenta se subfusiformis de muestras analizadas resultaron las de hojas tipo resultados isolateral, contaminadas con materia organica estar similares fueron hallados por Lujan (2002). vegetal y animal y diversos contaminantes En medula de los tallos plantas adultas, la En inorganicos. que respecta a cantidad lo la muy de esta desarrollada a diferencia lo de materia extrana, se encontraron entre 6,7 expuesto por Lujan quien senalo (op. cit.), un gr de material contaminante sobre y 12,9 una medula En escasa o ausente. cuanto de 40 consecuentemente del total total g; del sistema vascular de muestras consideradas 83,33% resulto el mun en la % regularmente pura y 16,67 restante el ya que familia, la eustela tiene hacecillos resulto deficientemente pura. colaterales y xilema forma una V, el que una sugieren afinidad caracteristicas con Ranunculaceae. familia la muestra algunos caracteres xeromorficos Se determino en A. subfusiformis que la como epidermis externa del estigma desarrolla son: estructura foliar isolateral y numerosos con presencia de estomas en ambas caras de pelos, relacionados la que muestran recepcion del polen, caracteristica es la hoja. Estas particularidades que es una especie que puede adaptarse compartida con otras especies, caso de en Papaver (Fahn, a vivir diversos habitats y condiciones rhoeas~L. 1985). un ambientales, permitiendole amplio asi & Gunn que Seldin senalaron (1976), rango de distribucion. Argemone unico genero de es familia el la A ARNALDO 78 20 Enero Junio 201 - (1 ) I