Applications of molecular techniques to population and phylogenetic studies on Curculionidae

8 Pages·1999·0.75 MB·

by  Lanteri, Analía A

Rez¡.Soc.Entomol.Argent.58(1-2):161-168, 1999
Aplicación de técnicas moleculares en estudios poblacionales
y filogenéticos en Curculionidae
LANTERI,Analía A.
DepartamentoCientíficode Entomología,Museode La Plata,
PaseodelBosque, 1900La Plata,Argentina.
E-mail: [email protected]
• ABSTRACT.Application ofmoleculartechniquesto population and phylo
genetic studies on Curculionidae. Moleculartechniques are useful to resolve
difierent kinds of evolutionary problems in Curculionidae. RAPDs (random
analysis ofDNA polymorphisms) was applied to characterize populations of
the boll weevil Anthonomus grandis, giving significant information on their
gene flow, and routes ofmigration. MitochondrialDNAsequences werecom
piledto analyzephylogeneticrelationshipswithinthe weevil genera Aramigus
and Calapaganus. They have alsocontributedto study the evolution ofparthe
nogenetic reproduction in Aramigus, and to estimate the age ofthe arrival of
f1ightlessspeciesof Galapaganus inthe Galápagos archipelago.
Elobjetivodeestacharla espresentar austedes dos Unidos (Burke et al., 1986). A esta primera
los resultados de dos proyectos de investigación dispersión, anterior al cultivo del algodón por
donde se aplican técnicas moleculares (Avise, parte del hombre, le sucedió otra que síacompa
1994) para el estudio de especies de Curculioni ñó al cultivo, y que permitió la entrada del picu
dae. Enprimertérminomereferiréamis investiga do en la mayoría de los países algodoneros de
ciones en poblaciones de Anthonomus grandis, América del Sur. En 1993 el picudo ingresó a la
especie conocida vulgarmente como picudo del Argentina, pero graciasalasmedidasdeerradica
algodonero, en lascuales sehan empleadotécni ción y control que sevienen realizando, no hay
cas de RAPOs (análisis al azar de polimorfismos todavía un verdadero impacto sobre la zona de
del ADN). En segundo lugar, presentaré algunos producción algodonera (Retzlaff, 1998). El pro
resultados del análisis filogenético de los géneros yectodeerradicación del picudo intentadetener
Aramigus y Calapaganus, utilizando secuencias loen lafrontera nordestedel país, mediantetram
del gen mitocondrial COI (Citocromo Oxidasa 1). pas de feromonas; y el proyecto trinacional de
"Manejo integrado del picudo del algodonero en
A. Estudios moleculares en Anthonomusgrandis Argentina, Brasil y Paraguay", tiene por finalidad
mediante la técnica de RAPOs. Elpicudo del al realizar investigaciones cuyos resultados permi
godonero, Anthonomusgrandis, es la plaga más tan controlar efectivamente la plaga en los tres
importante de esecultivo en América. Lashem paíseslimítrofes.
bras adultas depositan los huevos en los capu Como integrantes del mencionado proyecto
llos o botones florales, y las larvas recién emer trinacional, las doctoras Viviana Confalonieri y
gidas se desarrollan protegidas dentro de ellos, Analía Lanteri, junto con la licenciada María
destruyendo el fruto completamente o dañándo Amalia Scataglini, hemos comenzado a realizar
lo de tal manera que pierde su valor comercial. estudios sobre Anthonomus grandis, a fin de ca
A este daño sesuma una extraordinaria tasa re racterizar molecularmente suspoblaciones, y así
productiva y de dispersión. establecer el grado de flujo génico entre las mis
Originalmente el picudo del algodonero se mas, y las rutas de migración de la especie. En
distribuía en la zona centro sur de México (Mon una segunda etapa, seintentaráidentificarmarca
clova). y luego comenzó a dispersarse junto con dores ligados agenesrelacionadoscon la suscep
sus plantas huéspedes, preferentemente malvá tibilidad a distintos insecticidas (Lanteri et al.,
ceas, hacia América Central y el sur de los Esta- 1998).
161
Rez¡. Soco Entomol.Argent.580-2),1999
La técnica de RAPOs (Hadrys et al., 1992; genéticas de Nei (Nei, 1972), los índices Fst
Sequeira et al., 1995) esuna herramientaeficaz (Black, 1997)y seobtuvo un fenograma. Enlata
para elucidarel origen geográfico y la variación bla 11 seobservan los valores de distancias gené
genética poblacional de especies plaga, lo cual ticas eíndices Fstpara laspoblaciones de EE.UU.
se demostró en el caso del gorgojo argentino y Paraguay. Losvalores de Fst(0.376 para el par
del tallo, iistronotus bonariensis Kuschel, intro Caacupé-Mississipi; 0.428 para Yhjovi-Mississipi
ducido en Nueva Zelandia (Lenney Williams et y 0.067 para el par Caacupé-Yhjovi) señalan una
al., 1994). Por esta razón se decidió utilizarla alta diferenciación entre cada una de las pobla
para caracterizar poblaciones del picudo del al cionesdeParaguayy lade losEE.UU., sinernbar
godonero. go todos los valores de comparación son signifi
Lospicudos recolectados paraestudiomedian cativos. Esto implica que aunque las dos pobla
te latécnica de RAPOssepreservaron enalcohol, ciones de Paraguay seanmuy similares genética
preferentemente al 100 %. Una vez extraído el mente, no se comportan como una población
AON, se realizó una reacción de amplificación única. Valores de Fstentre Oy 0.05 indican mo
por PCR(reacción en cadena de lapolimerasa) si derada diferenciación, entre 0.05 y 0.25, diferen
guiendoel protocolo deWilliams et al.(1990). Se ciación importante, y mayores de 0.25, diferen
utilizaron cebadores o "primers" arbitrarios o al ciación muy alta (Hartl, 1980).
azar,hastaelpresente los"primers" 3y6de lase Como la diferenciación entre las dos pobla
rie By9de laserieA (PromegaL Losproductosde ciones de Paraguay esbaja, el valor de flujo gé
amplificación sesembraron en un gel de agarosa nico (N.m) entre las mismas esalto (3 migrantes
teñido con bromuro de etidio, para suseparación por generación). Oel mismo modo, la alta dife
por electroforesis, sevisualizaron bajo luz UVyse renciación entre las poblaciones de Paraguay y
fotografiaron para suposterior análisis. lade losEE.UU., secorrespondecon un flujo gé
Seestudiaron poblaciones de A. grandis pro nico muy bajo (1 migrante cada 3 generaciones)
cedentes de Argentina (varias localidades de las
provincias de Formosa y Misiones), Paraguay (lo
Tabla I. Frecuencia de alelas dominantes en pobla
calidades deCaacupéeYhjovi)y Brasil (varias lo
ciones de Anthonomus grandis, de Mississipi
calidades de los estados de Paranáy SaoPaulo), (EE.UU.), Caacupé eIhjoví (Paraguay) (Scatagliniet
seleccionándose 11 ejemplares de cada una de al.,en prep.).
ellas. Asimismo se incorporaron al estudio una
Locus Mississipi Caapupé Yhjovi
muestra testigo de la llamada forma sudoriental
del picudo, procedente de Mississipi, EE.UU y 09-01 .000 1.000 1.000
una muestra de la forma mexicana. 09-02 .000 1.000 1.000
Como resultado de la amplificación de frag 09-03 .057 .646 667
mentosanónimos, seobtuvieronpatrones deban 09-04 .255 .057 .000
das RAPOs, marcadoras para laspoblaciones en 09-05 .667 1.000 1.000
estudio. En la tabla I sebrindan los datos de fre 09-06 .255, .118 .255
cuencias alélicas correspondientes a las dos po 09-07 1.000 1.000 1.000
blaciones de Paraguay y a la muestra testigo de 03-01 .047 .184 .000
Mississipi. Losvalores registrados indican que las 03-02 .047 .184 .388
bandas 9-1, 9-2, 6-4 Y6-5 diferencian claramen 03-03 .095 .333 .622
te lasdos poblaciones de Paraguay,de la proce 03-04 .478 .057 .000
dentedeMississipi, asícomotambién labanda 6 03-05 .095 .333 .500
2, que aparece en esta última y no en las mues 03-06 1.000 1.000 1.000
tras de Caacupé e Yhjovi. Lasbandas 9-7, 3-6 Y 03-07 .698 .184 .134
6-1 seríanmarcadorasdeestegrupode poblacio 03-08 .397 .529 .646
nes, porque están presentes en todos los indivi 03-09 .000 .118 .000
duos estudiados. El resto de lasbandas tiene va 06-01 1.000 1.000 .452
riación intrapoblacional y no esde utilidad para 06-02 1.000 .000 .000
separar laspoblaciones en estudio. 06-03 .646 1.000 1.000
A partir de lasfrecuencias alélicas decada po 06-04 .000 1.000 1.000
blación se calcularon una matriz de distancias 06-05 .000 1.000 1.000
162
LANTERI, A.A.,técnicasmolecularesen Curculionidae
TablaIl. Distancias genéticasde Nei (mitadsuperiorderecha);índicesde fijación de WrightoFst yvaloresde
N.m. (mitadinferiorizquierda).***valoresaltamentesignificativos;**valoressignificativos.
Missisipi Caacupé Yhjovi
Missisipi o 0.4442 0.5272
Caacupé 0.376### o 0.0313
(0.4migrantes/generac.)
Yhjovi 0.428### 0.067## o
(0.3migrantes/generac.) (3.5migrantes/generac.)
(Tabla 11). Según Kimura & Maruyama (1971), las estudiode lassecuenciasdel gen mitocondrial de
poblaciones estarían muy diferenciadas si su laCitocromoOxidasa I(COD, resultó de gran uti
N.m esmenorque 1, mientras que secomporta lidad para distinguir especies (Normark & Lante
rían como una unidad panmíctica, si su N.m es ri, 1996), analizar relaciones cladísticas entre ha
mayorque 4. plotipos sexuales y partenogenéticos del género
Elestudiorecientemente iniciadosobre laspo Aramigus (Normark & Lanteri,1998) y plantear
blaciones de A. grandis (Scataglini et al., en hipótesis sobre el origen de la partenogénesis en
prep.). secompletará con el análisis de un mayor este ciado (Lanteri & Normark, 199.5; Normark,
número de muestras (otros paísesde América de 1996). Enla actualidad, el estudio de lassecuen
Sur, EE.UU. y Mexico) y con la utilización de ciasdel genCOI seestáempleando para analizar
otros "primers". Además, se compararán las po las relaciones cladísticas entre las especies del
blaciones que afectan al algodón con lasque vi género Galapaganus y afines, y para estimar la
ven sobre plantas nativas, afin de obtener un es antigüedad mínima de este ciado en el archipié
pectro amplio de la variabilidad total de la espe lago de Galápagos (Sequeira et al., inéd.).
cie y establecer sus patrones de migración. Por Losinsectos sobre los cuales serealizó el aná
otra parte seintentaráobtenermaterial para estu lisisdel ADN mitocondrial fueron preservadosen
dios moleculares, de Anthonomus hunteri Burke alcohol 100 %. ElADNm extraído de tejidos to
& Cate, especie hermana del picudo del algodo rácicosde losgorgojos, seaisló aplicandoel pro
nero, que a diferencia de éste presenta rangos tocolode Reisset al.(1995), modificadopor Nor
geográfico y de plantas huéspedes más restringi mark (1994) y se amplificó por PCR. Los "pri
dos (Burke et al., 1986). mers" utilizados para realizar la secuenciación
Laestimación de la diferenciación genética y automática del gen COI, fueron los construidos
flujo génico entre poblaciones de picudos, per por Normark(1994) para el género Aramigus, ba
mitirá conocer la procedencia de los ejemplares sándose en secuencias conocidas de estegen en
recolectados en nuestro país y determinar si es otros insectos (Apis y Orosophila).
tán ingresandodesde países limítrofeso pertene Tanto en el estudio filogenético de Aramigus
cen a poblaciones independientes, ya estableci como en el de Galapaganus, los datos molecula
das. Seespera que este monitoreo de los movi resfueron analizados mediante un algoritmo ex-
mientos de la especie plaga mediante técnicas haustivo del programa PAUP 3.1 (Swofford,
moleculares, posibilite la adopción de medidas 199.3),con los caracteres no ordenados y asig
de control más efectivas. nándoles igual peso apriori. Encaso de obtener
semás de un cladograma, se aplicó el procedi
B. Secuencias de ADN mitocondrial (COl) enel miento de pesado sucesivo y seobtuvo el c1ado
estudio filogenético de los géneros Aramigus y grama de consenso estricto.
Ga/apaganus. Los genes mitocondriales han sido Acontinuación me referiréalasproblemáticas
utilizados con gran éxito para analizar origen sistemáticas y evolutivas que seintentaron resol
geográfico, patronesde migración yrelacionesde ver en los géneros Aramigusy Galapaganus, con
parentesco entre especies próximas y grupos por la ayuda de caracteres del ADN.
debajodel nivel deespecie,yaque presentan una 1. Incongruenciaentredatosmolecularesymor
alta tasa de mutación (Langor & Sperling, 199.5; fológicos en el género Aramigus. Elgénero Ara
Moritz et al., 1987; Roehrdanz & North, 1992).En migus, cuenta actualmentecon ochoespecies na
el caso de los gorgojos de la tribu Naupactini, el tivas de laArgentina, Uruguay y Brasil (Lanteri &
163
Rev.Soco Entorno!.Argent.58(1-2),1999
Díaz, 1994; Normark & Lanteri, 1996). Una de ron analizados en forma separada y simultánea,
susespecies, A. tessellatus, fue introducidaen los aplicándose testsestadísticos para poner a prue
EE.UU. y NuevaZelandia juntocon diversoscul ba el grado de incongruencia entre ambos con
tivos, y en la Argentina ha sido señalada como juntos de datos (Farris et al., 1995). El outgroup
dañina para la alfalfa (Lanteri, 1994) y el trigo empleado para enraizar el árbol fue una especie
(Lanteri et al., 1997). de Naupactini aún no descripta.
Al igual queotros géneros de Naupactini, Ara Enla figura 1 seobservan los cladogramas re
migus presenta linajes con partenogénesis apo sultantes de los análisis de lasevidencias morfo
míctica o ameiótica, mecanismo reproductivo lógica (lado izquierdo) y molecular (lado dere
que hafavorecido sudispersiónenambientesdis cho), en forma separada. Los números sobre las
turbadoscornoson losagroecosistemas(Lanteri & ramas indican soporte de Bremer (1994) y los
Normark, 1995). Elsurgimiento de la partenogé porcentajes debajo de las ramas del cladograma
nesis en distintos grupos de insectos es un tema derecho, valores de "bootstrap". Elrecuadro en
muy interesante de la biología evolutiva, ya que cierra los morfotiposde la especie compleja Ara
abre numerosos interrogantestales como: Lapar migus tesselletussegún Lanteri & Díaz (1994), los
tenogénesis en losgorgojos, ¿surgeaposteriori de cuales forman un grupo monofilético.
la hibridación, como ocurre frecuentemente en Al comparar ambos c1adogramas resulta evi
plantas, o es producto de una macromutación? dente que los datos moleculares permiten una
¿Cuál es la relación entre partenogénesis y poli mejor solución de las relaciones entre variantes
ploidía? ¿Es posible la especiación dentro de los morfológicas y/o genéticas, que los datos morfo
ciados partenogenéticos? lógicos, los cuales son insuficientes para elucidar
Elinterés por la evolución de la partenogéne relaciones c1adísticas dentro de la especie com
sis llevó al Dr. Normak (Museum of Comparative pleja A. tessellatus (Lanteri & Díaz, 1994).
Zoology, Harvard University) aelegir a Aramigus Cuando sereunieron lasevidencias morfológi
como objetode sutesisdoctoral, en lacual reali caymolecularen un solo conjuntodedatos, ana
zó el análisis c1adístico de los haplotipos mito lizado en forma simultánea (Nixon & Carpenter,
condriales de las especies del género, caracteri 1996), el c1adogramaresultante fue muy similaral
zados por secuencias del gen COI, demostrando obtenido exclusivamente sobre la basede los ca
el surgimiento independiente de poliploidía y racteresdel ADNm, el cual representa lamejores
partenogénesis en varios linajes. timacióndelafilogeniade loslinajes partenogené
Posteriormente seplanteó la necesidadde rea ticos (herencia materna). Elc1adogramade lafigu
lizar un análisis c1adístico de Aramigus, utilizan ra2esel resultado del análisis simultáneode am
do lasevidencias molecularymorfológicaenfor basevidencias, con la información del tipo de re
ma conjunta (Normark & Lanteri, 1998), afin de producción en forma superpuesta: lasramas blan
optimizar la resolución del cladograma y de po cas representan reproducción sexual; las negras,
ner a prueba la hipótesis sobre el origen híbrido partenogénesis, y las rayadas, reproducción equí
de la partenogénesis en el grupo. Dicha hipótesis voca. Asumiendoque latransiciónentre reproduc
puede resumirse de la siguiente manera: si la in ción sexual ypartenogénesisesirreversible(Bull &
congruencia entre datos morfológicos y molecu Charnov, 1985), como es la opinión de la mayor
laresesbaja, podríadeberse afactores tales como parte de los especialistas, el número mínimo de
errores metodológicosode lainferenciafilogené veces que la partenogénesis habría surgido inde
tica; pero sila incongruenciaesalta, cabría supo pendientemente enel género Aramigusesseis.
ner que existen causas biológicas determinantes Sobre la base de todos los resultados obteni
de dicha incongruencia,tales corno laocurrencia dos (c1adogramas de evidencias separada y si
de evolución reticulada o hibridación. multánea e índices de incongruencia), se con
Lasunidades terminales del análisis c1adístico cluyó que los pocos linajes sexuales incluidos en
fueron variantes genéticas o haplotipos mitocon el análisis dan estimaciones congruentes de la fi
driales, correspondientes alasespeciesde Arami logenia, en tanto que la incongruenciade resulta
gU5 y los siete morfotipos de la especie compleja dos seda a nivel de los linajes partenogenéticos.
A. tesselleius. Seseleccionaron 32caracteres mor Por lo tanto la hipótesis del origen híbrido de los
fológicos y secuencias de 762 paresde basesdel linajespartenogenéticosdeAramigusparece serla
gen COI. Los datos morfológicos y del ADN fue- másplausible.
164
LANTERI,A.A.,técnicasmolecularesen Curculionidae
undescribed
pilosus
----c curtulus
planioculus
d2 intennediusAl 24
intennediusA2 100
2
intennediusEl
2 intennediusB2 47
globoculus
-C conirostris1
conirostris2
4
~ uruguayensisA 8
uruguayensisB1 2
100
uruguayensisB2 95
pallidusIV
4
~ pallidusIIAl 6 4
pallidusIIA2 100 95
pallidusIIB1
pallidusIIB2 O 8
pallidusIIB3 67 97
pallidusIIIB3
O
santafecinusgyCl
~oo
santafecinusgyC2 26
santafecinusgyC3
O 1
santafecinusgyC4
durius1 60 52
durius2 11
santafecinusbrAl 7
santafecinusbrA2 100
santafecinusbrB
7
l~ viridipallensbrB1
viridipallensbrB2 99
-1
viridipallensbrB3
28
tessellatus1 O
tessellatus2 15
tessellatus3
morfología viridipallensgnA ADNm
biseriatus
Fig. 1.Comparaciónde cladogramasbasadosen caracteresmorfológicosymoleculares.Ladoizquierdo:Clado
gramadeconsensoestricto,obtenidoapartirde unamatrizde37unidadesterminalesy32caracteresmorfoló
gicos.Ladoderecho:únicocladogramade mayorsimplicidadobtenidoporpesadosucesivo,apartirde unama
trizde34unidadesterminales(haplotiposmitocondriales)y762paresde bases (Normark& Lanteri, 1998).
2. Análisis c1adístico del género Galapaganus. ce aproximadamente quince años, el número de
Lasislas Galápagos, situadas en el Océano Pací especies de insectos descriptas para las Galápa
fico a960 km de lascostasde Ecuador, constitu gos seincrementó de 900 a 1700 (Peck & Kuka
yen un verdadero laboratorio biológico que ha lova-Peck, 1990). Fue precisamente gracias a la
atraídoel interés de científicosdetodoel mundo, colaboración del Dr. Peck, que tuve la oportuni
los cuales continúan formulándose numerosas dad de visitar las islas, durante marzo de 1996,
preguntas acerca de laevolución de suparticular para llevaracabo observaciones biológicas y re
flora yfauna (Lanteri, 1997). Losprimerosestudios colectarpersonalmenteespecies de Ga/apaganus
realizados sobre lasespecies que habitan lasGa (Lanteri,1992), con el fin de realizar estudios
lápagos versan sobregrupos devertebrados, parti moleculares.
cularmente reptiles, que son los animales másca Ga/apaganus se distribuye en el archipiélago
racterísticos de lasislas. Sin embargo, en los últi de lasGalápagos y lascostasde Perú y Ecuador,
mos diez años, el interés por el estudio de los in y hasta el presente cuenta con 15 especies (l.an
sectos de las islas Galápagos ha aumentado con teri,1992), algunas de ellas de status dudoso, ya
siderablemente. Enestesentidobastarecordar que que laausencia de autapomorfías hace sospechar
desde que el Dr. Stewart Peck (Carleton Univer que podrían sersubespeciesovariantes poblacio
sity,Ottawa, Canadá)comenzara susestudios, ha- nales. El análisis c1adístico realizado en 1992
165
Reo. Soco Eniomol. Argent.580-2),1999
o
undescribed
piIosus
curtulus
Fig. 2. Único cladograma • pIaniocuJus
O
de mayor simplicidad, ob globoculus
o
tenido por pesado sucesi intermediusB1
vo, a partir de una matriz O intermediusB2
combinada de datos mor
intermediusAl
fológicos y moleculares.
intermediusA2
Las ramas blancas repre
• conirostris1
sentanlinajesde reproduc
• conirostris2
ción sexual;lasnegraslina
biseriatus
jes partenogenéticos y las
• tessellatus1
rayadas, linajes de repro
• tessellatus2
ducción equívoca (Lanteri
tessellatus3
&Normark,1998).
• santafecinusAl
• santafec:inusA2
• santafec:inusE
• viridipallensB1
• viridipallensB2
• viridipallensB3
• viridipallensA
O
palliclusIlAl
O
palliclusUA2
palliclusIVC
• palIlclusUB1
• pallidusIlB3
• pallidus1IlE3
• pallidus11B2
• santafecinusCl
• santafec:inuse2
• santafec:inusC4
• santafec:inusC3
• durius1
• durius2
• uruguayensisEl
• uruguayensisB2
o
uruguayensisA
constituyó un primer aporte al conocimiento del getal en sentido altitudinal, en la diferenciación
grupo, pero los caracteres morfológicos parecían de lasespeciesde Galapaganus?
ser insuficientes para resolver algunos problemas Seestudiaron lasespeciesde Galapaganusque
sistemáticos tanto anivel de relaciones genéricas habitan en diferentes zonas ecológicas de las is
como específicas. Por esta razón sedesidió ini lasdel sudeste (SanCristóbal, Española y Florea
ciar un estudio de las secuencias del ADNm de na) y centro (Santa Cruz) del archipiélago, las
lasespecies de Galapaganus,conjuntamente con cuales registran la mayoredad geológica. Lama
profesionales del Museum of Comparative Zoo triz de datos analizada secompone de diez uni
logy, Harvard University, EE.UU. y del Laborato dades terminales (siete especies de Galapaganus
rio de Genética, de la Facultad de Ciencias Exac y tres especies de Neupectus Dejean empleadas
tasy Naturalesde la USA) (Sequeira etal.,inéd.). como grupo externo) y 1226 caracteres (secuen
Algunas de las preguntas que se intentan res cias del gen COI).
ponderson lassiguientes: ¿Cuálessonlasrelacio Como resultado del análisis c1adístico seobtu
nesdeparentescoyelgradodedivergenciagené vo un solo c1adograma de mayor simplicidad en
tica entre las especies de Galapaganus? ¿Cuánto el cual se distinguen dos grupos rnonofiléticos
tiempo haceque dichasespecies habitanel archi coincidentes con los grupos de especies fernora
piélago? ¿Qué influencia han tenido la distancia tus y darwini, descriptos sobre la base de datos
entre las islas del archipiélago y la zonación ve- morfológicos. Lostaxones terminales analizados
166
LANTERI,A.A.,técnicasmolecularesen Curculionidae
muestran una divergencia genética suficiente co BREMER, K.1994. Branch support and tree stabi
mo para ser considerados "buenas especies", a lity. Cladistics 10: 29.5-304.
pesar de que sudiferenciación morfológicaesen BROWER, A. V. Z.l994. Phylogeny of Heliconius
algunos casos poco conspicua. Asimismo seevi butterflies inferred frorn mitochondrial DNA
dencia unamarcada influenciade lazonación al sequences (Lepidoptera, Nyrnphalidae). Mol.
titudinal de lasislas,en laespeciaciónde Galapa Phylogen. Evol. 3: 159-174.
ganus, ya que especies que habitan en la zona BULL, J. J. & E. L.CHARNOV. 1985. On irreversible
costera, desértica, divergen notablemente de evolution. Evolution 39: 1149-115.5.
aquéllas que ocurren en las zonas altas de las BURKE, H. R.,W. E.CLARK, J. R.CATE & P. A. FRY
mismas islas, con condiciones ecológicas de ma XELL.1986. Origin and dispersal of the Boll
yor humedad y abundante vegetación. Weevil. Bulletin ofthe ESA:228-238.
Finalmente, basándose en un reloj molecular CHRI5TIE, D. M., R.A. DUNcAN,A. R.MCBIRNEY/ W.
(ADNm) calibrado previamente para artrópodos M. WHITE, K. S. HARPP & C. G. Fox.1992.
(Brower, 1994), se estimó el tiempo mínimo en Drowned islands downstream from the Galá
que habría ocurrido la divergencia entre las dis pagos hot spot imply speciation times. Nature
tintas especies estudiadas. La edad mínima esti 3.5.5: 246-248.
mada para la colonización del archipiélago de Cox, A. 1983. Ages of the Galápagos Islands. En:
Galápagos, por parte del antecesor de las espe Bowman, R.l.,M. Berson& A. E.Levitan (eds.),
cies del grupo darwini, concuerda aproximada Patterns of evolution in Galápagos organisms,
mente con estimaciones realizadas para otros ta Pacific Division,AAAS, SanFrancisco, pp.11-23.
xa, tales como iguanas, lagartos ygeckos (Wright, FARRI5, J.S.,M. KALLER5J6, A. G. KLUGE & C. BULT.
1983; Wyles & Sarich, 1983) y excede las data 1995. Testing significance of incongruence.
ciones geológicas (Bailey, 1976; Cox, 1983; Cladistics 10: 31.5-.319.
Hickman & Lipps, 198.5), haciendo suponer que HADRY5, H./ M. BALlC & B.SCHIERwATER.1992.Ap
las islas más antiguas de Galápagos, donde arri plications of randorn amplified polymorfic
baron los primeros colonizadores, estarían ac DNA(RAPO) in molecularecology. Molecular
tualmente sumergidas en el Océano Pacífico. Es Ecology 1: .5.5-6.3.
te dato es avalado por estudios geológicos más HARTL, D. L. 1980. PrincipIesofpopulationgene
recientes, relativos al hallazgo de volcanes sub tics. SinauerAssociates, Sunderland.
marinos(islas sumergidas) ubicadosalsudestedel HICKMAN, C. S. & J. H. LIPP5. 1985. Geologic
archipiélago (Christie etal., 1992). youth ofGalápagos Island confirmed by mari
ne stratigraphyand paleontology. Science
227: 1578-1580.
AGRADECIMIENTOS KIMURA/ M. & 1. MARUYAMA. 1971. Pattern ofcen
tral polymorphisrn in ageographically structu
A los colegas que participaron en los trabajos red population. Genet. Res. 18: 125-131.
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