Análise de eficácia antimicrobiana de extratos vegetais de Rosmarinus officinalis L., Salvia officinalis L. e Coriandrum sativum L

2017·0.34 MB·

by  De Sousa, Rafaela Rogério Floriano

R.R.F. de Sousa; M.R. da Silva; P.R. Siliano

Análise da eficácia antimicrobiana de extratos vegetais de Rosmarinus
officinalis L., Salvia officinalis L. e Coriandrum sativum L.

Rafaela Rogério Floriano de Sousa1; Marcelo Rogério da Silva2; Priscila Reina Siliano3

¹Graduado em Ciências Biológicas pelo Centro Universitário Fundação Santo André, CUFSA.
2 Doutor pelo Instituto Botânico De São Paulo
3Profa Dra. e Docente do Centro Universitário Fundação Santo André

Centro Universitário Fundação Santo André – CUFSA, Santo André – SP [Brasil] Faculdade
de Filosofia, Ciências e Letras –FAFIL
Endereço postal: Av Príncipe de Gales 821 Bairro Príncipe de Gales Santo Andre SP CEP
09060-650; tel [phone]; e-mail [email protected], [email protected]

RESUMO

A resistência bacteriana é um grave problema, provocada principalmente pelo consumo
excessivo de antibióticos, selecionando-se assim bactérias geneticamente mais resistentes.
Devido a esta constante alteração, novas drogas devem ser elaboradas e alguns vegetais
devem ser explorados para testar suas capacidades antimicrobianas. As espécies Rosmarinus
officinalis L. (alecrim) , Salvia officinalis L. (sálvia) e Coriandrum sativum L. (coentro),
foram submetidos a processos para obtenção de seus extratos puros, diluídos em
concentrações de 0,05; 0,15; 0,20 e 0,30g/ml, e realizados testes com método de
macrodiluição com 10 bactérias distintas: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes,
Serratia marcescens, Streptococcus pyogenes, Proteus mirabilis, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. O
extrato de Rosmarinus officinalis L. a 0,30g/ml inibiu 7 espécies de bactérias, Salvia
officinalis L. a 0,20g/ml inibiu 9 espécies de bactérias e o extrato de Coriandrum sativum L.
0,30g/ml foi eficaz contra todas as espécies de bactérias testadas e o mais eficiente comparado
aos outros três extratos avaliados.

Palavras-chave: Rosmarinus officinalis L.. Salvia officinalis L.. Coriandrum sativum L..
Extratos antimicrobianos. Resistência bacteriana.

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ABSTRACT

Bacterial resistance is a serious problem, caused mainly by the excessive consumption of
antibiotics, thus selecting genetically resistant bacteria. Due to this constant alteration, new
drugs must be developed and some plants must be explored to test their antimicrobial
abilities. The species Rosmarinus officinalis L., Salvia officinalis L. and Coriandrum sativum,
were submitted to processes to obtain their pure extracts, diluted in concentrations of 0,05;
0.15; The results of the experiments were carried out using a microdilution method with 10
different bacteria: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes, Serratia marcescens,
Streptococcus pyogenes, Proteus mirabilis, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Proteus
vulgaris, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. The extract of Rosmarinus
officinalis L. at 0.30g / ml inhibited 7 species of bacteria, Salvia officinalis L. at 0.20g / ml
inhibited 9 species of bacteria and the extract of Coriandrum sativum L. 0.30g / ml was
effective against All bacterial species tested and the most efficient compared to the other three
evaluated extracts.

Keywords: Rosmarinus officinalis L. .. Salvia officinalis L .. Coriandrum sativum L. ..
Antimicrobial extracts. Bacterial resistance.

INTRODUÇÃO técnicas como a de macrodiluição, que
avalia se após o cultivo de bactérias em
Muitos estudos mostram que tubos de ensaio juntamente com a
vegetais podem possuir características substância bactericida que está sendo
antimicrobianas e podem ser utilizados em testada, houve o desenvolvimento de
tratamentos infecciosos, mas que também é bactérias ou estas foram completamente
necessário um avanço nestas pesquisas e inibidas pela substância em questão,
desenvolvimento de drogas e através da analise de turbidez da amostra
medicamentos pelas indústrias (5).
farmacêuticas (1,2,3,4). Diversos autores já estudaram a
Os estudos com plantas medicinais atividade antimicrobiana da Salvia
avaliam a Concentração Inibitória Mínima officinalis L. (salvia), Rosmarinus
(CIM), ou seja, qual a menor concentração officinallis L. (alecrim) Coriandrum
de extrato ou substância estudada é capaz sativum L.. (coentro)
de inibir completamente o crescimento (6,7,8,9,10,11,12,13,14).
bacteriano. E pode ser realizado a partir de
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Tendo em vista o aumento de em cada processo de extração. Os extratos
bactérias resistentes a determinados foram coletados em frascos de vidro. O
antibióticos, é necessário buscar novas solvente foi evaporado utilizando-se um
substâncias para combater estas bactérias. evaporador rotativo (BUCHI®). O extrato
Alguns vegetais como a sálvia, o alecrim e etanólico bruto foi armazenado em frascos
o coentro podem possuir propriedades e colocado em banho-maria para eliminar
antimicrobianas, justificando a realização totalmente o solvente. Os extratos foram
do presente estudo. pesados e os rendimentos foram
comparados.
METODOLOGIA Foram utilizadas dez espécies
Folhas de Rosmarinus officinalis L. diferentes de bactérias, Klebsiella
(alecrim), Salvia officinalis L. (sálvia) e pneumoniae (CCCD – K003),
Coriandrum sativum L (coentro), foram Enterobacter aerogenes (CCCD – E001),
obtidas em estabelecimento comercial. Serratia marcescens (CCCD – S005),
Para preparar as amostras, as folhas foram Streptococcus pyogenes (CCCD – S012),
secas em estufa a 40° C por 48 horas. Em Proteus mirabilis (CCCD – P001),
seguida, as amostras secas foram Bacillus subtilis (CCCD – B005),
pulverizadas em um moinho de facas Escherichia coli (CCCD – E004), Proteus
(TECNAL®), e 100g de cada espécie foi vulgaris (CCCD – P002), Staphylococcus
utilizado para a obtenção do extrato aureus (CCCD – S009) e Pseudomonas
etanólico bruto por ASE300 (DIONEX®). aeruginosa (CCCD – P004), pertencentes á
Como solvente, foi utilizado o etanol Bacterioteca do Laboratório de Biologia do
comercial a 95%. Centro Universitário Fundação Santo
As extrações foram realizadas em André, nos testes microbiológicos.
um Extrator Acelerado por Solvente Os extratos de Rosmarinus
(ASE300-DIONEX®) . As amostras secas officinalis L. (alecrim), Salvia officinalis L.
e moídas (100g) foram inseridas em (sálvia) e Coriandrum sativum L.
células de extração de 22 ml, composta de (coentro) obtidos, foram diluídos em água
aço inoxidável. As extrações foram destilada e esterilizados em autoclave, para
realizadas com o tempo estático de 15min, a eliminação de possíveis contaminantes
por um ciclo, e a temperatura foi mantida a nos extratos.
60°C. A pressão foi mantida em 1500psi. Para realizar os ensaios foi utilizada
Cerca de 70 ml do solvente foi utilizado uma pipeta analítica de precisão para. Um
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volume de 1000 µl de extrato em cada tubo pyogenes, Escherichia coli, Proteus
de ensaio com 2 ml de caldo nutriente vulgaris, Staphylococcus aureus e
(Merck, Alemanha), e adicionados 100 µl Pseudomonas aeruginosa. As bactérias
de cada cultura bacteriana (crescidas a Serratia marcescens, Proteus mirabilis e
37ºC por 24 horas). Os tubos foram Bacillus subtilis se mostraram resistentes a
incubados na estufa a 37ºC por 24 horas e todas as concentrações do extrato de
analisados, segundo o método de Rosmarinus officinalis L.. A concentração
macrodiluição avaliando a Concentração inibitória mínima (CIM) foi obtida para a
Inibitória Mínima (CIM). Klebsiella pneumoniae em 0,15g/ml, para
Amostras cujo meio apresentaram Streptococcus pyogenes e Staphylococcus
turbidez foram cultivadas em placas de aureus em 0,20g/ml e para Enterobacter
ágar nutriente (Merck, Alemanha) e ágar aerogenes, Escherichia coli, Proteus
MacConkey (Merck, Alemanha) para vulgaris e Pseudomonas aeruginosa em
certificara ocorrência do crescimento, e 0,30g/ml de extrato de Rosmarinus
para verificar possíveis contaminações officinalis L..
foram realizados testes bioquímicos Na concentração de 0,05g/ml o
(catalase), coloração de Gram. extrato de Salvia officinalis L. inibiu o
crescimento apenas do Bacillus subtilis.
RESULTADOS Em concentração de 0,15g/ml ocorreu o
O extrato de Rosmarinus officinalis crescimento de 8 das 10 bactérias testadas,
L. não apresentou efeito bactericida em apenas Bacillus subtilis e Staphylococcus
concentração de 0,05g/ml. O efeito aureus apresentaram sensibilidade a este
antimicrobiano na concentração de extrato. Os resultados obtidos nas
0,15g/ml foi eficiente apenas na bactéria concentrações de 0,20g/ml e 0,30g/ml
Klebsiella pneumoniae. Com concentração foram semelhantes, com resistência de
de 0,20g/ml, as bactérias Klebsiella apenas da Pseudomonas aeruginosa,
pneumoniae, Streptococcus pyogenes e obtendo a concentração inibitória mínima
Staphylococcus aureus apresentaram (CIM) com 0,20g/ml de Salvia officinalis
sensibilidade. A concentração de 0,30g/ml L. para Klebsiella pneumoniae,
se mostrou mais eficiente apresentando Enterobacter aerogenes, Serratia
efeito bactericida em 7 das amostras marcescens, Streptococcus pyogenes,
testadas, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Escherichia coli e
Enterobacter aerogenes, Streptococcus Proteus vulgaris. Bacillus subtilis foi
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inibido com a concentração mínima de marcescens, Streptococcus pyogenes,
0,05g/ml e Staphylococcus aureus com a Proteus mirabilis, Bacillus subtilis,
concentração mínima de 0,15g/ml de Escherichia coli, Proteus vulgaris e
extrato de Salvia officinalis L.. Staphylococcus aureus.
O resultado observado na Com o aumento da concentração do
concentração de 0,05g/ml de extrato de extrato de Coriandrum sativum L. para
Coriandrum sativum L. mostrou 0,30g/ml foi possível observar a
crescimento bacteriano em 8 das amostras, sensibilidade de todas as amostras, não
inibindo apenas Bacillus subtilis e houve crescimento de nenhuma das
Staphylococcus aureus e portanto bactérias testadas.
atingindo a concentração inibitória mínima Com todos os extratos em
para estas 2 bactérias. Em concentração de concentração de 0,05g/ml os resultados
0,15g/ml a espécie Coriandrum sativum L. observados apresentaram crescimento das
proporcionou inibição de 6 bactérias bactérias Klebsiella pneumoniae,
testadas, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes, Streptococcus
Enterobacter aerogenes, Serratia pyogenes, Proteus mirabilis, Escherichia
marcescens, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Proteus vulgaris e Pseudomonas
coli e Staphylococcus aureus. E aeruginosa. Com as concentrações dos
alcançando a concentração inibitória extratos em 0,15g/ml é possível observar
mínima com 0,15g/ml de extrato de que somente as bactérias Streptococcus
Coriandrum sativum L. para Klebsiella pyogenes, Proteus mirabilis, Proteus
pneumoniae, Enterobacter aerogenes, vulgaris e Pseudomonas aeruginosa
Serratia marcescens e Escherichia coli. apresentaram crescimento em todos os
extratos.
DISCUSSÃO Estes resultados mostram que com
Os resultados observados com a o aumento da concentração dos extratos
concentração de Coriandrum sativum L. em 0,10g/ml já é possível obter o efeito
em 0,20g/ml mostrou apenas a resistência bactericida em algumas espécies de
de 1 bactéria, Pseudomonas aeruginosa. bactérias, principalmente do extrato de
Nesta concentração, o Coriandrum sativum Coriandrum sativum, que apresentou maior
L. foi capaz de inibir o crescimento de 9 eficácia antibacteriana que Rosmarinus
das 10 amostras, Klebsiella pneumoniae, officinalis L. e Salvia officinalis L.. O
Enterobacter aerogenes, Serratia extrato de Rosmarinus officinalis L.
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mesmo com o aumento da concentração (15), porém foram utilizadas concentrações
não apresentou eficácia bactericida de 0,5g/ml e em conjunto com outras
considerável. substâncias, neste caso com o clorofórmio,
Em concentrações de 0,20g/ml de e utilizando a técnica de disco difusão
todos os extratos apenas Pseudomonas baseados em um halo padrão de 18mm da
aeruginosa apresentou resistência, e oxacilina. Em comparação com HAIDA et
Klebsiella pneumoniae, Streptococcus al (15), os resultados obtidos apresentaram
pyogenes e Staphylococcus aureus foram inibição bacteriana a partir de 0,15g/ml da
sensíveis a todos eles. Com a concentração bactéria Klebsiella pneumoniae (não
mais elevada dos extratos (0,30g/ml) não utilizada por este autor), e a técnica
houve bactéria resistente. utilizada foi de macrodiluição, com
Como pode ser observado o extrato 0,20g/ml se obteve a inibição da bactéria
de Rosmarinus officinalis L. não Staphylococcus aureus e Streptococcus
apresentou eficácia bactericida em todas as pyogenes, sem qualquer adição de outras
bactérias testadas, mesmo em sua maior substâncias químicas. E com 0,30g/ml
concentração (0,30g/ml) houve resistência apresentou eficácia contra Escherichia coli
bacteriana em 3 amostras. e Pseudomonas aeruginosa,
A espécie Salvia officinalis L. diferentemente de HAIDA et al (15) que
mesmo com a resistência de 1 bactéria não atingiram tal resultado. Alguns estudos
quando em concentração 0,30g/ml apontam a eficácia bactericida sobre
demonstrou alta eficácia antimicrobiana. bactérias cariogênicas, Streptococcus
O extrato de Coriandrum sativum mutans, Streptococcus sobrinus,
L. comprovou sua elevada potência Lactobacillus casei, Streptococcus mitis,
bactericida, capaz de inibir todas as com a técnica de disco difusão com
bactérias, e comparado aos outros extratos extratos hidroalcoólicos (16). Estas
foi o melhor e mais eficiente, pois desde a bactérias não foram testadas neste trabalho,
menor concentração testada foi o que porém deve-se constatar a eficiência e o
apresentou maior inibição bacteriana. amplo espectro de ação deste vegetal.
Estudos com Rosmarinus officinalis A espécie Salvia officinalis L.
L. apontam maior sensibilidade da bactéria apresentou resistência apenas da bactéria
Staphylococcus aureus, e resistência de Pseudomonas aeruginosa, estudos com
bactérias como Escherichia coli e este mesmo vegetal corroboram com este
Pseudomonas aeruginosa a este extrato resultado, PEREIRA et al , onde foram
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utilizados óleos essenciais de Salvia Coriandrum sativum L. (coentro),
officinalis L. que inibiram o crescimento foi eficaz em todas as bactérias, Klebsiella
de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes,
pneumoniae, Proteus mirabilis, e Serratia marcescens, Streptococcus
Enterobacter aerogenes, como nos pyogenes, Proteus mirabilis, Bacillus
resultados observados.(2) Porém há subtilis, Escherichia coli, Proteus vulgaris,
também estudos onde não ocorreu Staphylococcus aureus e Pseudomonas
sensibilidade ao extrato pela bactéria aeruginosa.
Escherichia coli, mas sensibilidade da
REFERÊNCIAS
bactéria Pseudomonas aeruginosa Essas

variações entre os estudos pode ser 1-SILVEIRA, Luiz Mário da Silva et al.
Atividade antibacteriana de extrato de
ocasionada por diversos fatores, como
gervão frente cepas de Staphylococcus
métodos empregados, clima, solo, cepa aureus oxacilina-sensíveis e oxacilina-
resistentes isoladas de amostras biológicas.
bacteriana, entre outros. (15).
Revista Brasileira de Análises Clínicas,
Rio de janeiro, v. 39, n. 4, p. 299-301,
2007

CONCLUSÃO 2-PEREIRA, Rogério Santos et al.
Atividade antibacteriana de óleos
Neste trabalho foi possível concluir
essenciais em cepas isoladas de infecção
que o extrato de Rosmarinus officinalis L. urinária. Revista de Saúde Pública, São
Paulo, v. 38, n. 2, p. 326-328, 2004.
(alecrim) foi eficiente contra as bactérias

Klebsiella pneumoniae, Enterobacter 3-CATÃO, R. M. R. et al. Atividade
antimicrobiana in vitro do extrato do
aerogenes, Streptococcus pyogenes,
extrato etanólico de Punica granatum linn.
Escherichia coli, Proteus vulgaris, (romã) sobre isolados ambulatoriais de
Staphylococcus aureus. Revista Brasileira
Staphylococcus aureus e Pseudomonas
de Análises Clínicas, Rio de Janeiro, v.
aeruginosa. 38, n. 2, p. 111-114, 2006.

O extrato de Salvia officinalis L.
4-TUROLLA, Monica Silva dos Reis;
(sálvia) possui ação antimicrobiana nas NASCIMENTO, Elizabeth de Souza.
Informações toxicológicas de alguns
bactérias como Klebsiella pneumoniae,
fitoterápicos utilizados no Brasil. Revista
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São Paulo, v. 42, n. 2, p. 289-306, abr./jun.
marcescens, Streptococcus pyogenes,
2006.
Proteus mirabilis, Bacillus subtilis,
5-PELCZAR, Michael J.; CHAN, E. C. S.;
Escherichia coli, Proteus vulgaris e
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