Ana Cristina Mansanaro Magliano - Biblioteca Digital de Teses e

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Ana Cristina Mansanaro Magliano

Acanthamoeba
Diversidade de spp no Brasil:
isolamento, aspectos fisiológicos, genotipagem e
relações filogenéticas entre isolados de ambiente e de
casos clínicos

Tese apresentada ao Programa de
Pós-Graduação em Biologia da
Relação Patógeno-Hospedeiro do
Instituto de Ciências Biomédicas
da Universidade de São Paulo,
para a obtenção do título de
Doutor em Ciências.

São Paulo
2011
Ana Cristina Mansanaro Magliano

Acanthamoeba
Diversidade de spp no Brasil:
isolamento, aspectos fisiológicos, genotipagem e
relações filogenéticas entre isolados de ambiente e de
casos clínicos

Tese apresentada ao Programa de
Pós-Graduação em Biologia da
Relação Patógeno-Hospedeiro do
Instituto de Ciências Biomédicas
da Universidade de São Paulo,
para a obtenção do título de
Doutor em Ciências

Área de concentração: Biologia da
Relação Patógeno-Hospedeiro

Orientadora: Profa. Dra. Silvia
Celina Alfieri
Versão original

São Paulo
2011
DADOS DE CATALOGAÇÃO NA PUBLICAÇÃO (CIP)
Serviço de Biblioteca e Informação Biomédica do
Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
© reprodução parcial

Magliano, Ana Cristina Mansanaro.
Diversidade de Acanthamoeba spp no Brasil: isolamento, aspectos
fisiológicos, genotipagem e relações filogenéticas entre isolados de
ambiente e de casos clínicos / Ana Cristina Mansanaro Magliano. --
São Paulo, 2011.

Orientador: Silvia Celina Alfieri.

Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências
Biomédicas. Departamento de Parasitologia. Área de concentração:
Biologia da Relação Patógeno-Hospedeiro. Linha de pesquisa: Biologia
celular e molecular e bioquímica de Acanthamoeba.

Versão do título para o inglês: Diversity of Acanthamoeba spp in
Brazil: isolation, physiological features, genotyping and phylogenetic
relationships among environmental and clinical isolates.

Descritores: 1. Acanthamoeba 2. SSU rRNA 3. Genotipagem 4.
Relações filogenéticas 5. Serina peptidases 6. Efeito citopático I.
Alfieri, Silvia Celina II. Universidade de São Paulo. Instituto de
Ciências Biomédicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia da
Relação Patógeno-Hospedeiro III. Título.

ICB/SBIB0134/2011
UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS
______________________________________________________________________________________________________________
Candidato(a): Ana Cristina Mansanaro Magliano.
Título da Tese: Diversidade de Acanthamoeba spp no Brasil: isolamento,
aspectos fisiológicos, genotipagem e relações filogenéticas entre
isolados de ambiente e de casos clínicos.
Orientador(a): Silvia Celina Alfieri.
A Comissão Julgadora dos trabalhos de Defesa da Tese de Doutorado, em sessão
pública realizada a ................./................./................., considerou
( ) Aprovado(a) ( ) Reprovado(a)
Examinador(a): Assinatura: ...............................................................................................
Nome: .......................................................................................................
Instituição: ................................................................................................
Examinador(a): Assinatura: ................................................................................................
Nome: .......................................................................................................
Instituição: ................................................................................................
Examinador(a): Assinatura: ................................................................................................
Nome: .......................................................................................................
Instituição: ................................................................................................
Examinador(a): Assinatura: ................................................................................................
Nome: .......................................................................................................
Instituição: ................................................................................................
Presidente: Assinatura: ................................................................................................
Nome: .......................................................................................................
Instituição: ................................................................................................

Aos meus pais (Jano e Lucila) e
a minha irmã (Ana Carolina).
Ao meu marido (Daniel)
e a minha filha (Ana Beatriz).
Só consegui realizar este
trabalho graças a vocês!
AGRADECIEMNTOS

A Prof. Dra. Silvia Celina Alfieri, pela valiosa orientação e amizade por todos esses
anos. Todo o meu aprendizado e muito do que do sou hoje devo a sua orientação.
Obrigada por tudo!
Á Prof. Dra Marta Maria Geraldes Teixeira, que foi muito mais do que uma co-
orientadora; participou e contribuiu ativamente em todas as etapas do meu
trabalho. Muito obrigada!
Ao Prof. Carlos Eduardo Winter pelos valiosos conhecimentos que me foram
passados durante estes anos de convivência.
Á Prof. Dra. Tânia Bijovski, por sempre me receber tão bem em seu laboratório.
Á Carmem Takata, Marta Campaner, Marcio Yamamoto e Elizabeth M. F. Pral
pela amizade e apoio técnico á este trabalho.
Aos meus grandes amigos do laboratório: Charlotte, Tarcilla, Omar, Flávia,
Luciana, Adriana, Paola, Zuleima, Oneida, Carminha, André e Robson. Meus
amigos de bancadas, de discussões científicas, de todas as horas. Agradeço em
especial a Dra. Luciana e Tarcilla por ter me ajudado na montagem da minha tese.
Agradeço especialmente a Dra. Flávia Maia que sempre me ajudou durante o
desenvolvimento deste trabalho e que com muita paciência, me passou todo o seu
conhecimento e sabedoria; além da grande amiga que encontrei.
Aos grandes amigos do departamento: Alexandre Moura, André Franco, Fabiana
Jordão e Emília Kimura, Manoel Peres. A convivência com vocês durante todos
estes anos tornaram a minha rotina muito mais agradável.

Obrigada a todos do Departamento de Parasitologia!
PARA SÊR GRANDE, sê inteiro: nada
Teu exagera ou exclui.
Sê todo em cada coisa.
Põe quanto és no mínimo que fazes.
Assim em cada lago a lua toda
Brilha, porque alta vive

Fernando Pessoa
A ausência da evidência
não significa evidência da
ausência

Carl Sagan
PREFÁCIO

“Esta dissertação foi elaborada de acordo as normas da CPG/ICB relativas a outras
formas de elaboração de tese de doutorado que permite a inclusão, como Anexo, de
resultados já publicados ou submetidos em periódicos internacionais indexados em
língua inglesa. Permite ainda que detalhes metodológicos e resultados obtidos sejam
aqueles contido no artigo anexado ao corpo da tese”.

Artigo que compõe o corpo da tese:

ANEXO 1 - Genetic diversity among Acanthamoeba spp. isolated in Brazil: genotyping
of clinical and environmental isolates, and phylogenetic inferences (manuscrito em
preparação)

ANEXO 2 - Genotyping, physiological features and proteolytic activities of a
potentially pathogenic Acanthamoeba sp isolated from tap water in Brazil.

ANEXO 3 - Revisiting the Acanthamoeba species that form star-shaped cysts
(genotypes T7, T8, T9, and T17): characterisation of seven new Brazilian environmental
isolates and phylogenetic inferences (manuscrito submetido)