An attempt to determine variability of RNA/DNA ratios during Dicentrarchus labrax larval development. Aproximació a la determinació de la variabilitat de la relació DNA/RNA durant el desenvolupament larval del llobarro Dicentrarchus labrax PDF
Preview An attempt to determine variability of RNA/DNA ratios during Dicentrarchus labrax larval development. Aproximació a la determinació de la variabilitat de la relació DNA/RNA durant el desenvolupament larval del llobarro Dicentrarchus labrax
AAnn aatttteemmpptt ttoo ddeetteerrmmiinnee vvaarriiaabbiilliittyy ooff RRNNAA//DDNNAA rraattiiooss dduurriinngg DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx llaarrvvaall ddeevveellooppmmeenntt MMaaggddaalleennaa IIGGLLEESSIIAASS,, BBeeaattrriizz MMOORRAALLEESS,, SSooffiiaa MMAASSSSUUTTÍÍ aanndd XXaavviieerr BBUUSSQQUUEETTSS SSHHNNBB IIgglleessiiaass,, MM..,, MMoorraalleess,, BB..,, MMaassssuuttíí,, SS.. aanndd BBuussqquueettss,, XX.. 22000022.. AAnn aatttteemmpptt ttoo ddeetteerrmmiinnee vvaarriiaabbiilliittyy ooff RRNNAAIIDDNNAA rraattiiooss dduurriinngg DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx llaarrvvaall ddeevveellooppmmeenntt.. BBoollll.. SSOOCCoo HHiisstt.. NNaatt.. BBaalleeaarrss,, 4455:: 1155--2200.. IISSSSNN 00221122--226600XX.. PPaallmmaa ddee MMaalllloorrccaa.. RRNNAA aanndd DDNNAA ccoonntteenntt ooff sseeaabbaassss ((DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx)) llaarrvvaaee wweerree ddeetteerrmmiinneedd ffrroomm ddaayy 1100 ttoo ddaayy 6600 aafftteerr hhaattcchhiinngg iinn aann aaqquuaaccuullttuurree ffaacciilliittyy.. OOuurr rreessuullttss sshhooww aa ttwwoo--pphhaassee mmoodduullaattiioonn oofftthhee RRNNAAllDDNNAA rraattiioo tthhrroouugghhoouutt sseeaabbaassss llaarrvvaaee ddeevveellooppmmeenntt.. FFrroomm ddaayy 1100 aafftteerr hhaattcchhiinngg tthheerree iiss aann iinnccrreeaassee iinn tthhee RRNNAAIIDDNNAA rraattiioo rreeaacchhiinngg mmaaxxiimmaall vvaalluueess aatt ddaayy 3300 ooff aaggee.. TThheenn,, tthhee RRNNAAllDDNNAA rraattiioo ddeeccrreeaasseedd rreeaacchhiinngg mmiinniimmaall vvaalluueess aatt ddaayy 6600 aafftteerr hhaattcchhiinngg.. TThheessee rreessuullttss aarree ccoonnssiisstteenntt wwiitthh aa hhiigghh rraattee ooff pprrootteeiinn ssyynntthheessiiss dduurriinngg tthhee ffiirrsstt 3300 ddaayyss ooff sseeaabbaassss ddeevveellooppmmeenntt ccoommppaarreedd wwiitthh tthhee rreesstt ooff tthhee ddeevveellooppmmeennttaall ppeerriioodd ssttuu SSOOCCIIEETTAATT DD''HHIISSTTOORRIIAA ddiieedd.. TThhee rreessuullttss aarree ccoommppaarreedd wwiitthh tthhaatt ooff oottoolliitthh ggrroowwtthh ccaarrrriieedd oouutt ffoorr tthhee ssaammee ssppee NNAATTUURRAALL DDEE LLEESS BBAALLEEAARR SS cciieess llaarrvvaaee.. KKeeyywwoorrddss:: mmaarriinnee ffiisshh,, llaarrvvaaee,, DDNNNNRRNNAA rraattiioo,, DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx.. AAPPRROOXXIIMMAACCIIÓÓ AA LLAA DDEETTEERRMMIINNAACCIIÓÓ DDEE LLAA VVAARRIIAABBIILLIITTAATT DDEE LLAA RREELLAACCIIÓÓ DDNNAA//RRNNAA DDUURRAANNTT EELL DDEESSEENNVVOOLLUUPPAAMMEENNTT LLAARRVVAALL DDEELL LLLLOOBBAARRRROO DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx.. SS''hhaa ddeetteerrmmiinnaatt eell ccoonnttiinngguutt ddee DDNNAA ((aacciidd ddeessooxxiirriibboonnuucclleeiicc)) ii ddee RRNNAA ((iillcciidd rriibboonnuucclleeiicc)) eenn llaarrvveess ddee lllloobbaarrrroo ((DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx)) dd''eeddaattss ccoommpprree sseess eennttrree 1100 ii 6600 ddiieess ddee vviiddaa,, pprroocceeddeennttss dd''uunnaa ppllaannttaa ddee ccuullttiiuu.. EEllss rreessuullttaattss oobbttiinngguuttss mmoossttrreenn dduueess ffaasseess ddiiffeerreenncciiaaddeess ddee ddeesseennvvoolluuppaammeenntt dd'' aaqquueesstteess llaarrvveess,, bbaassaaddeess eenn llaa rreellaacciióó RRNNAAllDDNNAA aavvaalluuaaddaa.. SS''oobbsseerrvvaa uunn aauuggmmeenntt ddee llaa pprrooppoorrcciióó ddee RRNNNNDDNNAA ddeess ddeell ddiiaa 1100 ffiinnss eell ddiiaa 3300 ddee vviiddaa,, ppeerr aa ddeeccrreeiixxeerr aa ccoonnttiinnuuaacciióó,, ttrroobbaanntt eellss vvaalloorrss mmíínniimmss eenn lleess llaarrvveess ddee 6600 ddiieess ddee vviiddaa.. PPaarraauulleess ccllaauu:: ppeeiixxooss mmaarriinnss,, llaarrvveess,, rreellaacciióó DDNNNNRRNNAA,, DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx.. MMaaggddaalleennaa IIGGLLEESSIIAASS,, CCeennttrroo OOcceeaannooggrrááffiiccoo ddee BBaalleeaarreess,, MMuueellllee ddee PPeellaaiirreess ss//nn,, 0077007700 PPaallmmaa.. ee--mmaaiill::mmaaggddaalleennaa..iigglleessiiaass@@bbaa..iieeoo..eess;; BBeeaattrriizz MMOORRAALLEESS.. CCSSIICC--UUIIBB IInnssttiittuutt MMeeddiitteerrrraannii dd''EEssttuuddiiss AAvvaann~~aattss,, MMiigguueell MMaarrqquuééss 2211,, 0077119900 EEssppoorrlleess.. SSooffiiaa MMAASSSSUUTT!! PPllaannttaa ddee AAccuuiiccuullttuurraa ««EEss MMuurrtteerraarr»»;; AAllccúúddiiaa.. XXaavviieerr BBUUSSQQUUEETTSS.. IINNSSAAUU NNII,, PPaallmmaa.. RReecceeppcciióó ddeell mmaannuussccrriitt:: 1199--aabbrr--0022;; rreevviissiióó aacccceeppttaaddaa:: 1166--mmaaii--0022.. 1166 BBoollll.. SSooccoo HHiisstt.. NNaatt.. BBaalleeaarrss,, 4455 ((22000022)) IInnttrroodduuccttiioonn bb)) NNuucclleeiicc aacciidd eexxttrraaccttiioonn TToottaall RRNNAA aanndd DDNNAA wweerree eexxttrraacctteedd ffrroomm DDeetteerrmmiinnaattiioonn ooff llaarrvvaall ccoonnddiittiioonn hhaass llaarrvvaaee ssaammpplleess bbyy rreeppeeaatteedd wwaasshhiinngg ooff tthhee wwiiddeesspprreeaadd aapppplliiccaattiioonnss iinn tthhee ffiieelldd ooff ffiisshh eeccoo hhoommooggeenniisseedd ttiissssuuee wwiitthh oorrggaanniicc ssoollvveennttss llooggyy,, aass aann iinnddiiccaattoorr ooff ssuubb--IIeetthhaall eeffffeeccttss.. AA mmeett ((SSaammbbrrooookk,, 11998899)) wwiitthh mmooddiiffiiccaattiioonnss.. BBrriieeffllyy,, hhooddoollooggyy uusseedd ttoo aass sseess ss llaarrvvaall ccoonnddiittiioonn bbaasseedd eeaacchh llaarrvvaaee wwaass hhoommooggeenniisseedd iinn 11 mmii ssaattuurraatteedd oonn tthhee qquuaannttiiffiiccaattiioonn ooff llaarrvvaall nnuucclleeiicc aacciiddss pphheennooll ((ppHH 77..55)) pplluuss 110000 111111 ooff ddiissttiilllleedd wwaatteerr,, ((RRNNAAllDDNNAA)) ccoonncceennttrraattiioonn aalllloowwss ttoo iinnffeerr dduurriinngg 3300 ss uussiinngg aann UUllttrraa--TTuurrrraaxx TT2255 hhoommooggee ggrroowwtthh aanndd nnuuttrriittiioonnaall ssttaattuuss aaccccuurraatteellyy nneeiizzeerr ((IIKKAA,, SSttaauuffeenn,, GGeerrmmaannyy)) aanndd tthheenn iinnccuu ((BBuucckklleeyy,, 11998844;; MMccLLaauugghhlliinn eett aall..,, 11999955)).. TThhiiss bbaatteedd ffoorr 55 mmiinnoo aatt rroooomm tteemmppeerraattuurree.. TTwwoo hhuunn mmeetthhoodd iiss bbaasseedd oonn tthhee aassssuummppttiioonn tthhaatt tthhee ccoonn ddrreedd 111111 ooff cchhlloorrooffoorrmm wweerree tthheenn aaddddeedd ttoo hhoommoo cceennttrraattiioonn ooff RRNNAA cchhaannggeess aass aa ffuunnccttiioonn ooff tthhee ggeennaatteess,, vvoorrtteexxeedd ffoorr 3300 ss,, aanndd tthheenn iinnccuubbaatteedd aatt aammoouunntt ooff pprrootteeiinn ssyynntthheessiiss ooccccuurrrriinngg iinn tthhee cceellll rroooomm tteemmppeerraattuurree ffoorr 55 mmiinnoo TThhee ssaammpplleess wweerree wwhheerreeaass DDNNAA ccoonncceennttrraattiioonn iinnddiiccaatteess tthhee nnuumm cceennttrriiffuuggeedd aatt 1100,,000000 gg ffoorr 1100 mmiinn aatt 44°°CC.. TThhee bbeerr ooff cceellllss iinn aann oorrggaanniissmm ((BBuucckklleeyy,, 11998800;; aaqquueeoouuss pphhaasseess wweerree sseeppaarraatteedd aanndd mmiixxeedd wwiitthh 11998844)).. TThheerreeffoorree,, tthhee RRNNAAllDDNNAA rraattiioo iiss ccoonnssii 550000 111111 ooff 110000%% iissoopprrooppyyll aallccoohhooll.. TThhee mmiixxttuurreess ddeerreedd aa mmeeaassuurree ooff pprrootteeiinn ssyynntthheettiicc aaccttiivviittyy ppeerr wweerree bbrriieeffllyy sshhaacckkeedd,, iinnccuubbaatteedd ffoorr 1100 mmiinn aatt cceellll ((BBuucckklleeyy,, 11998844;; BBuullooww,, 11998877;; RRoobbiinnssoonn aanndd rroooomm tteemmppeerraattuurree aanndd tthheenn cceennttrriiffuuggeedd aatt 1100,,000000 WWaarree,, 11998888;; HHoovveennkkaammpp,, 11999900;; HHoovveennkkaammpp aanndd gg ffoorr 1100 mmiinn aatt 44°°CC.. TThhee nnuucclleeiicc aacciidd pprreecciippiittaattee WWiittttee,, 11999911)).. IInn tthhiiss ccoonnttrriibbuuttiioonn wwee aapppplliieedd tthhiiss ((DDNNAA pplluuss RRNNAA)) wwaass wwaasshheedd ttwwiiccee wwiitthh 11 mmii ooff tteecchhnniiqquuee ttoo aasssseess llaarrvvaall ccoonnddiittiioonn dduurriinngg ddeevvee 7755%% eetthhaannooll aanndd ddiissssoollvveedd iinn DDNNAAssee--RRNNAAssee llooppmmeenntt ooff aa tteemmppeerraattee wwaatteerr ssppeecciieess rreeaarreedd aatt ffrreeee wwaatteerr ((nnuucclleeiicc aacciidd ssoolluuttiioonn)).. ccoonnttrroolllleedd ccoonnddiittiioonnss ((DD.. llaabbrraaxx,, LL.. 11775588)).. ee)) EEnnzziimmaattiicc ddeetteerrmmiinnaattiioonn ooff tthhee rreellaattiivvee ccoonntteenntt ooff DDNNAA aanndd RRNNAA MMaatteerriiaall aanndd mmeetthhooddss TThhiiss tteecchhnniiqquuee iiss bbaasseedd oonn tthhee mmeetthhoodd ddeess ccrriibbeedd bbyy CClleemmmmeesseenn ((11998888)).. TTwwoo aalliiqquuoottss ((tteerr mmeedd RRNNAA aanndd DDNNAA aalliiqquuoottss)) ooff tthhee nnuucclleeiicc aacciidd aa)) RReeaarriinngg ccoonnddiittiioonnss ssoolluuttiioonn wweerree pprroocceesssseedd iinn ppaarraalllleell.. TToo tthhee RRNNAA LLaarrvvaaee wweerree oobbttaaiinneedd ffrroomm nnaattuurraallllyy aalliiqquuoott ((55 IIllll)) 55 111111 ooff DDNNAAssee ssoolluuttiioonn ((DDnnaassee 11,, ssppaawwnniinngg aadduulltt sseeaa bbaassss llaarrvvaaee,, hhaattcchheedd ffrroomm tthhee RRnnaassee ffrreeee,, llOOUUll11ll11 BBooeehhrriinnggeerr MMaannnnhheeiimm,, ssaammee ssppaawwnniinngg aanndd rreeaarreedd aatt tthhee EEss MMuurrtteerraarr GGeerrmmaannyy)) aanndd 4400 111111 ooff DDNNAAssee bbuuffffeerr ((4400 mmMM AAqquuaaccuullttuurree ffaacciilliittyy ((MMaalllloorrccaa,, SSppaaiinn)).. TThhee TTrriiss--HHCC!!.. PPHH 77..99,, 1199 mmMM NNaaCC!!,, 66 mmMM MMggCChh,, 1100 eexxppeerriimmeennttaall ccoonnddiittiioonnss wweerree aass ffoolllloowwss:: sseeaa mmMM CCaaCChh)) wweerree aaddddeedd.. TToo tthhee DDNNAA aalliiqquuoott ((1100 bbaassss wweerree kkeepptt iinnddoooorrss iinn aa 11220000--lliitteerr ttaannkk ffiilllleedd IIllll)),, 22 111111 ooff RRNNAAssee bbuuffffeerr ((BBooeehhrriinnggeerr wwiitthh ffrreeeellyy cciirrccuullaattiinngg sseeaawwaatteerr.. IInniittiiaall ssppeecciimmeenn MMaannnnhheeiimm,, GGeerrmmaannyy)) 55 111111 ooff RRNNAAssee ((RRNNaassee,, ddeennssiittyy wwaass 3399 llaarrvvaaee//ll.. NNaattuurraalllliigghhtt ccyycclleess wweerree DDnnaassee ffrreeee,, 00..55 ((gg//IIllll;; BBooeehhrriinnggeerr MMaannnnhheeiimm,, mmaaiinnttaaiinneedd.. FFoooodd ((AArrtteemmiiaa sspppp)) wwaass ssuupppplliieedd aadd GGeerrmmaannyy)) aanndd 3333 111111 ooff nnuucclleeaassee--ffrreeee wwaatteerr wweerree lliibbiittuumm aanndd aaccccoorrddiinngg ttoo tthhee nnuuttrriittiioonnaall rreeqquuiirree aaddddeedd.. BBootthh ssaammpplleess wweerree iinnccuubbaatteedd dduurriinngg oonnee mmeennttss ooff tthhee sseeaa bbaassss dduurriinngg tthhee eexxppeerriimmeennttaall hhoouurr aatt 3377°°CC.. TThhee rreeaaccttiioonnss wweerree tteerrmmiinnaatteedd bbyy ppeerriiooddoo WWaatteerr tteemmppeerraattuurree ((mmeeaassuurreedd ddaaiillyy aatt aaddddiinngg 990000 111111 ooff nnuucclleeaassee--ffrreeee wwaatteerr aanndd ppllaacciinngg nnoooonn)) wwaass kkeepptt aatt 1199--2200°°CC aanndd tthhee ssaalliinniittyy aatt 3399 tthhee ttuubbeess aatt rroooomm tteemmppeerraattuurree.. ppSSUU.. SSppeecciimmeennss wweerree hhaattcchheedd iinn FFeebbrruuaarryy 11999966 aanndd wweerree kkiilllleedd aatt rreegguullaarr tteenn ddaayyss iinntteerrvvaa11ss.. dd)) QQuuaannttiiffiiccaattiioonn ooff DDNNAA aanndd RRNNAA bbyy fflluuoo LLaarrvvaaee wweerree mmeeaassuurreedd ttoo tthhee nneeaarreesstt 00..11 mmmm rreesscceennccee aannaallyyssiiss uunnddeerr aa ddiisssseeccttiinngg rrnniiccrroossccooppee,, ddrriieedd oonn bblloottttiinngg DDNNAA aanndd RRNNAA ccoonncceennttrraattiioonn wweerree qquuaannttii ppaappeerr,, aanndd wweeiigghheedd ttoo tthhee nneeaarreesstt 11 IIllgg.. TThhee llaarr ffiieedd bbyy aa mmeetthhoodd bbaasseedd oonn tthhaatt ooff HHiigguucchhii aanndd vvaaee wweerree ssuubbsseeqquueennttllyy ffrroozzeenn iinn lliiqquuiidd nniittrrooggeenn.. DDooIIlliinnggeerr ((11999922)) oorriiggiinnaallllyy ddeessccrriibbeedd ffoorr qquuaannttii-- MM.. IIgglleessiiaass eett aall..,, VVaarriiaabbiilliittyy ooff RRNNAA//DDNNAA ooff DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx 1177 ffiieeaattiioonn ooff aammpplliiffiieedd DDNNAA sseeqquueenneeeess.. BBrriieeffllyy TThhee RRNNAA eeoonntteenntt iinneerreeaassee ffrroomm 22..66 ¡¡..ttgg aatt aaggee 1100 DDNNAA aanndd RRNNAA aalliiqquuoottss ((5500 ¡¡..ttII)) wweerree mmiixxeedd wwiitthh ttoo 3322..6688 ¡¡..ttgg aatt aaggee 5500,, sshhoowwiinngg aa ddeerreeaassee aatt aaggee wwaatteerr ttoo aa ffiinnaall vvoolluummee ooff 990000 ¡¡..ttII.. TThheenn,, 5500 ¡¡..ttII oorr 6600 ((2211..77 ¡¡..ttgg)) ((TTaabbllee 11;; FFiigg.. 22 BB)).. SSYYBBRR GGrreeeenn IIII ((FFMMCC BBiiooPPrroodduueettss,, RRooeekkllaanndd,, TThhee RRNNAA//DDNNAA rraattiioo wwaass 11..0044 iinniittiiaallllyy,, MMEE,, UUSSAA)) ssoolluuttiioonn aatt 11//110000 ddiilluuttiioonn wwaass aaddddeedd.. iinneerreeaassiinngg ttoo nneeaarr 22 aatt ddaayy 3300.. TThheenn tthhee FFlluuoorreesseeeenneeee wwaass mmeeaassuurreedd iinn aa fflluuoorreesseeeenneeee RRNNAA//DDNNAA rraattiioo ddeeeerreeaasseedd rreeaaeehhiinngg mmiinniimmuumm ssppeeeettrroo--fflluuoorroommeetteerr ((mmooddeell RRFF--11550011;; SShhiimmaaddzzuu,, vvaalluueess ((00..55)) aatt ddaayy 6600 ((TTaabbllee 11,, FFiigg.. 22 CC)).. JJaappaann)).. FFoorr SSYYBBRR GGrreeeenn IIII fflluuoorreesseeeenneeee ddeetteerr FFooeeuussiinngg iinn tthheessee rreessuullttss wwee eeoonnssiiddeerr ttwwoo aaggee mmiinnaattiioonn eexxcciittaattiioonn wwaass aatt 449900 nnmm aanndd eemmiissssiioonn ggrroouuppss,, 1100 ttoo 4400 ddaayyss aanndd oollddeerr.. TThhee nnoonn--ppaarraa aatt 552200 nnmm.. TThhee aammoouunntt ooff fflluuoorreesseeeenneeee ooff eeaaeehh mmeettrriiee MMaannnn--WWhhiittnneeyy tteesstt sshhoowweedd ssiiggnniiffiieeaanntt ssaammppllee wwaass mmeeaassuurreedd aanndd tthhee fflluuoorreesseeeenneeee uunniittss ddiiffffeerreenneeeess oonn tthhee RRNNAA,, DDNNAA aanndd RRNNAAllDDNNAA wweerree eevvaalluuaatteedd uussiinngg ssttaannddaarrdd eeuurrvveess wwhhiieehh eeoonn eeoonntteenntt bbeettwweeeenn tthhoossee ggrroouuppss ((TTaabbllee 22,, FFiigg.. 22 CC)).. ssiisstteedd ooff 55 ppooiinnttss ooff DDNNAA ((hheerrrriinngg ssppeerrrrnn DDNNAA,, SSiiggmmaa CChheemmiieeaall CCOO.. SSaaiinntt LLoouuiiss,, MMOO,, UUSSAA)) oorr RRNNAA ((EE.. ccoollii rriibboossoommaall RRNNAA,, SSiiggmmaa CChheemmiieeaall DDiissccuussssiioonn CCOO.. SSaaiinntt LLoouuiiss,, MMOO,, UUSSAA)) eeoonntteenntt ((11--55 ¡¡..ttgg,, rreessuullttiinngg iinn aa lliinneeaarr rreellaattiioonnsshhiipp)).. TThhee ssttaannddaarrdd RRNNAA//DDNNAA rraattiiooss aarree eeoonnssiiddeerreedd aass uusseeffuull eeuurrvveess wweerree ppeerrffoorrrrnneedd pprriioorr eeaaeehh sseett ooff ssaammpplleess iinnddeeppeennddeenntt ggrroowwtthh mmeeaassuurree ooff iinnddiivviidduuaall ffiisshh fflluuoorreesseeeenneeee ddeetteerrrrnniinnaattiioonnss.. llaarrvvaaee ((BBuueekklleeyy,, 11998844)).. DDNNAA ooff iinnddiivviidduuaall eeeellllss iiss ffaaiirrllyy eeoonnssttaanntt,, ssoo tthhee DDNNAA eeoonntteenntt ooff wwhhoollee aanniimmaallss iinneerreeaasseess pprrooppoorrttiioonnaall ttoo iinneerreeaasseess iinn RReessuullttss eeeellll nnuummbbeerr ((ggrroowwtthh)).. HHoowweevveerr,, RRNNAA eeoonntteenntt ooff eeeellllss iiss vvaarriiaabbllee,, aanndd rreefflleeeettss aaeettiivvee pprrootteeiinn ssyynntt IInn tthhee aaqquuaaeeuullttuurree ffaaeeiilliittyy sseeaa bbaassss llaarrvvaaee hheessiiss.. RRNNAA//DDNNAA rraattiiooss hhaavvee bbeeeenn ffoouunndd ttoo bbee ssiizzee iinneerreeaasseedd ffrroomm 44..55 mmmm ttoottaalllleennggtthh ((TTLL)) aatt aaeeeeuurraattee iinnddiieeaattoorrss ooff rreeeeeenntt ffeeeeddiinngg ooff llaarrvvaaee,, 1100 ddaayyss ooff aaggee ttoo 1199 mmmm TTLL aatt 6600 ddaayyss ffoolllloowwiinngg hhiigghheerr rraattiiooss iinnddiieeaattee bbeetttteerr ffeeeeddiinngg eeoonnddiittiioonn aa lliinneeaarr rreellaattiioonnsshhiipp ((rr == 00..7777)) ((TTaabb11ee 11,, FFiigg..11AA)).. ((CCaanniinnoo,, 11999944)).. IInn tthhee ootthheerr hhaanndd,, llaarrvvaaee wweeiigghhtt iinneerreeaasseedd ffrroomm FFiirrsstt oouurr rreessuullttss sshhooww aann iinneerreeaassee ooff tthhee 00..4488 mmgg aatt 1100 ddaayyss ooff aaggee ttoo 3300..6677 mmgg aatt 6600 ddaayyss RRNNAA//DDNNAA rraattiioo ffrroomm 11..0044 aatt 1100 ddaayyss ooff ddeevvee rreeaaeehhiinngg aa ppllaatteeaauu aatt 5500 ddaayyss ((TTaabbllee 11,, FFiigg.. llBB)).. llooppmmeenntt ttoo 11..8866 (( 00..2299 aatt ddaayy 3300 ooff ddeevveellooppmmeenntt TThhee DDNNAA eeoonntteenntt iinneerreeaassee ffrroomm 22..5500 ¡¡..ttgg aatt ((TTaabb11ee 11;; FFiigg.. 22 CC)).. CClleemmmmeesseenn ((11998899)) pprrooppoosseedd aaggee 1100 ttoo 4422 ¡¡..ttgg aatt aaggee 6600,, sshhoowwiinngg aa bbiigg iinneerreeaa tthhaatt tthhee RRNNAA//DDNNAA rraattiioo ooff 11 iiss aann iinnddiieeaattoorr ooff aa ssee bbeettwweeeenn 4400 aanndd 5500 ddaayyss ((TTaabbllee 11;; FFiigg.. 22 AA)).. eerriittiieeaall lleevveell ooff ffeeeeddiinngg eeoonnddiittiioonnss.. IInn tthhee aaeeuuaa-- AAggee MMeeaann lleennggtthh MMeeaann wweeiigghhtt MMeeaannDDNNAA MMeeaann RRNNAA MMeeaann nn ((mmmm)) ((mmgg)) ((¡¡..ttgg)) ((¡¡..ttgg)) RRNNAA//DDNNAA 1100 44..5500 00..4488 22..5500 22..66 11..0044 11 2200 99..0066 ((00..7700)) 22..1111 ((00..2222)) 99..5533 ((66..9966)) 1122..6622 ((88..2277)) 11..6677 ((11..0022)) 55 3300 1100..8800 ((00..8844)) 55..7700 ((11..0077)) 1144..1188 ((55..0099)) 2255..5566 ((77..6633)) 11..8866 ((00..2299)) 55 4400 1144..3333 ((11..1155)) 99..6677 ((55..0044)) 1122..7766 ((77..9966)) 1199..5533 ((1155..4455)) 11..4444 ((00..3300)) 33 5500 1177..5500 ((00..5588)) 3322..9933 ((33..7722)) 3388..8844 ((1122..1177)) 3322..6688 ((1111..7777)) 00..9900 ((00..3344)) 44 6600 1199..0000 ((11..0000)) 3300..6677 ((88..2277)) 4422..0000 ((1177..1177)) 2211..7700 ((77..6688)) 00..5533 ((00..0044)) 33 TTaabbllee 11.. SSuummmmaarryy ooff llhhee nnaattaa aannaallyysseedd oonn DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx rreeaarreedd llaarrvvaaee iinn rreellaattiioonn ttoo aaggee ((ddaayyss ffrroomm eecclloo ssiioonn))..ss..dd.. iinn bbrraacckkeettss.. nn :: nnuummbbeerr ooff ffiisshh aannaallyysseedd.. TTaauullaa 11.. RReessuumm ddee lleess ddaaddeess aannaalliittzzaaddeess ddee lleess llaarrvveess ccuullttiivvaaddeess ddee DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx eenn rreellaacciióó aa ll''eeddaatt ((ddiieess ddeesspprrééss ddee ll''eecclloossiióó)),, ddeessvviiaacciióó eessttiimmddaarrdd eennttrree ppaarreenntteessii,, nn:: nnoommbbrree dd''eexxeemmppllaarrss aannaalliittzzaattss.. 1188 BBoollll.. SSOOCCoo HHiisstt.. NNaatt.. BBaalleeaarrss,, 4455 ((22000022)) TTaabbllee 22.. RReessuullttss ooff tthhee MMaannnn--WWhhiittnneeyy tteesstt oonn tthhee DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx llaarrvvaaee.. nn :: nnuummbbeerr ooff ffiisshh.. ss..dd.. :: ssttaannddaarrdd ddeevviiaattiioonn.. pp :: TTaauullaa 22.. RReessuullttaattss ddeell tteesstt ddee MMaannnn--WWhhiittnneeyy ssoobbrree lleess llaarrvveess ddee DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx.. nn:: nnoommbbrree ddee ppeeiixxooss.. ss..dd..:: ddeessvviiaacciióó eessttiimmddaarrdd.. pp:: pprroobbaabbiilliittaatt.. AAggee ((ddaayyss)) nn mmeeaann ss..dd.. pp DDNNAA ((¡¡..¡¡..gg)) 1100--4400 1144 1111..3388 66..5599 00..00000011 >>4400 77 4400..2200 1133..2233 RRNNAA ((¡¡..¡¡..gg)) 1100--4400 1144 1188..0000 1111..2299 00..0077 >>4400 77 2277..9988 1111..11 RRNNAAJJDDNNAA 1100--4400 1144 11..6644 00..6644 00..000033 >>4400 77 00..7744 00..3311 ccuullttuurree ffaacciilliittyy sseeaabbaassss llaarrvvaaee ssttaarrtteedd eexxooggeennoouuss dduurriinngg yyoollkk uuttiilliissaattiioonn,, bbuutt iimmpprroovviinngg rraappiiddllyy ffeeeeddiinngg oonn aaggee 1155--1166 ddaayyss ((AArrtteemmiiaa sspppp..)).. OOuurr oonnccee eexxooggeennoouuss ffeeeeddiinngg ssttaarrtteedd aanndd ffoolllloowwss aa RRNNAAJJDDNNAA rraattiioo ddaattaa ssuuggggeesstt tthhaatt sseeaabbaassss llaarrvvaaee ccoonnttiinnuuoouuss iimmpprroovveemmeenntt iinn ffeeeeddiinngg ccoonnddiittiioonn iinn ccaappttiivviittyy aarree aatt tthhee lleevveell ooff ccrriittiiccaall ffeeeeddiinngg rreeaacchhiinngg iittss mmaaxxiimmuumm aatt ddaayy 3300 ooff ddeevveellooppmmeenntt.. TThhee ccrriittiiccaall ccoonnddiittiioonn ddeemmoonnssttrraatteedd bbyy llaarrvvaaee 2255rr----------------------------------------------------------,, bbeeffoorree tthhee eexxooggeennoouuss ffeeeeddiinngg ssttaarrtteedd mmaayy bbee AA .. .. eexxppllaaiinneedd bbyy tthhee ffaacctt ooff iittss hhiigghh rraattee ooff RRNNAA 2200 IIrr ssyynntthheessiiss ((iinnddiiccaattiinngg pprrootteeiinn ssyynntthheessiiss)) aass iittss ss sshhoowwnn iinn FFiigguurree 22 BB.. PPrrootteeiinn ssyynntthheessiiss iiss aa hhiigghh eenneerrggyy--rreeqquuiirriinngg pprroocceessss tthhaatt rraappiiddllyy eexxhhaauusstt --'' 1100 yyoollkk eenneerrggeettiicc rreesseerrvveess.. OOnnccee tthhee aabbuunnddaanntt aanndd ~~ mmoorree eenneerrggeettiicc eexxooggeennoouuss ffeeeeddiinngg ssttaarrtteedd,, tthhee ::''SS 55 hhiigghh rraattiioo ooff pprrootteeiinn ssyynntthheessiiss ccaann bbee mmaaiinnttaaiinneedd wwiitthhoouutt eenneerrggyy ddeeffiicciitt aanndd tthhee llaarrvvaaee rraappiiddllyy iimmpprroovvee iittss ccoonnddiittiioonn aanndd ssiizzee ((TTaabbllee 11;; FFiigg.. 11 1100 2200 3300 4400 5500 6600 AA)).. AAnn iinnccrreeaassee ooff RRNNAA//DDNNAA wwiitthh llaarrvvaall ssiizzee LLAARRVVAAEE AAGGEE ((ddaayyss)) hhaass bbeeeenn aallssoo rreeppoorrtteedd pprreevviioouussllyy oonn hheerrrriinnggss ((CClleerrnnmmeesseenn,, 11999944)).. 4400 BB •• IInn tthhee ootthheerr hhaanndd,, oouurr rreessuullttss cclleeaarrllyy sshhooww tthhaatt bbeeyyoonndd ddaayy 3300 ooff ddeevveellooppmmeenntt,, tthhee ..[[ 3300 RRNNAAIIDDNNAA rraattiioo ddiimmiinniisshh sstteeaaddiillyy rreeaacchhiinngg llooww ffJJ--:: vvaalluueess ((lloowweerr tthhaann tthhee ccrriittiiccaall rraattiioo ooff 11)) aatt ddaayy ((!!)) ~~ 2200 5500 ((00..9900 ±± 00..3344)) aanndd eevveenn lloowweerr aatt ddaayy 6600 ((00..5533 ww •• ±± 00..0044)) ((TTaabbllee 11;; FFiigg.. 22 CC)).. SSeeaabbaassss iinniittiiaattee mmeettaa ~~ 1100 mmoorrpphhoossiiss pprreecciisseellyy bbeettwweeeenn 5500--6600 ddaayyss ooff ddeevvee ::''SS •• llooppmmeenntt.. TThhiiss,, ccoorrrreellaatteess wwiitthh tthhee oobbsseerrvveedd ssllooww oo ddoowwnn ooff llaarrvvaaee wweeiigghhtt ((TTaabbllee 11;; FFiigg.. llBB)) aanndd 1100 2200 3300 4400 5500 6600 LLAARRVVAAEE AAGGEE ((ddaayyss)) FFiigg.. 11.. AA--LLiinneeaarr rreellaattiioonnsshhiipp ((rr == 00..7777)) bbeettwweeeenn ttoottaalllleennggtthh ((mmmm)) aanndd aaggee ((ddaayyss aafftteerr hhaattcchhiinngg)) ooff sseeaa bbaassss ((DD.. llaabbrraaxx)) llaarrvvaaee ffrroomm aaqquuaaccuullttuurree ffaacciilliittyy.. BB--RReellaattiioonnsshhiipp bbeettwweeeenn ttoottaall wweeiigghhtt ((mmgg)) aanndd aaggee ooff sseeaa bbaassss llaarrvvaaee ffrroomm aaqquuaaccuullttuurree ffaacciilliittyy,, rreeaacchhiinngg aa ppllaatteeaauu aatt ddaayy 5500.. FFiigg.. 11.. AA-- RReellaacciióó lliinneeaall ((rr == 00..7777)) eennttrree lloonnggiittuudd ttoottaall ((mmmm)) ii eeddaatt ((ddiieess ddeesspprrééss dd''iinnccuubbaacciióó)) ddee lllloobbaarrrroo ((DD.. llaabbrraaxx)) llaarrvveess dd''aaqquuiiccuullttuurraa.. BB--RReellaacciióó eennttrree ppeess ttoottaall ((mmgg)) ii eeddaatt ddee llaarrvveess ddee lllloobbaarrrroo dd''aaqquuiiccuullttuurraa,, aattaannyyeenntt uunnaa ppeennddeenntt hhoorriittzzoonnttaall eell ddiiaa 5500.. MM.. IIgglleessiiaass eett aall..,, VVaarriiaabbiilliittyy ooff RRNNAA//DDNNAA ooff DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx 1199 aaccttiivvee pprrootteeiinn ssyynntthheessiiss ((RRNNAA//DDNNAA rraattiioo)).. RRNNAAllDDNNAA rraattiioo ss ddeessppiittee tthhee iinnccrreeaassee iinn llaarrvvaall SSttaaggee--ddeeppeennddeenntt RRNNAAllDDNNAA rraattiioo ss hhaavvee bbeeeenn ssiizzee.. TThhiiss iinnddiiccaattee tthhaatt mmeettaammoorrpphhoossiiss iiss aa ccrriittii rreeppoorrtteedd iinn ssoollee ((RRiicchhaarrdd eett aall..,, 11999911)).. TThhuuss,, oouurr ccaall ppeerriioodd iinn sseeaabbaassss ddeevveellooppmmeenntt iinn tteerrmmss ooff llaarrvvaaee wweerree uunnddeerrttaakkiinngg aa ccrriittiiccaall ssttaaggee ccoorrrreess ffeeeeddiinngg ccoonnddiittiioonnss ((aass iinnddiiccaatteedd bbyy RRNNAAllDDNNAA ppoonnddiinngg ttoo tthhee eenndd ooff mmeettaammoorrpphhoossiiss wwiitthh llooww rraattiiooss)) pprroobbaabbllyy bbyy tthhee iinnccrreeaasseedd mmeettaabboolliicc eexxppeennsseess dduuee ttoo iinnccrreeaasseedd mmoobbiilliittyy aanndd bbooddyy 6600..------------------------------------------------------~~ cchhaannggeess ((ffoorrmmaattiioonn ooff ssccaalleess,, eettcc)).. AA DDaaiillyy ggrroowwtthh iinnccrreemmeennttss ooff tthhee oottoolliitthh iiss 5500 aannootthheerr mmeetthhoodd ooff aasssseessssiinngg llaarrvvaall ggrroowwtthh aanndd 4400 ccoonnddiittiioonn ((ee.. gg.. GGoovvoonnii eett aall..,, 11998855,, SSuutthheerrss eett ~~ 3300 aall..,, 11999966)).. OOuurr rreessuullttss ooff RRNNAAllDDNNAA rraattiioo aass ~~ iinnddiivviidduuaall sseeaabbaassss llaarrvvaaee ggrroowwtthh mmeeaassuurree aarree iinn oo 2200 ccoonnccoorrddaannccee wwiitthh aavvaaiillaabbllee ddaattaa oonn oottoolliitthh 1100 ggrroowwtthh ((GGuuttiiéérrrreezz aanndd MMoorraalleess--NNiinn,, 11998866)),, tthhaatt ddeemmoonnssttrraatteedd iinn sseeaabbaassss llaarrvvaaee rreeaarreedd iinn aann OO~~~~ww--~~~~~~--uu~~~~~~~~~~~~ 1100 6600 aaqquuaaccuullttuurree ffaacciilliittyy aa ssiimmiillaarr bbiipphhaassiicc ppaatttteerrnn iinn tthhee tthhiicckknneessss ooff tthhee ddaaiillyy ggrroowwtthh iinnccrreemmeennttss.. 4400 BB 3300 RReeffeerreenncceess ~~ «« 2200 BBuucckklleeyy,, LLJJ.. 11998800.. CChhaannggeess iinn rriibboonnuucclleeiicc aacciidd,, zz eexx:: ddeeooxxyyrriibboonnuucclleeiicc aacciidd aanndd pprrootteeiinn ccoonntteenntt,, dduurriinngg 1100 oonnttooggeenneessiiss iinn wwiinntteerr fflloouunnddeerr,, PPsseeuuddoopplleeuu rroonneecctteess aammeerriiccaannuuss,, aanndd tthhee eeffffeecctt ooff ssttaarrvvaattiioonn.. FFiisshh.. BBuullll.. ((UUSS)),, 7777:: 770033--770088.. BBuucckklleeyy,, LL..JJ.. 11998844.. RRNNAA--DDNNAA rraattiioo:: aann iinnddeexx ooff llaarr 1100 2200 3300 4400 5500 6600 vvaall ffiisshh ggrroowwtthh iinn tthhee sseeaa.. MMaarr.. BBiioo!!..,, 8800:: 229911--229988.. BBuullooww,, FF..ll 11998877.. RRNNAA--DDNNAA rraattiiooss aass iinnddiiccaattoorrss ooff 22..55 ee ggrroowwtthh iinn ffiisshh:: aa rreevviieeww.. IInn:: RR..ee.. SSuummmmeerrffeelldd aanndd GG..EE.. HHaallll ((eeddss..)):: AAggee aanndd ggrroowwtthh iinn ffiisshh.. IIoowwaa 22..00 SSttaattee UUnniivveerrssiittyy PPrreessss,, AAmmeess,, IIoowwaa:: 4455--6644.. «« CCaanniinnoo,, MM..ee.. 11999944.. EEffffeeccttss ooff tteemmppeerraattuurree aanndd ffoooodd zz oo 11..55 pp<<00..000055 aavvaaiillaabbiilliittyy oonn ggrroowwtthh aanndd RRNNAA//DDNNAA rraattiiooss ooff 44:: zz ** wwaalllleeyyee ppoolllloocckk TThheerraaggrraa cchhaallccooggrraammmmaa ((PPaallllaass)) eexx:: 11..00 ,,-------- eeggggss aanndd llaarrvvaaee.. JJ.. EExxpp.. MMaarr.. BBiioo!!.. EEccoo!!..,, 117755:: 11-- nn** 1166.. 00..55 CClleemmmmeesseenn,, CC..MM.. 11998888.. AA RRNNAA aanndd DDNNAA fflluuoorreesscceenn ccee tteecchhnniiqquuee ttoo eevvaalluuaattee tthhee nnuuttrriittiioonnaall ccoonnddiittiioonn OO ooff iinnddiivviidduuaall mmaarriinnee ffiisshh llaarrvvaaee.. MMeeeerreessffoorrsscchh,, 1100 ttOO 3300 4400 5500 6600 3322:: 113344--114433.. LLAARRVVAAEE AAGGEE ((ddaayyss)) FFiigg.. 22.. AA..--DDNNAA ccoonntteenntt ((jj....llgg)) ooff ffeedd sseeaa bbaassss ((DD.. llaabbrraaxx)) llaarrvvaaee iinn rreellaattiioonn ttoo llaarrvvaall aaggee ((ddaayyss aafftteerr hhaattcchhiinngg)).. BB.. RRNNAA ccoonntteenntt ((jj....llgg)) ooff ffeedd sseeaa bbaassss llaarrvvaaee iinn rreellaattiioonn ttoo llaarrvvaall aaggee.. ee..--RRNNAA//DDNNAA rraattiioo ooff ffeedd sseeaabbaassss llaarrvvaaee iinn rreellaa ttiioonn ttoo llaarrvvaall aaggee.. AAsstteerriisskkss rreeffeerrss ttoo ssiiggnniiffiiccaanntt ddiiffffeerreenncceess bbeettwweeeenn aaggee ggrroouuppss ((MMaannnn--WWhhiittnneeyy UU--tteesstt,, pp<<00..000055)).. FFiigg.. 22.. AA.. CCoonnttiinngguutt dd''AADDNN ((jj....llgg)) ddee llaarrvveess ddee !!lloobbaarrrroo ((DD..llaabbrraaxx)) eennggrreeiixxaaddeess eenn rreellaacciióó aa ll''eeddaatt llaarrvvaall ((ddiieess ddeess pprrééss dd''iinnccuubbaacciióó)).. BB..--ccoonnttiinngguutt dd''AARRNN ((jj....llgg)) ddee llaarrvveess aalliimmeennttaaddeess eenn rreellaacciióó aa ll''eeddaatt llaarrvvaa!!.. CC..--RRNNAAllDDNNAA pprroo ppoorrcciióó ddee llaarrvveess ddee lllloobbaarrrroo aalliimmeennttaaddeess eenn rreellaacciióó aammbb ll''eeddaatt llaarrvvaa!!.. EEllss aasstteerriissccss iinnddiiqquueenn ddiiffeerreenncciieess ssiiggnniiffiiccaa ttiivveess eennttrree ccaatteeggoorriieess dd''eeddaatt ((MMaannnn --WWhhiittnneeyy UU--tteesstt,, pp << 00..000055)).. 2200 BBoollll.. SSOOCCoo HHiisstt.. NNaatt.. BBaalleeaarrss,, 4455 ((22000022)) CClleemmmmeesseenn,, CC.. 11998899.. RRNNAAllDDNNAA rraattiioo ss ooff llaabboorraattoorryy MMccLLaauugghhlliinn,, RR.. LL..,, FFeerrgguussoonn,, MM..MM.. aanndd NNooaakkeess,, rreeaarreedd aanndd wwiilldd hheerrrriinngg llaarrvvaaee ddeetteerrmmiinneedd wwiitthh aa DD..LL..GG.. 11999955.. CCoonncceennttrraattiioonnss ooff nnuucclleeiicc aacciiddss aanndd hhiigghhllyy sseennssiittiivvee fflluuoorreesscceennccee mmeetthhoodd.. 11.. FFiisshh pprrootteeiinn aass iinnddiicceess ooff nnuuttrriittiioonnaall ssttaattuuss ffoorr rreecceennttllyy BBiiooll..,, 3355 ((SSuuppppll.. AA)):: 333311--333333.. eemmeerrggeedd bbrrooookk ttrroouutt ((SSaallvveelliinnuuss ffoonnttiinnaalliiss)).. CCaann.. CClleemmmmeesseenn,, ee.. 11999944.. TThhee eeffffeecctt ooff ffoooodd aavvaaiillaabbiilliittyy,, JJ.. FFiisshh.. AAqquuaatt.. SSccii..,, 5522:: 884488--885544.. aaggee oorr ssiizzee oonn IIhhee RRNNAAllDDNNAA rraattiioo ooff iinnddiivviidduuaallllyy RRiicchhaarrdd PP..,, BBeerrggeerroonn,, JJ..PP..,, BBoouullhhiicc,, MM..,, GGaallooiiss,, RR.. aanndd mmeeaassuurreedd hheerrrriinngg llaarrvvaaee llaabboorraattoorryy ccaalliibbrraattiioonn.. LLee RRuuyyeett,, JJ..PP.. 11999911.. EEffffeecctt ooff ssttaarrvvaattiioonn oonn RRNNAA,, MMaarr.. BBiioo//..,, 111188:: 337777--338822.. DDNNAA aanndd pprrootteeiinn ccoonntteenntt ooff llaabboorraattoorryy rreeaarreedd llaarr GGoovvoonnii,, JJJJ..,, CChheesstteerr,, AAJJ..,, HHoossss,, DD..EE.. aanndd OOrrttnneerr,, PP..BB.. vvaaee aanndd jjuuvveenniilleess ooff SSoolleeaa ssoolleeaa.. MMaarr.. EEccoo//.. 11998855.. AAnn oobbsseerrvvaattiioonn ooff eeppiissooddiicc ffeeeeddiinngg aanndd PPrrooggrr.. SSeerr..,, 7722:: 6699--7799.. ggrroowwllhh ooff llaarrvvaall LLeeiioossttoommuuss xxaanntthhuurruuss iinn tthhee nnoorrtt RRoobbiinnssoonn,, SS..MM..ee.. aanndd WWaarree,, DD..MM.. 11998888.. OOnnttooggeenniicc hheerrnn GGuullff ooff MMeexxiiccoo.. JJ.. PPllaannkkttoonn RReess..,, 77:: 113377-- ddeevveellooppmmeenntt ooff ggrroowwtthh rraatteess iinn llaarrvvaall PPaacciiffiicc 114466.. hheerrrriinngg CClluuppeeaa hhaarreenngguuss ppaallllaassii,, mmeeaassuurreedd wwiitthh GGuuttiiéérrrreezz,, EE.. aanndd MMoorraalleess--NNiinn,, BB.. 11998866.. TTiimmee sseerriieess RRNNAA--DDNNAA rraattiioo ss iinn IIhhee SSttrraaiitt ooff GGeeoorrggiiaa,, BBrriittiisshh aannaallyyssiiss ooff ddaaiillyy ggrroowwllhh iinn DDiicceennttrraarrcchhuuss llaabbrraaxx CCoolluummbbiiaa.. CCaann.. JJ.. FFiisshh.. AAqquuaatt.. SSccii..,, 4455:: 11442222-- LL.. oottoolliitthhss.. JJ.. EExxpp.. MMaarr.. BBiiooll.. EEccoo//..,, 110033:: 116633--117799.. 11442299.. HHiigguucchhii,, RR.. aanndd DDoolllliinnggeerr,, GG.. 11999922.. SSiimmuullttaanneeoouuss SSaammbbrrooookk,, JJ..,, FFrriittsscchh,, EE..FF.. aanndd MMaanniiaattiiss,, TT.. 11998899.. aammpplliiffiiccaattiioonn aanndd ddeetteeccttiioonn ooff ssppeecciiffiicc DDNNAA MMoolleeccuullaarr cclloonniinngg.. AA llaabboorraattoorryy mmaannuuaall.. SSeeccoonndd sseeqquueenncceess.. BBiiootteecchhnnoollooggyy,, 1100:: 441133--441177.. EEddiittiioonn.. CCoolldd SSpprriinngg HHaarrbboorr LLaabboorraattoorryy PPrreessss.. HHoovveennkkaammpp,, FF.. 11999900.. GGrroowwtthh ddiiffffeerreenncceess iinn llaarrvvaall ppllaaii EEddss.. NN.. IIrrwwiinn.. ccee PPlleeuurroonneecctteess ppllaatteessssaa iinn IIhhee ssoouullhheerrnn bbiigghhtt ooff SSuullhheerrss,,II.. MM..,, CClleeaarryy,, JJJJ..,, BBaattttaagglleennee,, SS.. CC.. aanndd EEvvaannss,, IIhhee NNoorrtthh SSeeaa aass iinnddiiccaatteedd bbyy oottoolliillhh iinnccrreemmeennttss RR.. 11999966.. RReellaattiivvee RRNNAA ccoonntteenntt aass aa mmeeaassuurree ooff aanndd RRNNAAllDDNNAA rraattiiooss.. MMaarr.. EEccoo//.. PPrroogg.. SSeerr..,, 5588:: ccoonnddiittiioonn iinn llaarrvvaall aanndd jjuuvveenniillee ffiisshh.. MMaarr.. 220055--221155.. FFrreesshhwwaatteerr RReess..,, 4477:: 330011--330077.. HHoovveennkkaammpp,, FF.. aanndd WWiiUUee,, JJJJ.. 11999911.. GGrroowwllhh,, oottoolliillhh ggrroowwtthh aanndd RRNNAAllDDNNAA rraattiiooss ooff llaarrvvaall ppllaaiiccee PPlleeuurroonneecctteess ppllaatteessssaa iinn IIhhee NNoorrtthh SSeeaa 11998877 ttoo 11998899.. MMaarr.. EEccoo//.. PPrroogg.. SSeerr..,, 7700:: 110055--111166..
The list of books you might like
