Общая реаниматология. 2007. Том III. №1

90 Pages·1.802 MB·Russian

by  коллектив авторов

ISSN 1813-9779
ÎÁÙÀß
ÐÅÀÍÈÌÀÒÎËÎÃÈß
НАУЧНО(cid:7)ПРАКТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
Òîì III ¹ 1
Москва
2007

ISSN 1813(cid:2)9779
ÎÁÙÀß
ÐÅÀÍÈÌÀÒÎËÎÃÈß
НАУЧНО(cid:30)ПРАКТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
Главный редактор
В. В. Мороз
Заместители главного редактора
Г. А. Рябов, А. М. Голубев
РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ
Peter Baskett (Великобритания) Patrick Kochanek (США)
И. Г. Бобринская Е. А. Лужников
Leo Bossaert (Бельгия) В. Д. Малышев
Max Harry Weil (США) В. А. Михельсон
А. В. Волков Л. В. Молчанова
М. А. Выжигина Ю. В. Никифоров
О. А. Долина Г. Г. Порошенко
Н. А. Карпун В. И. Решетняк
В. Л. Кожура К. В. Судаков
И. А. Козлов Ю. А. Чурляев
А. Н. Корниенко И. И. Яковлева
Научный редактор В. Ю. Васильев
РЕДАКЦИОННЫЙ СОВЕТ
С. Ф. Багненко (С.(cid:30)Петербург) Р. И. Новикова (Донецк)
Г. А. Бояринов (Н.(cid:30)Новгород) Ю. С. Полушин (С.(cid:30)Петербург)
Г. В. Гвак (Иркутск) Д. В. Садчиков (Саратов)
Е. В. Григорьев (Кемерово) Л. В. Усенко (Днепропетровск)
В. Т. Долгих (Омск) Н. Д. Ушакова (Ростов(cid:30)на(cid:30)Дону)
А. Я. Евтушенко (Кемерово) Х. Х. Хапий (Москва)
Г. А. Ливанов (С.(cid:30)Петербург) В. И. Черний (Донецк)
В. Н. Лукач (Омск) Н. В. Шаповалова (Воронеж)
Э. К. Николаев (Екатеринбург)
Технический секретарь М. Ю. Муравьёва
Учредитель и издатель журнала «Общая реаниматология»
© Научно(cid:30)исследовательский институт общей реаниматологии РАМН
© Фонд «Медицина критических состояний»
Адрес редакции: 107031, Москва, ул. Петровка, 25, стр. 2. Тел./Факс: 694(cid:30)27(cid:30)08, 694(cid:30)65(cid:30)05, 650(cid:30)96(cid:30)77.
E(cid:30)mail: [email protected], [email protected].
Отдел рекламы:694(cid:30)65(cid:30)05, 694(cid:30)69(cid:30)84. E(cid:30)mail: [email protected].
Журнал «Общая реаниматология» зарегистрирован Федеральной службой по надзору за соблюдением
законодательства в сфере массовых коммуникаций и охране культурного наследия 02 ноября 2004 года.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации ПИ № ФС77(cid:30)18690
© Оригинал(cid:30)макет изготовлен Издательским домом «Красная Площадь». Верстка С. В. Шишков.
Издательский дом «Красная площадь»: 117105, Москва, ул. Нагатинская, д. 3а, ГНЦА. E(cid:30)mail: [email protected].
Индекс 46338— для индивидуальных подписчиков. Индекс 46339— для предприятий и организаций.
ISSN 1813(cid:30)9779; Установочный тираж 3000 экз.
Журнал «Общая реаниматология» входит в Перечень ВАК периодических научных и научно(cid:30)технических изданий,
выпускаемых в Российской Федерации, в которых рекомендуется публикация основных результатов диссертаций
на соискание ученой степени доктора или кандидата наук
ISSN 1813(cid:2)9779
GENERAL
REANIMATOLOGY
Scientific(cid:30)and(cid:30)Practical Journal
Editor(cid:30)in(cid:30)Chief
V. V. Moroz
Deputies Editor(cid:30)in(cid:30)Chief
G. A. Ryabov, A. M. Golubev
EDITORIAL COMMITTEE
Peter Baskett (United Kingdom) Patrick Kochanek (USA)
I. G. Bobrinskaya Ye. A. Luzhnikov
Leo Bossaert (Belgium) V. D. Malyshev
Max Harry Weil (USA) V. A. Mikhelson
A. V. Volkov L. V. Molchanova
М. А. Vizhigina Yu. V. Nikiforov
O. A. Dolina G. G. Poroshenko
N. A. Karpun V. I. Reshetnyak
V. L. Kozhura K. V. Sudakov
I. A. Kozlov Yu. A. Churlyaev
A. N. Korniyenko I. I. Yakovleva
Scientific Editor V. Yu. Vasilyev
EDITORIAL BOARD
S. F. Bagnenko (Saint Petersburg) R. I. Novikova (Donetsk)
G. A. Boyarinov (Nizhni Novgorod) Yu. S. Polushin (Saint(cid:30)Petersburg)
G. V. Gvak (Irkutsk) D. V. Sadchikov (Saratov)
Ye. V. Grigoryev (Kemerovo) L. V. Usenko (Dnepropetrovsk)
V. T. Dolgikh (Omsk) N. D. Ushakova (Rostov(cid:30)on(cid:30)Don)
A. Ya. Yevtushenko (Kemerovo) Kh. Kh. Khapiy (Moscow)
G. A. Livanov (Saint Petersburg) V. I. Cherniy (Donetsk)
V. N. Lukach (Omsk) N. V. Shapovalova (Voronezh)
E. К. Nikolaev (Yekaterinburg)
Technical SecretaryM. Yu. Muravyeva
The founder and publisher of the journal «Obshchaya Reanimatologiya» (General Reanimatology)
© Research Institute of General Reanimatology, Russian Academy of Medical Sciences
© «Emergency Medicine» Fund
Editorial Office address
25 Petrovka St., Build. 2, Moscow 107031
Tel./fax: 694(cid:2)27(cid:2)08; 694(cid:2)65(cid:2)05; 650(cid:2)96(cid:2)77
E(cid:2)mail address: [email protected], [email protected]
Advertising Department
Tel./fax: 694(cid:2)65(cid:2)05; 694(cid:2)69(cid:2)84
E(cid:2)mail address: [email protected]
Contents
CONTENTS
INJURY, BLOOD LOSS, HYPOXIA
Kozhura V. L., Kondakova N. V., Zaichkina S. I., Rozanova O. M.
Genome Destabilization Upon Exposure
to Ionizing Radiation and During Acute Blood Loss . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5
Mantserov M. P., Moroz Ye. V., Astashov V. L.
Hemorrhage from the Major Duodenal Papilla
after Endoscopic Retrograde Cholecystopancreatography . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12
Rusakov V. V., Dolgikh V. T.
Myocardial Resistance to Oxygen and Glucose Deficiency
in Severe Brain Injury: Experimental Study . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16
Morgunov S. S., Matveyev A. V.
Correction of Hypoxia and Free Radical Oxidation Processes
in Gastroduodenal Hemorrhages . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22
EXOTOXICOSES AND INTOXICATIZONS
Belova M. V., Ilyashenko K. K., Yermokhina T. V.,
Luzhnikov Ye. A., Davydov B. V., Matveyev S. B.
Homeostatic Disorders in Acute Poisoning by Psychotropic Agents . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28
METABOLIC DISORSDERS IN CRITICAL CONDITIONS
Barkova E. N., Balabanova L. F., Zhdanova Ye. V.,
Kuznetsov V. V., Nazarenko Ye. V.
Erythropoiesis and Iron Exchange in Burns . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32
Savilov P. N.
Nitrogen Metabolism During Hepatectomy
and Hyperbaric Oxygenation: Experimental Study . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
NEW TECHNOLOGIES IN REANIMATOLOGY
Moroz V. V., Spirochkin D. Yu.
Assessment of Anesthetic and Resuscitative Care in Patients
with Acute Coronary Syndrome at Aortocoronary Bypass Surgery . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42
Krichevsky L. A., Kozlov I. A.
Different Modes of Monitoring and Correction of Cardiac Function
During Operations Under Extracorporeal Circulation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48
Gorbunova M. V., Tatarsky A. R., Babak S. L., Golubev L. A., Chuchalin A. G.
Clinical and Hemodynamic Effects of CPAP(cid:2)Therapy
in Patients with Cardiogenic Pulmonary Edema . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .52
REVIEWS
Shifman Ye. M., Yershov A. L.
Paracetamol: Therapeutic Use and the Problem of Acute Intoxications . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57
Rosenberg O. A.
Lung Surfactant and Its Use in Lung Diseases . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .66
GUIDELINES FOR THE PRACTITIONER
Sinkov S. V., Zabolotskikh I. B., Polin Ye. V., Averyanova L. Ye.
Correction of the Fibrinolytic Type of the Disseminated
Intravascular Coagulation Syndrome in the Early Postoperative Period . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .78
Anniversaries . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .82
Index of Authors and Papers Published in 2006 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .83
ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1 3
СОДЕРЖАНИЕ
ТРАВМА. КРОВОПОТЕРЯ. ГИПОКСИЯ
Кожура В. Л., Кондакова Н. В., Заичкина С. И., Розанова О. М.
Дестабилизация генома при действии ионизирующей радиации и острой кровопотери . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5
Манцеров М. П., Мороз Е. В., Асташов В. Л.
Кровотечение из области большого дуоденального сосочка
после эндоскопической ретроградной холецистопанкреатографии . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12
Русаков В. В., Долгих В. Т.
Устойчивость миокарда к дефициту кислорода и глюкозы
при тяжелой черепно(cid:2)мозговой травме (экспериментальное исследование) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16
Моргунов С. С., Матвеев А. В.
Коррекция гипоксии и процессов свободнорадикального окисления
при гастродуоденальных кровотечениях . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22
ЭКЗОТОКСИКОЗЫ И ИНТОКСИКАЦИИ
Белова М. В., Ильяшенко К. К., Ермохина Т. В.,
Лужников Е. А., Давыдов Б. В., Матвеев С. Б.
Нарушения гомеостаза при остром отравлении психотропными препаратами . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28
МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ ПРИ КРИТИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ
Баркова Э. Н., Балабанова Л. Ф., Жданова Е. В.,
Кузнецов В. В., Назаренко Е. В.
Эритропоэз и обмен железа при ожогах . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32
Савилов П. Н.
Метаболизм азота при резекции печени
и гипербарической оксигенации (экспериментальное исследование) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В РЕАНИМАТОЛОГИИ
Мороз В. В., Спирочкин Д. Ю.
Оценка анестезиологической и реаниматологической помощи
у больных с острым коронарным синдромом при аортокоронарном шунтировании . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42
Кричевский Л. А., Козлов И. А.
Различные варианты контроля и коррекции функции сердца
при операциях с искусственным кровообращением . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48
Горбунова М. В., Татарский А. Р., Бабак С. Л., Голубев Л. А., Чучалин А. Г.
Клинические и гемодинамические эффекты СРАР(cid:2)терапии
у пациентов с кардиогенным отеком легких . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .52
ОБЗОРЫ
Шифман Е. М., Ершов А. Л.
Парацетамол: терапевтическое применение и проблема острых отравлений . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57
Розенберг О. А.
Лёгочный сурфактант и его применение при заболеваниях лёгких . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .66
В ПОМОЩЬ ПРАКТИЧЕСКОМУ ВРАЧУ
Синьков С. В., Заболотских И. Б., Полин Е. В., Аверьянова Л. Е.
Коррекция фибринолитического варианта ДВС(cid:2)синдрома в раннем послеоперационном периоде . . . . . . . . . . . .78
Юбилей . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .82
Указатель авторов и статей, опубликованных в журнале в 2006 году . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .83
4 ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1
Травма. Кровопотеря. Гипоксия
ДЕСТАБИЛИЗАЦИЯ ГЕНОМА ПРИ ДЕЙСТВИИ
ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИИ И ОСТРОЙ КРОВОПОТЕРИ
В. Л. Кожура, Н. В. Кондакова, С. И. Заичкина, О. М. Розанова
ГУ НИИ общей реаниматологии РАМН, Москва,
Научно(cid:2)исследовательский и учебно(cid:2)методический Центр биомедицинских технологий ВИЛАР РАСХН, Москва,
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино Московская область
Genome Destabilization Upon Exposure to Ionizing Radiation
and During Acute Blood Loss
V. L. Kozhura, N. V. Kondakova, S. I. Zaichkina, O. M. Rozanova
Research and Training Center of Biomedical Technologies, All(cid:2)Russian Institute of Medicinal and Aromatic Plants,
Russian Academy of Agricultural Sciences, Moscow
Research Institute of Theoretical and Experimental Biophysics,
Russian Academy of Sciences, Pushchino, Moscow Region
В работе проводится сравнение наиболее распространенных в настоящее время цитогенетических методов (анализ хромоQ
сомных аберраций и микроядерный тест) для оценки действия стрессовых факторов на примере ионизирующей радиации.
Приведенные экспериментальные результаты позволяют сделать вывод, что микроядерный тест (МЯQтест) отражает состоQ
яние генома и выявляет повреждения при очень слабых воздействиях. С помощью этого микроядерного теста показано, что
гемическая гипоксия и реинфузия, как и другие стрессовые факторы, вызывают дестабилизацию генетического материала.
Ключевые слова:острая кровопотеря, ионизирующая радиация, дестабилизация генома, костный мозг, микроядерный тест.
The paper compares the currently available cytogenetic methods (chromosomal aberration test and micronuclear (MN)
test) for the evaluation of the impact of stressors, by using ionizing radiation as an example. The experimental findings
have led to the conclusion that the MN test shows the status of genome and reveals lesions upon very weak exposures.
The MN test has demonstrated that hemic hypoxia and reinfusion, as other stressors, cause genetic material destabilizaQ
tion. Key words:acute blood loss, ionizing radiation, genome destabilization, bone marrow, micronuclear test.
Массивная кровопотеря является одним из В последние годы показано, что гемическая ги(cid:2)
тяжелейших стрессовых факторов. С целью сни(cid:2) поксия [6—9], как и другие критические состояния,
жения летальности и числа осложнений изучали относится к свободнорадикальным патологиям, та(cid:2)
патологию органов и тканей как в процессе самой ким как лучевая болезнь, экологические токсикозы,
кровопотери, так и в постреанимационном перио(cid:2) заболевания сердечно(cid:2)сосудистой системы, нейро(cid:2)
де. Результаты, полученные различными биохими(cid:2) дегенеративные, онкологические, диабет, заболева(cid:2)
ческими и биофизическими методами при гемиче(cid:2) ния воспалительного генеза и т. д. Общим для них
ской гипоксии в модельных опытах на животных являются процессы образования активных форм
при обследовании таких тканей, как мозг, сердце, кислорода, свободных радикалов и низкомолеку(cid:2)
печень, свидетельствуют об изменениях на физи(cid:2) лярных эндогенных прооксидантов (перекись водо(cid:2)
ко(cid:2)химическом, клеточном и биохимическом рода, липопероксиды, гипохлорная кислота, перок(cid:2)
уровнях [1—5]. Наблюдаются увеличение молеку(cid:2) синитрит) и ослабления системы антиоксидантной
лярной массы белков, изменение активности фер(cid:2) защиты организма [6, 10—13].
ментов, уменьшение содержания РНК и ДНК в Известно, что образование активных ради(cid:2)
тканях и увеличение суммы нуклеиновых кислот в калов приводит к разрыву мембран, нарушению
крови, расстройство проницаемости внутрикле(cid:2) структуры хроматина клеток и, как следствие, к
точных мембран, усиление прижизненного проте(cid:2) появлению хромосомных аберраций и накопле(cid:2)
олиза, развитие ацидоза, нарушение процессов нию мутаций [10—13]. Вопрос о хромосомных
окислительного фосфорилирования, активация нарушениях при кровопотере и реинфузии до
гликолиза, изменения в структуре воды тканей. недавнего времени не был исследован. Однако
Интенсивность процессов зависит от вида органа и ряд обстоятельств указывал на то, что при геми(cid:2)
усиливается при реанимации. Результаты модель(cid:2) ческой гипоксии и реинфузии, нарушение ста(cid:2)
ных опытов служат делу создания реанимацион(cid:2) бильности генома должно было иметь место: 1)
ных технологий, обеспечивающих физическую и установлен факт изменения изоферментного
социальную полноценность человека. спектра ЛДГ, ключевого фермента заключитель(cid:2)
ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1 5
www.niiorramn.ru
ного этапа гликолиза, и высказано предположе(cid:2) рирующих тканей in vitroили in vivo.Этот метод
ние, что активирование М(cid:2)изоЛДГ связано с де(cid:2) основан на микроскопическом учете видимых
прессией гена, ответственного за биосинтез этой нарушений структуры хромосом (хромосомных
изоформы [3]; 2) при гемической гипоксии и ре(cid:2) аберраций) в метафазных клетках. Рутинная ок(cid:2)
инфузии наблюдается увеличение содержания раска метафазных пластинок позволяет выявить
нуклеиновых кислот в крови и снижение содер(cid:2) ахроматические пробелы (гепы), одиночные и
жания ДНК в ткани [1, 14]; 3) известно, что кро(cid:2) парные фрагменты хромосом, различные типы
вопотеря вызывает активацию кроветворения и хромосомных обменов. Использование диффе(cid:2)
ускорение фаз митоза при гемопоэзе [15, 16], ренциальных окрасок позволяет регистрировать
что, в свою очередь, может приводить к увели(cid:2) хромосомные инверсии и транслокации. Метод
чению ошибок при редупликации ДНК и, как ХА применяется для исследования механизмов
следствие, к хромосомным нарушениям в клет(cid:2) как образования самих хромосомных аберраций,
ках костного мозга. так и действия различных соединений [19, 20].
Эти обстоятельства позволили нам предпо(cid:2) При большой информативности метод ХА имеет
ложить, что острая массивная кровопотеря ин(cid:2) недостатки: он не поддается автоматизации, тру(cid:2)
дуцирует нестабильность генома, которая, как доемок и требует высокой квалификации иссле(cid:2)
известно, опасна своими отдаленными послед(cid:2) дователя, что приводит к большим затратам при
ствиями (увеличение риска онкологических за(cid:2) экспертных оценках.
болеваний, аномалий в развитии потомства, В последние годы широкое распространение
преждевременное старение, сокращение про(cid:2) получил другой способ оценки цитогенетических
должительности жизни) [17]. Данные об изуче(cid:2) повреждений — метод подсчета клеток с микро(cid:2)
нии нарушения состояния генетического аппа(cid:2) ядрами (МЯ) [21]. Известно, что МЯ образуются
рата при кровопотере и реанимации в из ацентрических фрагментов хромосом, не по(cid:2)
литературе отсутствуют. В настоящее время ге(cid:2) павших в дочерние ядра при переходе клеток во
нетическим исследованиям в реаниматологии второй клеточный цикл или в результате потери
придается большое значение [18]. целых хромосом. МЯ(cid:2)тест имеет ряд преиму(cid:2)
В последние годы достаточно подробно ществ по сравнению с методом хромосомных
описаны возможные последствия для здоровья аберраций. Для получения данных по критерию
человека и для всего живого загрязнения среды ХА необходимы множественные фиксации, по(cid:2)
обитания разнообразными физическими и хи(cid:2) скольку эффективность мутагенного действия
мическими агентами. Многие из этих агентов, химических соединений в большинстве случаев
попадая в организм через пищевые цепи, оказы(cid:2) различна в стадиях клеточного цикла. МЯ(cid:2)тест
вают не только общее токсическое действие, но позволяет получить сведения об эффективности
и вызывают специфические нарушения генети(cid:2) воздействия этих соединений по всему клеточно(cid:2)
ческого аппарата клеток, даже в чрезвычайно му циклу. Другим преимуществом МЯ(cid:2)теста яв(cid:2)
малых дозах. Под действием этих агентов, пря(cid:2) ляется четкость и простота при оценке поврежде(cid:2)
мо или косвенно, в геноме происходят струк(cid:2) ния, что сделало возможным его автоматизацию.
турные изменения. Когда генотоксическое дей(cid:2) Расчеты, сделанные Журковым В. С. с соавт., по(cid:2)
ствие затрагивает геном зародышевых клеток казывают, что при МЯ(cid:2)тесте кадровые, времен(cid:2)
человека или животных, часто гибнут эмбрио(cid:2) ные и экономические затраты, примерно, в 3 раза
ны или появляется потомство с врожденными меньше, чем при учете ХА [22].
пороками. Мутации в соматических клетках ве(cid:2) Задача данного обзора — рассмотреть роль МЯ(cid:2)
дут к ослаблению здоровья, вызывают раковые теста в оценке действия на организм экстремальных
заболевания, снижают активность иммунной факторов, дестабилизирующих состояние генома, в
системы, нарушают нервную и сердечно(cid:2)сосу(cid:2) сопоставлении с хромосомными повреждениями на
дистую системы, уменьшают продолжитель(cid:2) примере действия ионизирующей радиации и срав(cid:2)
ность жизни [19]. нить с эффектами при гемической гипоксии.
В этой связи в первоочередную задачу вхо(cid:2) Несколько лет назад было проведено сравни(cid:2)
дит адекватный подбор методов, с помощью ко(cid:2) тельное изучение количества повреждений, инду(cid:2)
торых возможно быстро и четко определить му(cid:2) цированных γ(cid:2)излучением, в первом и втором по(cid:2)
тагенность и канцерогенность веществ, широко сле воздействия митотических циклах по
применяемых в быту, в промышленности, в сель(cid:2) критерию ХА и МЯ(cid:2)тесту [23]. Было показано,
ском хозяйстве, в медицине, а также поиск ве(cid:2) что существует корреляция между количеством
ществ, предотвращающих или уменьшающих клеток с МЯ во втором митотическом цикле и ко(cid:2)
повреждающие воздействия. Чаще всего для личеством клеток с аберрациями в первом мито(cid:2)
этих целей используются цитогенетические ме(cid:2) тическом цикле, а при среднем выходе аберраций
тоды: во(cid:2)первых, метод учета хромосомных на клетку, равном 2 и более, наблюдается полное
аберраций (ХА) в метафазных клетках пролифе(cid:2) совпадение процента поврежденных клеток.
6 ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1
Травма. Кровопотеря. Гипоксия
faba[26]. На рис. 1 представлены дозовые зависи(cid:2)
мости выхода клеток с МЯ при остром γ(cid:2)облуче(cid:2)
нии фибробластов китайского хомячка и клеток
проростков Vicia faba.
Клетки китайского хомячка были подвергну(cid:2)
ты острому облучению на установке ГУБЭ в диа(cid:2)
пазоне доз 5—100 сГр при мощности дозы 47
сГр/мин. Клетки фиксировали через 24 часа, что(cid:2)
бы дать им пройти весь клеточный цикл после об(cid:2)
лучения. 10 000 клеток анализировали на каждую
экспериментальную точку. Аналогичные экспери(cid:2)
менты проводили и на Vicia faba. Цитологические
препараты готовили по стандартной методике
[26]. Видно, что дозовые зависимости для обоих
объектов имеют сложный характер: первоначаль(cid:2)
ный линейный участок кривой переходит в плато
Рис. 1. Зависимость выхода цитогенетического повреждения
в различных клетках от дозы γγQоблучения [25, 26]. в области доз 40—100 сГр, а затем наблюдается ли(cid:2)
нейная зависимость, но с отличным от первона(cid:2)
чального углом наклона, т. е. в области малых доз
на первом линейном участке наблюдается высо(cid:2)
кий уровень повреждений, чем можно было ожи(cid:2)
дать при экстраполяции результатов при высоких
дозах к малым.
Похожая дозовая зависимость была получена
нами и на культуре лимфоцитов периферической
крови человека, причем как по критерию МЯ, так
и по критерию ХА. На рис. 2 представлены дозо(cid:2)
вые зависимости, полученные при остром и хрони(cid:2)
ческом γ(cid:2)облучении цельной крови человека.
Цельную кровь культивировали по стандартной
методике. С каждого образца считали 150—200 ме(cid:2)
тафаз. Видно, что полученные дозовые кривые
также имеют сложный характер и совпадают. Ана(cid:2)
логичная дозовая зависимость получена нами и по
МЯ(cid:2)тесту, причем показано, что область доз, в ко(cid:2)
торой наблюдается плато, различна для разных
Рис. 2. Зависимость выхода цитогенетических повреждений
объектов. В радиочувствительной системе лимфо(cid:2)
в культуре лимфоцитов периферической крови человека от
дозы острого и хронического γγQоблучения [24, 27]. цитов человека плато наблюдается в области низ(cid:2)
ких доз, чем в радиоустойчивой системе растений.
Тест(cid:2)объектами для изучения цитогенетичес(cid:2) Таким образом, как при использовании метода
ких повреждений с помощью МЯ(cid:2)теста in vitroяв(cid:2) хромосомных аберраций, так и с помощью МЯ(cid:2)те(cid:2)
ляются клетки первичных и перевиваемых клеточ(cid:2) ста выявлены аналогичные дозовые зависимости.
ных культур животных и человека: лимфоциты Полученные результаты позволили выдвинуть ги(cid:2)
периферической крови [24], фибробласты кожи потезу для объяснения причины такой формы до(cid:2)
человека, фибробласты китайского хомячка, клет(cid:2) зовых зависимостей. Было высказано предположе(cid:2)
ки растений [25] и т. д. Для каждого объекта суще(cid:2) ние, что повышенная чувствительность в области
ствует своя специфика приготовления и окраски малых доз и наличие плато связаны с развитием
цитологических препаратов и подсчета МЯ. репарационных процессов. Индукция процессов
Наряду с хромосомным анализом, МЯ(cid:2)тест инициируется лишь при определенном уровне
на различных объектах используется при исследо(cid:2) возникающих повреждений, а уровень цитогенети(cid:2)
вании действия различных типов облучения и хи(cid:2) ческих повреждений, наблюдаемый на первом ли(cid:2)
мических веществ, модифицирующих радиацион(cid:2) нейном участке дозовой кривой, обусловлен отсут(cid:2)
ное повреждение. ствием или незначительным вкладом
Так с помощью МЯ(cid:2)теста было исследовано репарационных процессов в конечный результат.
влияние малых доз острого и хронического излу(cid:2) Подтверждением такого предположения послужи(cid:2)
чения на культурах фибробластов китайского хо(cid:2) ли эксперименты по изучению влияния веществ,
мячка [25] и лимфоцитов периферической крови усиливающих или ослабляющих радиационное
человека [27], на клетках растений бобов Vicia повреждение через воздействие их на процессы ре(cid:2)
ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1 7
www.niiorramn.ru
эритроидных клетках костного мозга. Как прави(cid:2)
ло, при употреблении термина «микроядерный
тест» in vivo подразумевается использование кле(cid:2)
ток эритроидного ряда грызунов [26, 27].
Этот метод принят Всемирной Организаци(cid:2)
ей здравоохранения в качестве одной из тест(cid:2)сис(cid:2)
тем при оценке влияния мутагенных факторов ок(cid:2)
ружающей среды на наследственность человека,
при скрининге фармацевтических препаратов, пи(cid:2)
щевых добавок, косметических средств, промыш(cid:2)
ленных отходов и т. д. и входит в список кратко(cid:2)
срочных тестов для выявления потенциально
канцерогенных веществ. Аналогичные регламен(cid:2)
тирующие документы существуют и в нашей стра(cid:2)
не [31]. Следует отметить, что в краткосрочных
тестах МЯ(cid:2)тест используется как равноценный
Рис. 3. Зависимость выхода цитогенетических повреждеQ
ний в фибробластах китайского хомячка от дозы γγQоблучеQ методу ХА. При положительной пробе на эритро(cid:2)
ния [27, 28]. идных клетках на мутагенность дальнейшие ис(cid:2)
пытания на батарее тестов уже не проводятся.
парации. На рис. 3 представлена дозовая зависи(cid:2) Полихроматофильные эритроциты (ПХЭ) в
мость накопления микроядер при обработке фиб(cid:2) костном мозге являются наиболее удобной популя(cid:2)
робластов китайского хомячка кофеином — изве(cid:2) цией клеток для подсчета частоты микроядер [29].
стным ингибитором репарации, в концентрации Они представляют собой предпоследний этап в
8(cid:2)10(cid:2)4 М, и известным радиопротектором β(cid:2)мер(cid:2) процессе эритропоэза и, одновременно, конечный
каптоэтиламином (МЭА) (10(cid:2)4 М), который, как продукт серии делений бластовых клеток. У грызу(cid:2)
было показано нами ранее, воздействует на репа(cid:2) нов бластовая стадия состоит из 6—7 клеточных де(cid:2)
рационные процессы. Видно, что на первом линей(cid:2) лений, каждое из которых продолжается примерно
ном участке дозовой кривой модифицирующее 10 часов, причем 80% времени приходится на S(cid:2)ста(cid:2)
действие кофеина отсутствует, а в области плато и дию клеточного цикла. Сразу после последнего ми(cid:2)
второго линейного участка возрастает до 3(cid:2)х Гр. тоза бластовой клетки, дочерние клетки вступают в
При воздействии МЭА в области плато процент стадию ортохроматофильных эритроцитов, проте(cid:2)
клеток с МЯ не уменьшается, а на втором линей(cid:2) кающая от 3 до 10 часов, и в течение которой ядро
ном участке наблюдается значительный защитный выталкивается из клетки. Образуются ПХЭ, кото(cid:2)
эффект до уровня повреждений, соответствующе(cid:2) рые созревают в течение 10—33 часов по данным
го уровню повреждений в области плато, т. е. об(cid:2) различных авторов. За это время они претерпевают
ласть плато на фоне МЭА продлевается до 2,5 Гр. различные структурные и метаболические измене(cid:2)
Эти данные подтверждают не только истинное су(cid:2) ния и превращаются в нормохроматофильные или
ществование плато, но и интерпретацию получен(cid:2) зрелые эритроциты (НХЭ).
ных результатов. Поскольку такие агенты, как радиация, не яв(cid:2)
Таким образом, приведенные эксперимен(cid:2) ляются специфическими к клеточной стадии и мо(cid:2)
тальные результаты, полученные с помощью МЯ(cid:2) гут индуцировать МЯ в клетках, находящихся в
теста, подтверждают возможность применения G2(cid:2)фазе последнего деления бластов, эффекты от
его также для поиска новых веществ, усиливаю(cid:2) них могут обнаруживаться немного раньше, чем от
щих или уменьшающих повреждение генома. большинства агентов, зависимых от S(cid:2)стадии. По(cid:2)
В настоящее время для изучения способности нятно, что определение оптимального отрезка вре(cid:2)
различных мутагенных факторов индуцировать мени от воздействия изучаемого фактора до мак(cid:2)
цитогенетические повреждения предпочтение час(cid:2) симального выхода микроядер в ПХЭ необходимо
то отдают тестам на клетках млекопитающих in для повышения точности регистрации эффектов.
vitro. Поскольку в экспериментах in vitroполучае(cid:2) Для большинства S(cid:2)независимых агентов,
мые результаты значительно зависят от условий включая радиацию, рефрактерный интервал, т.е.
культивирования и неспецифических эффектов, время между обработкой агентом и первым наблю(cid:2)
возникновение которых невозможно in vivo, в тех даемым ростом частоты ПХЭ с микроядрами в ко(cid:2)
случаях, когда есть возможность выбора между те(cid:2) стном мозге лежит в пределах от 8 до 12 часов. С
стами in vitroи in vivo, предпочтение следует отда(cid:2) учетом митотической задержки, индуцируемой та(cid:2)
вать последним. Из всех микроядерных методов кой дозой, как 1,5 Гр и транзитного времени самой
оценки цитогенетического повреждения, которые стадии ПХЭ, получаем, что максимальный выход
применяются на животных in vivo, самым широко МЯ следует ожидать в интервале от 24 до 30 ч.
используемым является метод определения МЯ в
8 ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2007, III; 1